可吸收手术缝合线的研究进展

医用可吸收手术缝合线的研究是生物医用高分子研究中最活跃的领域之一,已广泛应用于医学和动物医学的外科手术中。本文对几种天然及人工合成可吸收手术缝合线在体内的吸收情况、降解性能及研究状况进行了详细的阐述,并对它们的优缺点作出了科学的评价。同时,描述了我国可吸收手术缝合线研究现状。     

在补液中添加的抗生素的抗原性

试把青霉素Ｇ（ＰＣＧ）水溶液的变化及其在补液中抗原的产生与先锋霉素系列及其在补液中抗原的产生与先锋霉素系列进行比较，发现ＰＨ分别为５，７，１０的生理盐水溶液放置０－４小时后，ＰＨ５的溶液发生了显著变化。用凝胶过滤上述溶液，在０．７５，０．８５，１．０ｋａｖ（分配系数）处出现三个洗脱峰，确认形成了ＰＣＧ或分解物的聚合物。用的ＰＣＧ的ＩｇＧ血清进行皮肤被动免疫反应（ＰＣＡ）测定抗原，结果在放置２小时以     

早期断奶仔猪非抗原性日粮研究

在肠道对日粮抗原过敏过程中，早期断奶仔猪出现腹泻．应用抗原过敏原理研究的非抗原性日粒饲养仔猪，日增重提高25．2％～59．4％，饲料转化率提高17．4％～21．9％，腹泻率降低96．3％．     

近年来典型ND分离株的致病性和抗原性变异研究

8株ND分离株经过毒力测定(MDT小于47h；ICPI大于1．65)均属于NDV强毒，交互凝集抑制试验表明：分离株与C30和48株在HI效价上差1～3个滴度；攻毒试验表明不同毒株致病性明显不同；鸡胚中和试验则表明，La Sota单因子血清对分离株有中和作用，但中和滴度有明显差异。     

一例鸭鼠伤寒沙门氏菌的分离鉴定及抗原性分析

对出现精神沉郁、食欲减退、拉稀、脚软和共济失调症状,其后死亡,的鸭病例,进行常规诊断、动物试验,结果分离到一株细菌,命名为GDYJS-1.分离株通过生长特性、凝集试验、染色特性及VITEK-32微生物鉴定系统生化试验鉴定为沙门氏菌;16S rRNA基因序列的测定与分析,鉴定为鼠伤寒沙门氏菌.     

口蹄疫3A蛋白基因的表达及其抗原性研究

从pUCm-3ABC质粒切割FMDV的3A蛋白基因DNA，将其与pET-30c( )载体连接，构建pET30C3A原核重组表达质粒，序列分析表明，pET30C3A重组质粒的插入3A蛋白基因的阅读框架正确。pET30C3A—BL21经IPTG诱导后可表达3A融合蛋白。Westem Blot试验证明该表达蛋白具有较好的抗原活性，提示可进一步用重组表达的FMDV 3A蛋白作抗原检测FMD。     

动物狂犬病流行毒株的抗原性差异分析

利用9株抗狂犬病病毒（Rabies virus,RABV）核蛋白单克隆抗体,通过间接免疫荧光方法对分离的34株传至F6代N2A细胞适应株进行了抗原差异分析。结果表明：这些RABV分离株存在抗原差异,根据病毒与单抗反应的类型,将所分析的病毒株分为6个抗原变异型。根据N基因系统发生分析将所分析的病毒株分为4个进化群,结果表明不同进化群病毒间的遗传差异与抗原分型没有直接的联系。     

狐阴道加德纳氏菌菌株抗原性及免疫原性研究

对分离的 1 45株阴道加德纳氏菌进行抗原性测定 ,筛选出了抗原性优良的血清型代表株。通过免疫琼脂扩散试验证明了三个血清型间存在一条共同的抗原沉淀线。免疫原性测定表明 ,三个血清型代表株能产生特异的保护性抗体     

