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核糖核酸干扰(RNAi)研究进展及其在植物学中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
核糖核酸干扰技术(RNAi)是遗传工程领域近几年取得的重大技术进展之一,其理论体系及技术规范已基本形成.RNAi是一种高效、特异性强的基因阻断技术,被誉为将在功能基因组学及遗传工程领域掀起一场真正的革命.文章介绍RNAi的发现、发展历程,阐述了RNAi的作用机理及技术特点,探讨了小分子干扰RNA导入细胞的主要方法.综述了RNAi在植物学中的研究进展,以及RNAi技术在植物学研究中的重大意义. 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种高度保守的、基于RNA水平的特异性降解机制,它通过特异性地抑制基因的表达来快速、简便以及大规模地鉴定基因的功能。虽然dsRNA不能应用于哺乳动物,但是小分子干扰型RNA(siRNA)的技术却证明RNAi可以成功应用于哺乳动物。近年来,RNAi技术在哺乳动物中得到了飞速发展和广泛应用,包括设计更加合理、更加有效的siRNA,在更多的已经分裂或者尚未分裂的细胞系中诱导RNAi,通过瞬时RNAi或转基因RNAi在活体动物中抑制基因的表达,建立时空调控或组织特异性的RNAi以及利用RNAi对哺乳动物基因组功能进行大规模的筛选和鉴定。本文对近几年RNAi在哺乳动物中的研究新发展进行综述。 相似文献
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核糖核酸干扰技术(RNAi)是遗传工程领域近几年来取得的重大技术进展之一,其理论体系及技术规范已基本形成.RNAi是一种高效、特异性强的基因阻断技术,被誉为将在功能基因组学及遗传工程领域掀起一场真正的革命.介绍了RNAi的发现、发展历程,阐述了RNAi的作用机理及技术特点,探讨了小分子干扰RNA导入细胞的技术策略以及对RNAi进行深入研究的重大意义. 相似文献
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RNAi技术控制害虫的机制与应用 总被引:1,自引:1,他引:0
《现代农业科技》2017,(7)
RNAi能够抑制基因特异序列的表达,为昆虫学研究提供了新方法,尤其是可以分析基因的功能,控制害虫种群以及减少疾病病原体的感染。不同种群、RNAi摄入方式、靶标基因都会影响RNAi的效率,是转录本抑制程度存在差异的原因所在。对于不能稳定转基因的物种,如昆虫,利用dsRNA介导的RNAi技术便成为快速分析基因功能的重要手段。介绍了RNAi技术的作用机制,并从控制害虫和保护益虫方面总结了RNAi技术的应用。 相似文献
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RNA干扰是由双链RNA介导,诱发靶基因发生转录后沉默的现象。RNAi技术作为一种高效的基因抑制技术,在抗病虫、品质改良、非生物胁迫耐受性等作物遗传改良领域广泛应用。在对RNAi作物进行生态风险评估时,应主要关注脱靶效应、对非靶标生物的影响、dsRNA分子的环境归趋以及其他非预期效应。本文介绍了RNAi技术在作物育种中的应用现状,阐述了RNAi作物环境安全性评价的关键内容及程序,并对我国RNAi作物研究和安全评价做了展望。 相似文献
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水稻高效RNA干涉体系的建立及其在受体激酶基因功能研究中的应用 总被引:8,自引:0,他引:8
利用RNA干涉(RNAi)技术,可以特异性的抑制真核生物体中目标基因的表达。本研究构建了适合水稻转化的RNAi诱导载体pCADS1341。为检测其有效性,使用它构建了针对GUS基因的RNAi载体,并利用基因枪转化法导入GUS基因稳定表达的转基因水稻愈伤组织。GUS染色分析结果表明该载体中RNAi诱导元件的瞬时表达可显著抑制GUS基因的表达。为探讨影响水稻中转基因诱导的RNAi效率的因素,对针对某个目标水稻基因的水稻RNAi植株进行了详细的分析。通过Southern和Northern杂交检测了T0代RNAi植株中T-DNA插入的拷贝数和目标基因的表达量,筛选出T-DNA为单拷贝插入,且目标基因的表达被高效抑制的株系。对来源于该株系的T1代植株进行了半定量RT-PCR检测,结果表明RNAi效应可以遗传给后代转基因水稻植株,但是不同个体中的RNAi效率存在差异。RNAi系统的表达量可能是决定RNAi效率的最关键因素。我们建立的高效RNAi技术体系对于水稻功能基因组学研究具有重要意义,利用这个系统我们已经构建了60多个水稻受体激酶基因的RNAi载体,系统的研究正在进行中。 相似文献
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水稻osvdac基因RNAi表达载体的构建及遗传转化 总被引:1,自引:1,他引:0
[目的]构建水稻osvdac3和osvdac5基因RNA干涉表达载体,获得转干涉载体的转基因水稻植株。[方法]采用TRIzol法提取水稻幼苗总RNA,以反转录的cDNA为模板,扩增得到osvdac3和osvdac5的分别靠近5’端和3’端约500~600bp的特异序列,用Gateway重组克隆技术构建RNA干涉表达载体,采用农杆菌介导的愈伤组织侵染法进行遗传转化。[结果]成功构建水稻2个osvdac3和2个os-vdac5基因RNA干涉表达载体,并获得转osvdac3干涉载体的阳性植株。[结论]干涉osvdac3和osvdac5的植株为研究其功能提供材料。 相似文献
