一串红高效离体再生体系研究

为建立一串红高效再生体系,研究了0.1% HgCl2不同灭菌时间对一串红种子和外植体污染率和启动率(发芽率)的影响,以及不同激素组合对一串红外植体茎段、带节茎段和叶片愈伤组织诱导率及其分化率的影响。结果表明：采用0.1% HgCl2处理9 min是一串红外植体较为理想的表面灭菌时间,而一串红种子处理8 min有较低的污染率和较高的发芽率;采用无菌苗的茎段和叶片能诱导出质量较好的愈伤组织,但其进一步分化产生不定芽的能力较差,而采用带节茎段诱导愈伤获得了较多的分化苗,且1.5 mg ·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.2 mg ·L-1 NAA配方适于一串红愈伤组织的诱导,2.0 mg ·L-16-BA+0.1 mg ·L-1 NAA组合是适宜一串红愈伤组织分化的激素配方。此外,含0.5 mg ·L-1 NAA的1/2MS固体培养基能使一串红分化苗生根率在90%以上,且移栽后一串红成活率可达80%以上。     

两个茄子品种高效再生体系的建立

【目的】建立茄子高效再生体系,为遗传转化、种质创新研究奠定基础.【方法】以‘兰杂一号’和‘兰杂二号’两个茄子品种为试材,通过对不同质量浓度外源激素组合的筛选,研究基因型、外植体类型、苗龄、外源生长调节剂组合对不定芽分化与伸长的影响.【结果】‘兰杂二号’的不定芽分化率显著高于‘兰杂一号’;子叶的不定芽分化能力强于下胚轴和茎段;11~13d苗龄的外植体不定芽分化频率较高;‘兰杂一号’和‘兰杂二号’分别在6-BA/IBA为10∶1和30∶1的配比下,分化率达最高,分别为89.58%、94.97%;在6-BA/IBA为1∶2配比下有利于两个品种不定芽伸长,伸长率分别高达91.67%、96.88%.【结论】适宜‘兰杂一号’和‘兰杂二号’不定芽分化的培养基分别为MS+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA和MS+3.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA;适宜不定芽伸长的培养基为MS+0.1mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA;最佳生根培养基为1/2 MS培养基.     

6个紫花苜蓿栽培品种高效再生体系的建立

建立高频的紫花苜蓿再生体系,为采用基因工程技术定向改良紫花苜蓿品种奠定基础。以中国6个紫花苜蓿栽培品种的子叶、下胚轴、叶片为外植体,研究不同外源激素、基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织诱导培养及再生的影响。结果表明:新疆大叶苜蓿品种叶片胚性愈伤组织诱导率、分化率及出苗率最佳,分别为95.0%、72.7%和40.0%。最佳诱导培养基为改良SH培养基+2.0mg.L-1 2,4-D+0.25mg.L-1 KT;最佳分化培养基及出苗培养基为MS。此外,还确定生根培养基中以茎段基部蘸取100mg.L-1 IBA以及添加7.5g.L-1蔗糖可提高生根率。     

两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立

以Sunrise和Geo两个蓝莓品种试管苗叶片为外植体材料,以改良的WPM为基本培养基,研究了暗培养时间、叶片放置方式和不同浓度激素组合（ZT、IBA、TDZ）对2个蓝莓品种叶片不定芽再生的影响。结果表明：最适的暗培养时间为14d,近轴面放置效果最好,不同基因型不定芽再生能力不同,Sunrise品种在WPM＋4．0mg／L ZT＋0．3mg／L IBA＋1．0mg／L TDZ＋20g／L蔗糖＋6g／L琼脂培养基中生长最好,离体叶片不定芽再生频率达100％,再生不定芽数可达4．5个以上;Geo品种最适宜培养基为WPM＋4．0mg／LZT＋0．3mg／LIBA＋20g/L蔗糖＋6g／L琼脂,叶片不定芽再生频率达到100％。     