NDV地方分离株与La Sota株抗原交叉性研究

用新城疫弱毒疫苗株La Sota阳性血清测定NDVMM,NDVLD,NDV-NH3株新城疫病毒地方分离株和标准株La Sota,F48E9的HI效价,以La Sota阳性血清对La Sota疫苗株的HI效价为参照,分析NDV地方分离株与疫苗株抗原交叉性。结果表明,NDV-MM,NDV-LD 2个野毒株HI效价与NDV-LD HI效价相近,但比La Sota HI效价低2．3个～2．7个滴度;NDV-NH与F48E9 HI效价相近,比La SotaHI效价低4．2个～4．3个滴度,提示以上3个野毒株与疫苗株之间的抗原相关性差异较大。动物免疫保护试验结果表明,经La Sota免疫（HI效价〉2^5）后攻毒保护率为80％-100％。     

EGF—PE40抗原性检定

EGF-PE40是由人表皮生长因子（EGF）基因与绿脓杆菌外毒素A（PEA）的跨膜亚单位和毒力亚单位（PE40）基因融合，在大肠杆菌内表达的重组毒素。它可以特异性识别EGF受体过度表达的癌细胞，具有特异杀伤癌细胞的作用。该融合蛋白的Mr为4.55×104，如作为药物长期静注可能致使病人体内抗体水平增高，从而影响其药效。本试验以家兔为模型，连续28d（1个疗程）静注EGF-PE40纯品，应用ELISA和琼扩分别测定了其血清中结合抗体水平和中和抗体水平的动态变化。结果显示，血清结合抗体水平随静注时间的延长而增高，28d时最高可达1∶212；在静注EGF-PE40的同时，静注2倍于人体剂量的免疫抑制剂环磷酰胺，其血清结合抗体水平与不用环磷酰胺组相比虽略有降低，但经F检验，二者无显著性差异；应用试验28d结合抗体水平最高的兔血清与不同质量浓度（80、40、20、10、5、2.5mg/L）的EGF-PE40进行琼扩，均无沉淀线产生；被检血清、健兔血清和阳性对照血清分别与质量浓度为105、35、28mg/L的EGF作用24h后，再与阳性对照血清进行琼扩反应,结果除阳性对照血清与105mg/LEGF-PE40的反应物无沉淀生成外，其余各孔均有沉淀线生成，表明连续28d用药未在兔体内产生可检测到的中和抗体，与用弗氏佐剂免疫制备的阳性对照兔血清相比较，其中和抗体不足以削弱EGF-PE40的作用。     

猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究

本试验旨在分析猪瘟病毒E2蛋白的免疫反应,应用RT-PCR方法扩增了编码猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株C株囊膜糖蛋白E2基因主要编码区,并定向克隆到表达载体pET-30a-c(+)中,获得重组表达载体pET30a-E2,将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blottin分析结果表明,E2基因获得高效融合表达,且具有免疫反应活性。本试验为建立E2抗原的检测试剂盒奠定基础。     

布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究

设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白omp10的PCR扩增,得到了一个大小为330 bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致.将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功.将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2 ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致;Western blot和间接ELISA试验证明,纯化之后的OMP10重组蛋白可以被布鲁菌阳性血清识别.     

发酵和酶解结合对乳清蛋白抗原性影响的研究

以瑞士乳杆菌为发酵菌种,胃蛋白酶和碱性蛋白酶为水解用酶,研究了乳酸菌发酵和蛋白酶酶解结合对乳清中β-乳球蛋白（β-LG）和α-乳白蛋白（α-LA）抗原性的影响。试验结果表明：与直接酶解相比,乳清先经瑞士乳杆菌发酵会促进胃蛋白酶对β-LG和α-LA的降解,提高最终水解液中的游离氨基酸浓度,减少大肽的生成,但β-LG的抗原性仅比直接酶解降低了5%,而α-LA的抗原性反而升高了6%～7%。对于碱性蛋白酶,发酵并没有提高最终水解液中的游离氨基酸浓度,对β-LG和α-LA抗原性也没有显著影响。     

