养殖密度、水质和分级对水泥池 鱖鱼苗种培育的影响

为研究养殖密度、水质和分级对水泥池鱖苗种培育的影响,以翘嘴鳜鱼苗(体长0.7~1cm)为对象,在不同密度下投喂麦瑞加拉鲮进行试验。结果表明:(1)小规格苗种(2.5cm)的放养密度宜在4000尾/m3左右,大规格苗种(2.5~6.5cm)的放养密度不宜超过800尾/m3。(2)养殖水体中氨氮和亚硝酸盐的浓度均与鳜鱼苗养殖密度成显著正相关,水泥池中进行鳜鱼苗种培育不宜密度过高,密度越高,疾病暴发的风险越大。(3)分级过筛选取鱖苗体长为2~3、5~6、8~9cm时的3个节点进行,保持饱食投喂,能较好地提高鳜鱼苗种的整齐度,降低残食率,提高成活率。     

大珠母贝人工苗水泥池中间培育技术研究

[目的]研究大珠母贝贝苗的池塘中闻培育技术。[方法]分3批提供贝苗3万、43万和15万粒（2．0—3．0mm）开展水泥池塘（335m^2）吊养,贝笼选用20、40和80目的用不锈钢和聚乙烯网片制作的圆形笼,先用网目密的贝苗笼,随着贝苗的生长逐渐换用网眼大的笼。一般日换水量在10％-30％,控制水透明度在60-80cm,水温不超过33℃。按比例投放饵料,定期泼洒营养盐,约5d追肥1次。[结果]3枇人工繁殖的贝苗,经4个月的水泥池养殖,平均壳长分别增长至35．8、27．7和23．4mm,平均壳高分别增长至30．1、24．9和20．1mm,成活率分别为29．5％、17．4％和17．9％。[结论]大珠母贝种苗池塘中间培育生长速度快,成活率高,有望克服海区养殖的大规模死亡问题。     

水泥池培育鳜鱼苗种技术

商品鳜鱼养殖面积在增加,优质鳜鱼种是养殖成败的关键。从鳜鱼苗种培育水泥池条件、放养密度、饵料鱼配套放养密度、苗种消毒、病害防治及日常管理等方面阐述了水泥池培育鳜鱼苗种技术。     

西施舌苗种的中间培育

利用平均壳长为24.0 mm、平均个体重为2.0 g的西施舌人工稚贝进行水泥池中间培育试验。结果显示:采用150％的日流水量并结合底质定期冲洗和更换等措施,经177 d培育,西施舌苗种平均壳长为40.0mm,平均个体重为9.8g,基本达到养成所需的规格标准。其壳长生长速度为0.09 mm/d,体重生长速度为0.04g/d。成活率为68％,高于潮间带围网培育和土池中间培育。     

西施舌苗种的中间培育

利用平均壳长为24.0 mm、平均个体重为2.0 g的西施舌人工稚贝进行水泥池中间培育试验。结果显示:采用150％的日流水量并结合底质定期冲洗和更换等措施,经177 d培育,西施舌苗种平均壳长为40.0mm,平均个体重为9.8g,基本达到养成所需的规格标准。其壳长生长速度为0.09 mm/d,体重生长速度为0.04g/d。成活率为68％,高于潮间带围网培育和土池中间培育。     

泥蚶人工育苗及中间暂养试验

2002年进行了泥蚶室内水泥池人工育苗和室外蚶苗的中间培育.室内育苗池11口,面积263m^2,共育出稚贝2.15亿粒,平均壳长0.76mm,出苗量81.6万粒/m^2.蚶苗中间暂养面积6667m^2,投放稚贝苗2.0万粒,培育42d后,培育出蚶苗总量为1.35亿粒,平均体长3.54mm,每平方米出苗量2.028万粒,,成活率达67.5%。     

天津沿海缢蛏池塘养殖试验

在天津海水池塘开展缢蛏养殖试验,探讨缢蛏对池塘环境的影响。结果表明,缢蛏当年壳长可达4~5 cm,存活率可达70%左右;缢蛏养殖可提高池塘养殖水体透明度,降低氨氮、亚硝等有害因子,有利于同一池塘内其它养殖动物的生长与存活。本研究可为天津市开展缢蛏池塘养殖提供经验借鉴。     

菲律宾蛤仔苗种海区中间培育技术研究示范

菲律宾蛤仔（Ruditapes Philippinarum Adams＆Reeve）（福建俗称为花蛤）属于软体动物门，瓣鳃纲，异齿亚纲，帘蛤目，帘蛤科，蛤仔属。花蛤自然分布于日本、菲律宾、俄罗斯、朝鲜半岛、斯里兰卡和中国沿海。中国南自广西，北至辽宁沿海各地均有分布。花蛤是中国的四大海水养殖贝类之一，具有生长迅速、移动性差、适应力强、养殖周期短、养殖方法简便、市场价位稳定、投资少、效益高等特点，成为滩涂、浅海底播、池塘养殖最重要和最有发展前景的贝类品种。     