开封菊花的部分品种的外植体再生体系的研究

以河南开封本地的菊花品种的叶片,茎段和茎尖为外植体,在配比不同浓度的生长调节素NAA和6-BA的MS基本培养基上诱导培养,通过外植体直接培养的途径获得再生植株,通过比较,获得了能够形成大量的,稳定的再生植株。通过不同品种的再生频率的比较,为基因转化建立了高效稳定的再生体系,为菊花基因工程奠定了基础。     

菊花外植体再生体系的研究

以不同小菊品种的叶片、茎段、花瓣及子房为外植体进行再生培养。实验结果表明：不同品种、不同外植体对相同激素水平的反应是不同的。以叶片为外植体时,品种Rm 27-2的分化率高于Rm6-4;Rm27-2最适培养基为MS BA0．5mg/L NAA0．5mg/L和MS BA2．0mg/L NAA0．2mg/L,而品种Rm6-4为MS BA6．0mg/L NAA0．4mg／L;茎段分化率高于叶片,叶片基部分化率高于中上部。子房培养较适宜的培养基为MS BA1．0mg/L十NAA1．0mg／L和MS BA2．0mg／L NAA2．0mg/L;MS BA20mg／L NAA0．2mg/L培养基可有效诱导花瓣产生愈伤组织及芽的分化。并对细胞分裂素、生长素在再生中的作用及适宜浓度作了探讨。     

菊花2个品种高效再生体系的建立

以地被菊花2个品种‘铺地金’和‘北林红’的叶片为外植体,以MS为基本培养基,以不同浓度配比的6-BA,NAA为生长调节物质进行离体培养,直接分化出不定芽获得再生植株.试验表明:‘铺地金’叶片外植体再生的最适培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 1.0 mg/L,再生率高达96%,其叶柄在此培养基上的再生率为90%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L,再生率为96%,但其茎段和叶柄在此培养基上不能高效再生.‘铺地金’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.01 mg/L,每腋芽外植体平均增殖不定芽数达到5.5个.‘北林红’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05mg/L和MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.01mg/L,腋芽外植体平均增殖不定芽数达到6.3个和5.6个,二者之间的差异不显著.     

夏威夷菠萝高效再生体系研究

采用菠萝试管苗的叶片、叶鞘、茎段和茎薄片作外植体,以MS或1/2 MS为基本培养基,应用正交试验设计方法研究了不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA和AgNO3对夏威夷菠萝不定芽的诱导效果,并在添加不同激素组合的培养基中进行芽的增殖和生根培养研究.结果表明,茎段为诱导不定芽的最佳外植体,6-BA是影响不定芽产生的最主要因素.其中MS 6-BA 5.0 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L AgNO3 2.0 mg/L为不定丛芽诱导的最佳培养基,诱导率为83.3%;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L为芽增殖的最佳培养基,可分化成绿色小苗;1/2 MS IBA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L为小苗生根的最佳培养基,生根粗壮,生根率达100%.     

白花除虫菊高效再生体系的建立

【目的】筛选出适宜白花除虫菊外植体的消毒方法、外植体诱导、继代培养及生根培养阶段适宜的培养基配方,建立白花除虫菊高效再生体系。【方法】以白花除虫菊尚未张开的花蕾作为再生体系的外植体材料,花蕾经过灭菌消毒以后,采用MS固体培养基,比较不同种类植物生长调节剂浓度配比对白花除虫菊花蕾诱导出芽、增殖及生根等关键环节的影响。【结果】白花除虫菊花蕾外植体最适宜的消毒条件为75%酒精处理30 s后用0.10%氯化汞溶液消毒10 min,之后用15%次氯酸溶液处理15 min;白花除虫菊花蕾诱导芽的最适培养基为MS+2.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1TDZ+0.2 mg·L^-1IBA;白花除虫菊芽增殖的最适培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1TDZ+0.1 mg·L^-1IBA;白花除虫菊生根的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1IAA+0.1 mg·L^-1IBA;炼苗移栽的最适基质为...     

