中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种扫描电镜观察及与其它血吸虫的比较

中华血吸虫和土耳其斯坦东毕吸虫结节变种分别收集于四川和黑龙江省,按常规电镜方法处理后,以日立JSM-800扫描电镜观察并摄片.观察显示中华血吸虫体表无结节,其雄性成虫体表结构近似于日本血吸虫等亚洲血吸虫,与文献描述的采集于泰国的中华血吸虫也无明显差异.观察同时表明土耳其斯坦东毕吸虫结节变种与程氏东毕吸虫基本无差别,二者的感觉球种类与土耳其斯坦东毕吸虫一致,但数目较后者为多.同时结合已发表的有关裂体属血吸虫SEM研究结果,对裂体属血吸虫SEM超微结构特点列表进行了比较.按照Rollinson的分组方法,中华血吸虫属于无结节组,而东毕吸虫属于不带棘的有结节组.     

土耳其斯坦东毕吸虫原肌球蛋白基因的原核表达

将pGEM—TM质粒上的土耳其斯坦东毕吸虫原肌球蛋白（TM）基因片段亚克隆至原核表达载体pET28a（＋），重组的pET28-TM在大肠埃希氏菌BL21（DE3）中经1mmol／LIPTG诱导表达出-37．5ku的融合蛋白。该蛋白经Ni—NTA亲和层析柱纯化，SDS—PAGE检测，出现与目的蛋白大小一致的单一条带。Western-blotting检测结果表明，纯化的蛋白可被自然感染东毕吸虫的山羊血清识别，这为进一步研究东毕吸虫基因工程疫苗奠定了基础。     

土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因的克隆及其序列分析

目的利用RT-PCR和RACE技术克隆土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白基因全长序列并进行序列分析.方法根据日本血吸虫和曼氏血吸虫肌动蛋白基因的保守区设计引物,利用RT-PCR扩增出土耳其斯坦东毕吸虫的肌动蛋白基因的大片段,再结合RACE技术分别得到肌动蛋白的3＇端和5＇端,将三部分序列拼接后获得肌动蛋白基因的全长cDNA序列并进行序列分析.结果成功克隆了土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA并提交GenBank,登录号为DQ017265,核酸序列比对表明东毕吸虫肌动蛋白基因的核苷酸序列和日本血吸虫、曼氏血吸虫的同源性分别为90%和91%.结论土耳其斯坦东毕吸虫肌动蛋白的全长cDNA的克隆为进一步表达及其生物学性能的分析提供了理论基础.     

东毕吸虫抗原特异性的研究──土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原SDS-PAGE分析

为了探明东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分,供今后在免疫诊断和防治东毕吸虫的应用,本试验应用ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ首次对绒山羊体内寄生的土耳其斯坦东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分进行了分析。结果表明该抗原有１７ 条多肽带,其分子量范围２５～９３ＫＤ．其中主带７ 条,分别为２９、３０、３８、４０、６７、７８、９１ＫＤ。本试验初步阐明了土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原的多肽组分,为进一步对该病免疫诊断用抗原的分离、纯化,提高抗原的敏感性和特异性奠定了基础     

土耳其斯坦东毕吸虫磷酸丙糖异构酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

利用RT-PCR技术从土耳其斯坦东毕吸虫（Orientobilharzia turkestanicum）成虫总RNA中扩增磷酸丙糖异构酶基因（TPI），鉴定后将目的片段与毕赤酵母表达载体pPIC9k连接，构建重组表达质粒pPIC9k-TPI，并将其电击转化到毕赤酵母GS115中，重组菌株经甲醇诱导后表达的TPI蛋白，经SDS-PAGE、Western-blotting检测，并利用葡聚糖凝胶层析柱纯化。结果显示，成功地克隆了土耳其斯坦东毕吸虫TPI；重组毕赤酵母表达了分子质量为43ku的TPI蛋白；葡聚糖凝胶层析过滤得到单一的TPI蛋白。     

基于线粒体nad4基因探讨土耳其斯坦东毕吸虫的系统发生位置

为探讨土耳其斯坦东毕吸虫在血吸虫中的系统发生位置,本研究设计一对特异性引物,通过PCR方法对土耳其斯坦东毕吸虫(绵羊源)线粒体烟酰胺脱氢酶亚基Ⅳ基因(nad4)进行扩增和测序分析,并与GenBank中相关血吸虫nad4基因进行比对。结果显示,本研究克隆的该吸虫线粒体nad4基因序列大小约为1030bp,与已发表的其它血吸虫线粒体nad4基因的同源性为51.6%～66.7%,其系统发生位置属于非洲血吸虫种群。     

牦牛中华皮蝇蛆和藏羊的皮蝇蛆扫描电镜形态学比较观察

应用电子显微镜对寄生于牦牛体的中华皮蝇蛆和藏羊皮蝇蛆进行了形态学扫描观察,结果：感染藏羊皮蝇幼虫气门板稍平,呈平面方形,气门钮稍突出,气门孔周围有少量小的突棘,第10节腹面前后缘均未发现棘。感染牦牛的中华皮蝇幼虫,气门板稍有凹陷,气门钮突出。第10节腹面前后缘均有棘,气门孔周围有少量小的突棘。