黄鳝苗的培育方法

<正> 鳝苗生长发育健康与否直接关系到成鳝产量。培育鳝苗的方法,全国各地根据自然条件、习惯做法而定,概括起来有四种,即:肥料培育法、饲料培育法、大草培育法和草浆培育法。现将各方法的技术要领分述如下: 1 肥料培育法。肥料培育法是采用人畜粪尿,经过沤熟,以肥水来培育鳝苗。该法成本低,操作方便,鳝苗入池就有天然活饵料食取,有利于生长发育。具体做法是:在鳝苗入池前2～3天开始,每天投施经过腐熟的粪肥1次,每次每1m~2投施畜粪150～200g,或者人粪尿80～100g,滤去粪渣后加水稀释,全池均匀泼洒。该法也有一定缺点,即肥料在池中腐烂分解,容易污染水质而导致池水缺氧,不利于鳝苗     

低温无水保活对缢蛏活性氧代谢、糖原及乳酸的影响

为探究无水保活期间双壳贝类活性氧代谢、糖原及乳酸的变化,以缢蛏(Sinonovacula constricta)为试验材料,将缢蛏分别在4 ℃、10 ℃和15 ℃下无水保活,测定其存活率、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性、还原性谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、过氧化氢(hydrogen peroxide,H₂O₂)含量、糖原及乳酸含量。结果显示,保活前3 d各组缢蛏均维持90 %以上的存活率;保活7 d后4 ℃组存活率仍可达到84 %,高于10 ℃组的67 %,15 ℃组存活率最低,仅为52 %。在整个无水保活期间,4 ℃组缢蛏SOD活性、CAT活性以及GSH含量均显著高于同时期其他各组(P<0.05);在保活后期,相较于其他处理组,4 ℃组缢蛏有着显著最低的MDA含量和H₂O₂含量 (P<0.05);此外,保活1～3 d时10 ℃组缢蛏体内糖原含量下降幅度仅有3.7 %,为各组最低;随着保活时间的延长,各组缢蛏体内的糖原含量持续减少,乳酸含量则不断增加,且同时期4 ℃组缢蛏比其他各组糖原消耗量更少,乳酸积累的速率也更慢。以上结果表明,在缢蛏短途运输(2 d)时,10 ℃和15 ℃能维持缢蛏较高的存活率,是较适宜的保活温度;而4 ℃在保活后期能有效地诱导了缢蛏机体SOD活性、CAT活性和GSH含量的增加,同时抑制MDA和H₂O₂的含量,并减缓糖原的消耗和乳酸积累的速率,具有更好的保活效果,更利于缢蛏的长途运输(7 d)。     

缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的序列分析及凝菌活性

为研究缢蛏C型凝集素基因ScCTL-2的结构和功能特点,克隆了该基因的全长序列,并对其mRNA的表达模式以及重组蛋白的凝菌活性进行研究。结果显示,ScCTL-2的cDNA全长2 194 bp,共编码630个氨基酸,其氨基酸序列拥有4个C型凝集素糖识别结构域和1个N端跨膜区,这一特殊的序列结构不同于任何一种已知的C型凝集素。基因mRNA在健康缢蛏肝胰腺中的表达量显著高于其他组织,在鳃中的表达量次之,而在其余组织中的表达量没有显著性差异;金黄色葡萄球菌与鳗弧菌感染能够显著上调ScCTL-2在缢蛏血细胞中的表达。ScCTL-2的重组蛋白凝菌实验显示:在Ca~(2+)存在的情况下,rScCTL-2能够对实验所采用的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、藤黄微球菌和酿酒酵母均产生明显的凝集反应;当溶液中不存在Ca~(2+)时,凝集反应几乎不能发生,意味着rScCTL-2的凝菌活性是严格Ca~(2+)依赖的。研究表明,ScCTL-2可能是一种新的无脊椎动物C型凝集素类型,它具有无脊椎动物C型凝集素普遍具备的免疫活性,可能在缢蛏的免疫中具有重要作用。     

不同降解工艺对螠蛏肉降解物活性的影响

用正交试验法对螠蛏组织的木瓜蛋白酶酶解工艺进行优选。以酶解液的生物活性为考察指标,研究酶解的温度、时间、pH和酶的用量对酶解产物生物活性的影响。得到用木瓜蛋白酶水解螠蛏组织的最佳条件为:pH 6,酶解温度60℃,酶加入量为底物的0.3%,水解6 h。在此条件下酶解产物的生物活性较高。     