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The RNA interference (RNAi) pathway is found in most eukaryotic lineages but curiously is absent in others, including that of Saccharomyces cerevisiae. We show that reconstituting RNAi in S. cerevisiae causes loss of a beneficial double-stranded RNA virus known as killer virus. Incompatibility between RNAi and killer viruses extends to other fungal species in that RNAi is absent in all species known to possess double-stranded RNA killer viruses, whereas killer viruses are absent in closely related species that retained RNAi. Thus, the advantage imparted by acquiring and retaining killer viruses explains the persistence of RNAi-deficient species during fungal evolution. 相似文献
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Kim JK Gabel HW Kamath RS Tewari M Pasquinelli A Rual JF Kennedy S Dybbs M Bertin N Kaplan JM Vidal M Ruvkun G 《Science (New York, N.Y.)》2005,308(5725):1164-1167
RNA interference (RNAi) of target genes is triggered by double-stranded RNAs (dsRNAs) processed by conserved nucleases and accessory factors. To identify the genetic components required for RNAi, we performed a genome-wide screen using an engineered RNAi sensor strain of Caenorhabditis elegans. The RNAi screen identified 90 genes. These included Piwi/PAZ proteins, DEAH helicases, RNA binding/processing factors, chromatin-associated factors, DNA recombination proteins, nuclear import/export factors, and 11 known components of the RNAi machinery. We demonstrate that some of these genes are also required for germline and somatic transgene silencing. Moreover, the physical interactions among these potential RNAi factors suggest links to other RNA-dependent gene regulatory pathways. 相似文献
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RNA干涉(RNA interference,RNA1)是由双链RNA导入而引起的转录后基因沉默,它可以作为一种有力的工具在多种有机体中抑制特异性基因的表达。文章简要介绍了RNA干涉的发现史、作用机制、特点及该项技术的用途。RNA1的作用机制可以分为起始阶段和效应阶段。双链RNA被Dicer消化成siRNAs(small interfermg RNAs),进一步形成RNA诱导沉默复合物(RNA-mduced silencmg complex,or RISC),在siRNAs的引导下切割靶mRNA。RNAi技术在疾病的基因治疗、功能基因组学及细胞信号通路分析等力面具有广阔的应用前景。 相似文献
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构建含bcr/abl RNAi慢病毒重组质粒载体并包装病毒,转染K562细胞,通过Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应。采用CCK-8法、软琼脂细胞集落形成实验检测RNAi对K562细胞的增殖影响作用。结果表明,慢病毒介导bcr/abl基因RNAi明显下调K562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl融合蛋白,显著抑制了K562细胞的增殖,这说明靶向bcr/abl融合基因的RNAi有望成为治疗慢性粒细胞白血病的有效方法。 相似文献
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基因工程技术近年来在作物研究领域发展迅速,RNA干扰(RNAi)作为一项重要的基因沉默技术,具有高效性且特异性强的显著特点,现已广泛应用于后基因组时代,对研究作物基因功能,抗性和品质改良等有着重要作用。中国烟草研究已进入基因组时代,随着烟草基因组测序的开展,RNAi作为一门反向遗传学技术在烟草中的应用越来越多。本文介绍了RNAi 技术的作用机制和特点,重点介绍了RNAi在烟草基因功能研究、抗病研究、抗虫研究及烟草品质改良研究中的应用,并对RNAi 技术在烟草中的应用前景进行了展望。 相似文献