菊花茎叶外植体再生体系的研究

以地被菊‘矮黄’、‘玉龙’和传统菊花‘金背大红’的叶盘和茎段为外植体进行再生培养 .实验结果表明 ,不同品种对相同激素水平的反应是不同的 :传统的大菊‘金背大红’的愈伤诱导率和分化率都远远低于两种地被菊 ;在相同条件下以茎段为外植体诱导愈伤率高于叶盘 ,但是叶盘的直接分化率高于茎段 .‘玉龙’和‘矮黄’的最适再生培养基组成为MS +NAA 0 .1mg/L + 6 BA 1mg/L和MS +NAA 0 .2mg/L + 6 BA 2mg/L ,‘金背大红’为MS +NAA 1mg/L + 6 BA 5mg/L     

3个引种一串红品种光合特性研究

以北京地区引种的‘桑格利亚’、‘展望玫红’、‘展望淡紫’为试验材料,测定其光合特性,探明光合特性与引种栽培地区生理生态因子的关系。结果表明:(1)3个一串红品种的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度的日变化均呈现单峰曲线。在全光照下,‘展望淡紫’在引种地的光合能力、蒸腾速率相对较强,‘展望玫红’在引种地光合能力、蒸腾速率相对较弱。(2)3个一串红品种均为阳生植物,其中‘展望淡紫’对光的生态适应范围相对较广,能够适应多种光照环境,‘展望玫红’对光的生态适应范围相对较窄。(3)气孔导度、蒸腾速率、光合有效辐射是影响‘桑格利亚’净光合速率的主要因子;光合有效辐射是影响‘展望玫红’净光合速率主要的因子;气孔导度、光合有效辐射是影响‘展望淡紫’净光合速率的主要因子。通过对光合指标综合分析可知,3个引进一串红品种都能够适应北京地区的光环境,适宜在北京地区种植。     

多效唑对一串红穴盘苗育苗质量的影响

以一串红穴盘苗为研究材料,研究了多效唑在一串红穴盘苗上施用的最佳时期及浓度。结果表明,三叶一心期50 mg.L-1处理为最佳施用时期及浓度,可以比对照降低株高40%,增加茎粗23%,增加叶片厚度154%,增加全株干重35%,根系活力提高77%。最终,壮苗指数比对照增加了177%,主要是由于株高的降低,茎粗和叶片厚度的增加促进了同化物质的积累,使幼苗强壮。     

矮秆一串红离体培养快繁技术

以带腋芽的幼嫩茎段为外植体 ,研究矮秆一串红的离体快繁技术 .结果表明 :附加 1.5 mg· L-1BA和0 .1mg· L-1NAA的 MS固体培养基可诱导腋芽萌发 ,诱导率达 90 %以上 ;附加 2 .0 mg· L-1BA和 0 .1mg·L-1NAA的 MS固体培养基为适宜的芽苗继代增殖培养基 ;在附加 1.5 mg· L-1NAA的 1/ 2 MS生根培养基上 ,芽苗 7d后即可生根 .幼苗移栽成活率在 85 %以上     

盆栽一串红节水栽培基质研究

以农田土为对照,以草炭、农田土、沙子等为原料配制10种基质组合,研究不同基质组合的持水能力及其对盆栽一串红生长情况和节水抗旱能力的影响。结果表明,各种基质的持水量均随着草炭和保水剂量的增加而增加,随着沙子量的增加而减少;T9（农田土∶草炭=2∶1,保水剂0.10g/盆）、T10（农田土∶草炭=2∶1,保水剂0.15g/盆）、T7（农田土∶草炭=1∶1,保水剂0.15g/盆）基质中一串红的暂时性萎蔫时间分别比对照延长3、2、1d;一串红生长综合指数最高的处理依次为T9、T10、T7。     