布鲁菌外膜蛋白Omp31原核表达及抗原性分析

克隆羊布鲁菌的外膜蛋白Omp31基因,在大肠埃希菌中表达、纯化,并对Omp31蛋白的抗原性进行分析。以羊布鲁菌的染色体DNA为模板,扩增Omp31基因,双酶切后克隆至pET32a上,在大肠埃希菌ER2566(DE3)中诱导表达,组氨酸结合树脂柱纯化,Western blot鉴定Omp31蛋白的抗原性。将Omp31克隆至载体pET32a,提取的重组质粒经PCR鉴定、双酶切鉴定和测序分析确定目的基因成功插入到了克隆载体中。将重组质粒转化于大肠埃希菌ER2566(DE3)中表达获得HIS融合蛋白,SDS-PAGE分析证明,表达产物为43 ku的融合蛋白。Western blot结果表明,表达的蛋白具有与布鲁菌外膜蛋白相同的抗原性。     

酶解对脱脂牛乳蛋白抗原性及感官特性的影响

以脱脂牛乳为原料,采用间接竞争酶联免疫吸附测定法和三(羟甲基)甲基-甘氨酸-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法研究碱性蛋白酶（Alcalase,AT）、复合蛋白酶（Protamex,PT）和风味蛋白酶（Flavorzyme,FT）处理对脱脂牛乳的抗原性、分子质量分布、滋味和色泽的影响。结果表明：AT对主要致敏乳蛋白的脱敏效果显著优于PT和FT(P<0.05),当酶底比为500 U/g、酶解时间为20 min时,其对α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和酪蛋白的抗原抑制率分别达到64.01%、76.00%和69.10%;AT、PT和FT处理后脱脂牛乳中低分子质量肽段明显增加,且苦味、涩味、苦后味、涩后味随酶解时间延长、酶底比的增加而升高,FT处理脱脂牛乳的滋味优于AT和PT;酶解脱脂牛乳的亮度值显著降低,红度值显著升高（P<0.05）,透光性增加,AT处理脱脂牛乳的色泽更接近于牛乳。     

新城疫病毒F基因在大肠埃希菌中的表达及其抗原性分析

构建新城疫病毒融合蛋白F基因的原核表达载体,并将其在宿主菌BL21(DE3)感受细胞中表达.以含有融合蛋白F基因的重组质粒pMD19T-F为模板,设计特异性引物,应用PCR技术扩增获得F基因的F1片段,定向插入原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-F1,将构建成功的重组质粒pET-F1转化宿主菌BL21(DE3)感受态细胞经IPTG诱导,将其在宿主菌细胞中表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blot方法检测.结果显示,成功克隆出了新城疫病毒F1基因片段序列852 bp.构建的pET-F1载体经PCR、双酶切、测序鉴定均无误,转化表达宿主菌后经SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,目的基因被成功表达,并具有良好的反应原性.成功构建了新城疫病毒的融合蛋白F基因原核表达载体,转化宿主细胞后成功表达了融合蛋白F1重组蛋白片段.     

非洲猪瘟P72基因在Bac to Bac系统中的表达及抗原性鉴定

本研究旨在通过在Bac to Bac系统中表达非洲猪瘟病毒(ASFV)的P72基因,为进一步研究P72基因的结构、功能和免疫学特性奠定基础。本研究从含P72全长基因的菌株pGEX-6p-1-P72中扩增出P72基因全序列1941 bp,将扩增的基因连接于pFastBac HTa杆状病毒载体中,构建重组质粒pFastBac HTa-P72,转化至感受态DH10Bac中,获得重组杆粒rBacmid-P72,再将其转染至Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒。经Western blotting和夹心ELISA分析,结果表明,P72在昆虫细胞Sf9中获得正确表达,重组P72蛋白可被特异性兔抗ASFV P72血清、P72单抗识别。结果提示,Bac to Bac系统表达的P72重组蛋白特异性强、活性稳定,具有良好的抗原性,为快速诊断ASF提供良好的候选抗原。