缢蛏丝氨酸蛋白酶基因的序列特征及其表达分析

含有clip结构域的丝氨酸蛋白酶是一类新的丝氨酸蛋白酶家族,可能参与非特异性免疫防御功能。从缢蛏(Sinonovacula constricta)cDNA文库中筛选出一条丝氨酸蛋白酶同源EST序列,然后通过5’RACE扩增、测序,拼接得到全长为1 228 bp的cDNA序列,包括66 bp的5’非翻译区和160 bp的3’非翻译区,以及1 002 bp的开放阅读框。阅读框共编码333个氨基酸,含有17个氨基酸的信号肽序列,并含有发卡结构域(clip domain)和胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶结构域(Tryp_SPc domain)。在clip结构域中包含6个半胱氨酸残基形成的3个二硫键,在Tryp_SPc结构域中包含His-Asp-Ser催化三联体(HDS)。该缢蛏丝氨酸蛋白酶基因被命名为ScSP。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析表明,ScSP在缢蛏的外套膜、水管、鳃、斧足、性腺、肝胰腺6个组织中均有表达,尤其在肝胰腺中表达显著高于其他组织,其次为性腺组织,而水管,外套膜和鳃中表达量最低。缢蛏经鳗弧菌(Vibrio anguillarum)诱导感染后4 h和8 h,肝胰腺中的ScSP基因表达量显著上调。缢蛏丝氨酸蛋白酶的序列特征与表达分析揭示了ScSP是含有clip结构域的丝氨酸蛋白酶基因,参与了非特异性免疫防御,为进一步研究该基因的结构和功能奠定了基础。     

缢蛏铁蛋白基因的分子特性及其表达分析

从缢蛏(Sinonovacula constricta)cDNA文库中筛选出一条铁蛋白同源序列,直接扩增质粒获得全长cDNA序列,共1 106 bp,包括128 bp的5’非翻译区和309 bp的3’非翻译区,以及669 bp的开放阅读框。阅读框共编码222个氨基酸,N端含有17个氨基酸的信号肽序列,推算的分子量约为25.47 ku,理论等电点为5.48。氨基酸序列分析结果表明,该基因含有保守的铁氧化酶活性中心的7个氨基酸残基,但是不具有糖基化位点(NQS)和5’非编码区铁蛋白的铁反应元件(iron response element,IRE),属于H型铁蛋白基因,该基因被命名为ScFERs。系统进化显示,基本上同一个物种的不同亚型铁蛋白首先聚在一起,然后和其他物种的铁蛋白聚在一起。缢蛏ScFERs首先与日本花棘石鳖(Liolophura japonica)LjFERs聚在一起,然后与缢蛏另一种ScFER以及文蛤(Meretrix meretrix)MmFERs聚在一起。荧光定量PCR检测结果显示ScFERs基因在肝胰腺中高度表达,肝胰腺与其它组织间的表达量存在着极显著差异。经鳗弧菌(Vibrioanguillarum)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)诱导后,ScFERs基因表达水平呈显著上调。为进一步研究缢蛏铁蛋白基因的结构和功能奠定了基础。     

缢蛏家系生长与消化酶活性的比较

两次对6个缢蛏家系(A1、B1、C1、D1、E1和F1)生长性状(壳长、壳高、壳宽、总重和软体部重)进行测量、分析,并测定其体内淀粉酶活性和纤维素酶活性。发现缢蛏胃、消化盲囊等器官内淀粉酶活性较高,而纤维素酶的活性很低,消化酶活性与其滤食微藻的食性有关系。对比缢蛏生长性状的增长和消化酶活性的提升,结果表明家系D1的5个生长性状均取得最大值,且与家系A1、B1、C1、E1及F1存在显著差异(P0.05)。家系F1的5个生长性状均取得最小值,且各性状显著小于家系D1。随着日龄的增长,各个家系缢蛏个体的淀粉酶活性和纤维素酶活性都有所增长,2次的测量值显示同样的趋势,D1C1E1A1B1F1。发现缢蛏消化酶活性与生长发育相关,较快的生长速度对应较强的消化生理机能,高水平的消化酶活性有利于缢蛏对营养物质的消化吸收并转化为生长发育所需的能量。     