一串红SRAP标记的建立与品种鉴定

为建立一串红相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)标记,对引物、dNTP、模板DNA、Taq酶用量及退火温度等因素进行了优化,并用建立的SRAP标记对17个一串红品种进行了鉴定。通过测试,确定了适宜一串红的SRAP-PCR反应体系,反应总体积25 μL,包含PCR缓冲液(含2.0 mmol·L-1 MgCl2),模板DNA 60 ng, dNTP 0.2 mmol·L-1,引物0.4 μmol·L-1,Taq酶1 U。温度梯度试验结果表明,SRAP-PCR对第二阶段的退火温度变化(44～56℃)不敏感。在优化SRAP-PCR体系的基础上,采用44对引物组合对17个一串红品种进行了分析。共筛选到37个多态性引物组合。这些引物组合的多态性信息含量(PIC)为0.215～0.941,平均为0.672;所揭示的基因型数为2～17个, 平均为6.76个。仅用F1/R1这一个引物组合就可以鉴别参试的17个品种,包括形态上非常相近的品种‘神州红’和‘帝王’,表明SRAP对一串红品种具有较强的鉴别能力。     

不同植物生长调节剂对西洋红插枝生根的影响

分析了不同植物生长调节剂IBAI、AA、2,4-D等对西洋红插枝生根的效应。结果表明,不同植物生长调节剂对西洋红插枝生根的影响不同,同一植物生长调节剂不同浓度对其生根的影响也不同,其中IBA 500 mg/L(处理插枝基部3 h)效果最好;IAA浓度为300 mg/L(处理插枝基部3 h)效果最好;2,4-D浓度为2 mg/L(处理插枝基部2.5 h)效果最好。     

盆栽一串红花期和株型控制研究

[目的]确定一串红适宜的生产方案,为其优质生产栽培奠定基础。[方法]先露地栽培一串红,之后改为盆栽养护,化学药剂控制其株型,摘心控制其花期,使一串红的栽培管理更加简便。[结果]5月下旬~6月上旬开始繁殖一串红,7月上、中旬定植,9月中旬盆栽养护。若要一串红在国庆节开花,最终摘心日期在8月15日前后,同时叶面喷施多效唑。多效唑浓度为7501、000 mg/L时,一串红的株高分别为34.73、5.2 cm,冠径分别为46.34、5.6 cm,均为最佳观赏株型。叶面喷施多效唑可抑制一串红的高生长和横向生长,浓度越高其抑制作用越大。[结论]采用露地栽培和盆栽相结合的方式栽培一串红,提高了一串红的观赏性和商品价值。     

一串红组培快繁技术

本试验以一串红茎段为试验材料,以NAA,6-BA为主要研究因子,进行一串红组培快繁技术的研究。试验得出一串红最佳芽分化培养基为MS 0.1mg/LNAA 0.5mg/L6-BA;最佳增殖培养基为MS 0.1mg/LNAA 2mg/L6-BA;最佳生根培养基为1/2MS 0.2mg/L IBA。     

一串红(Salvia splendens Ker-Gawl)花粉活性研究

[目的]探讨4种花色一串红花粉的生活力和在不同条件下的萌发率,为一串红育种提供理论依据。[方法]获取4种花色一串红花粉,采用TTC法和培养基法研究其生活力和萌发率。[结果]在TTC浓度为0.5%时活力测定效果最好,其中紫色和红白相间一串红达到94%。适宜一串红花粉萌发的培养条件为蔗糖浓度为10%,硼酸浓度为1.5%的液体培养条件下萌发率最高,达到83%(紫色一串红)。在常温贮藏条件下,6 h左右开始萌发,12 h的时候萌发率达到最高(紫色一串红为86%),48 h以后花粉几乎丧失了萌发力。[结论]花粉的生活力和萌发规律在一串红可育性上起关键作用。