缢蛏体形性状对活体重和肉重的影响效果分析

随机选取丹东东港市黄土坎镇沿海滩涂的缢蛏150只,测定其壳长(X1)、壳高(X2)、壳宽(X3)、活体重(Y)和肉重(Z),共5项性状。运用相关分析、通径分析,计算了以体形性状为自变量,重量性状为因变量的相关系数、通径系数、决定系数及相关指数,定量分析缢蛏体形性状对重量性状的影响效果。结果表明,3个体形性状对活体重和肉重(熟)的相关系数均达到极显著水平(P<0.01);3个性状对活体重的通径系数达到极显著水平(P<0.01);壳高和壳宽对肉重(熟)通径系数达到极显著水平(P<0.01),说明壳长、壳高和壳宽是影响活体重的主要因素;壳高和壳宽是影响肉重(熟)的主要因素。利用多元回归分析,剔除不显著性状,分别建立了体形性状对重量性状的回归方程:Y=-18.763+0.151 X1+0.698 X2+0.432 X3;Z=-7.997+0.293 X2+0.251 X3。以上体形性状对重量性状影响效果的分析结果为缢蛏遗传与育种提供了基础参考。     

乐清湾和三沙湾缢蛏群体遗传多样性的微卫星分析

利用微卫星标记分析了我国浙江乐清湾翁垟(ZWY)、乐成(ZYC)、南岳(ZNY)、南塘(ZNT)、清江(ZQJ)、湖雾(ZHW)、坞根(ZWG)、海山(ZHS)和芦浦(ZLP) 9个群体和福建三沙湾漳湾(FZW)、梅田(FMT)、三都(FSD)、渔江(FYJ)、白招(FBZ)、霞塘(FXT)、长春(FCC)、沙江(FSJ)和溪尾(FXW)9个缢蛏群体的遗传多样性和遗传分化,以期评价乐清湾和三沙湾内缢蛏群体的遗传结构差异,为我国缢蛏主要原产地种质资源保护和遗传育种提供基础资料。遗传多样性结果表明,浙江乐清湾和福建三沙湾内的缢蛏群体中各位点平均有效等位基因数N_e变化范围分别为8.146~10.457和7.457~9.947,平均期望杂合度H_e分别为0.872~0.909和0.846~0.894,Nei’s基因多样性指数分别为0.863~0.899和0.836~0.886,显示乐清湾和三沙湾缢蛏群体的遗传多样性仍处于较高水平。群体间遗传分化指数（F_ST）结果表明,缢蛏各群体间F_ST为0.000 1~0.052 3。基于Nei’s遗传距离（D_A）构建非加权组平均法（UPGMA）系统树结果显示,18个群体聚类为2支,除ZWY和ZWG群体外,ZYC、ZNY、ZNT、ZQJ、ZHW、ZHS 和ZLP浙江群体单独聚为一支;而ZWY、ZWG群体与FZW、FMT、FSD、FSJ、FBZ、FXT、FCC、FSJ 和FXW 9个福建群体聚类在一起,因此推测浙江的ZWY、ZWG群体可能来自福建,揭示在缢蛏的养殖过程中可能存在引苗现象。     

缢蛏微卫星多态性分析及其在亲子鉴定中的应用

利用磁珠富集法,构建了缢蛏(Sinonovacula constricta)微卫星富集文库。开发并筛选出18对微卫星引物,其中8对微卫星引物亲缘排除率较高,选取这8对引物对家系进行了亲子鉴定。结果表明,18对微卫星引物在12个个体中等位基因为2~6,平均等位基因为3.00;观测杂合度在0~1.000之间,平均值为0.581 3;期望杂合度0.290~0.779,平均值为0.528 4;多态信息含量为0.239~0.703,平均值为0.432 2。当两个亲本基因型未知时,8对微卫星引物在整个家系中单个亲本排除率(E-1P)为0.583~0.916,平均值为0.790 0;当一个亲本基因型已知时,另一个亲本的排除率(E-2P)为0.406~0.830,平均值为0.653 9。同时可知在子代个体数量不断增加的情况下,排除率仍在较高范围,因此可以作为亲子鉴定的分子标记。这对于缢蛏规范化养殖、家系选育的开展具有重要意义。     

高密度和高盐度对缢蛏渗透调节和抗氧化水平的影响

以缢蛏(Sinonovacula constricta)为实验对象,研究密度(60和120粒/m²)和盐度(20和30)对缢蛏渗透调节和抗氧化水平的影响,实验持续72 h,检测了缢蛏血淋巴Na⁺浓度和K⁺浓度,肝胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,以及鳃组织中Na⁺/K⁺-ATPase活性、钠氢逆向转运蛋白(Na⁺/H⁺ antiporter)和膜泡质子泵(V-ATPase)基因表达水平。结果显示：密度和盐度对缢蛏血淋巴Na⁺浓度、K⁺浓度无显著交互影响作用,高盐组Na⁺浓度、K⁺浓度显著高于对照组;在实验12 h和24 h时,密度和盐度对Na⁺/K⁺-ATPase活性的影响具有显著交互作用,并且高盐度组和高密度组Na⁺/K⁺-ATPa...