应用正向间接血凝试验检测山羊痘抗体

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析的方法纯化山羊痘病毒,以病毒抗原致敏绵羊红细胞建立了山羊痘正向间接血凝试验,并进行了最佳试验条件的摸索.结果表明,试验所制备的诊断液能与山羊痘参考阳性血清发生特异性凝集,其凝集现象能被山羊痘阳性抗原特异性抑制,与其它常见的动物病阳性血清无交叉反应.用本方法及琼脂扩散试验对山羊痘血清进行检测,IHA阳性检出率为89.1%（41/46）;而AGP阳性检出率为34.8%（16/46）.表明正向间接血凝试验比琼脂扩散试验敏感性高.本次试验制备的正向间接血凝试验诊断液可用于兽医临床上进行快速诊断.     

检测鸡IBDV血清抗体的IHA的建立

以大肠杆菌表达的传染性法氏囊病病毒(IBDV)衣壳蛋白VP2致敏绵羊红细胞,建立间接血凝试验(IHA).对参考阳性血清(鸡新城疫病毒抗血清、鸡传染性支气管炎病毒抗血清、鸡禽痘病毒抗血清)及鸡参考阴性血清等分别进行微量IHA,加上抑制试验,结果证实其特异性高.对商品肉用仔鸡的30个血清样品、IBDV重组亚单位疫苗免疫试验鸡的20个血清样品,分别进行微量IHA和琼脂免疫扩散试验(AGID),将肉用仔鸡血清的阳性检出率进行t检验(P＜0.05);而20份免疫试验鸡血清样品IHA阳性检出率与AGID阳性检出率均为100%.对30份肉用仔鸡血清样品和20份免疫试验鸡血清样品检测得到的阳性血清的平均滴度进行方差分析,IHA的平均滴度与AGID的平均滴度之间均具有显著性差异.对20份免疫试验鸡血清及IBDV参考阳性血清以3个批次和第2批次IHA试验制剂,分别进行重复性试验,对其IHA平均滴度进行了方差分析,均无显著性差异.对20份免疫试验鸡血清以在4℃、保存期分别为3、6、9个月的IHA的试验制剂进行了微量IHA,检出的IBDV抗体平均滴度中,3个月的与6个月的无显著差异;3个月的与9个月的及6个月的与9个月的,均有显著差异,结果表明该IHA试验制剂在4℃的保存期可达6个月.     

间接血凝试验检测鸡传染性法氏囊病抗体研究

本试验用鸡传染性法氏囊病(IBD)弱毒抗原致敏绵羊红细胞(SRBC),通过间接血凝试验(IHA)检测了10份接种 IBD 疫苗后第35日龄鸡的血清,10份高免血清,10份未免疫健康鸡血清,并辅以对流免疫电泳(CIEP)相对照。结果 IHA 与 CIEP 的阳性符合率为94.7％,并通过鉴别试验和间接血凝抑制试验,证明此法具有很高的特异性。     

应用间接血凝诊断牛东毕吸虫病

本试验通过二次醛化绵羊红细胞,初步建立了使用间接血凝(IHA)诊断牛东毕吸虫病的方法,并对62份阳性血清、25份阴性血清分别进行了检测。结果表明:阳性符合率可达96.8％,阴性符合率为96％。本方法具有较强的特异性和较高的敏感性。     

应用酶联免疫吸附试验检测牛肺疫血清抗体的研究

本文用普通ELISA和BA--ELISA检测牛肺疫血清抗体并与间接血凝试验和补体结合试验作比较,结果表明阳性检出率BA--ELISA(86.7%,13/15)>普通ELISA(80%,12/15)>间接血凝(53.3%,8/15)>补反试验(40%,6/15)。8种类症鉴别血清中6种呈现ELISA阴性。故认为ELISA是一种特异、敏感、快速、简便的血清学检测牛肺疫的方法,适于在现地检验时应用。     

兔支气管败血波氏杆菌菌毛粗提物3种抗体检测方法的建立及比较

利用超声波处理结合TritonX-100溶解法制备粗提的菌毛抗原,建立了3种用于支气管败血波氏杆菌的抗体检测方法:琼脂免疫扩散试验(AGID)、玻片凝集试验(SAT)、间接血凝试验(IHA)。临床检测了458份兔血清样品,结果显示:HA试验的阳性检出率最高,为73.36%(336/458),AGID试验阳性63.54%(291/458),SAT试验阳性61.79%(283/458),三者平均阳性为57.20%(262/458);IHA与AGID的符合率为90.17%,IHA与SAT的符合率为86.68%,AGID与SAT的符合率为89.08%。表明IHA试验更为敏感,可用于支气管败血波氏杆菌的血清学监测。     

用间接血凝法诊断绵羊东毕吸虫病的研究

用间接血凝法对绵羊东毕吸虫病的诊断作了试验及其研究。在试验中采用戊二醛固定绵羊红血球,对影响血凝效果的诸因素作了测定。作者认为在 pH6.8条件下,用每 ml 含20μg 蛋白质浓度的雄虫粗抗原致敏1:20000鞣酸处理的红血球获得的试验效果最佳。被检血清在1:160以上的稀释度凝集时,定为阳性。用间接血凝法对近百只寄生有东毕吸虫的绵羊和数十只寄生有其它蠕虫的绵羊作了试验观察。该方法对东毕吸虫病绵羊的检出率为91.11%。由肝片吸虫,前后盘吸虫病绵羊引起的假阳性率为8.6%。寄生有消化道线虫的绵羊均为阴性。该试验结果表明,间接血凝法诊断绵羊东毕吸虫病有较高的敏感性,较好的特异性和重复性。用间接血凝法和粪孵法分别对20只患有东毕吸虫病的绵羊作了诊断试验。其结果,间接血凝法对东毕吸虫病绵羊的检出率比粪检法高20%。     

滤纸干血样IHA诊断血吸虫病影响因素探讨

目的:探讨用滤纸干血样IHA法诊断血吸虫病的影响因素.方法:取阳性血清31份制成滤纸干血样,分别对滤纸性质、干燥方式、洗脱时间、保存方式等进行研究,并与血清IHA结果比较.结果:定性、定量滤纸各滴度阳性符合率均为100%.45℃烘干1∶80,56℃烘干1∶40、1∶80滴度阳性符合率有所降低,差异无显著性(P＞0.05),暖气烘干各滴度阳性符合率均明显降低,差异有极显著性(P＜0.01),自然晾干,37℃烘干各滴度,45、56℃烘干其余滴度阳性符合率均为100%;洗脱30 min时1∶40、1∶80滴度,60 min时1∶80滴度阳性符合率下降,差异无显著性(P＞0.05),其它各次阳性符合率均为100%.冰箱保存7 d,各滴度阳性符合率均为100%,室温保存7 d,各滴度阳性符合率下降,差异无显著性(P＞0.05).结论:滤纸性质对IHA结果影响不大;45、56℃烘干可使血样效价降低,暖气烘干可使检出率明显下降,应以自然晾干或37℃烘干为宜;洗脱30、60 min时血样效价略有下降,应以洗脱90 min为宜;室温保存可使检出率和效价出现下降,应以冰箱保存为宜.     

绵羊肺炎支原体的微生物学特性的研究

绵羊肺炎支原体是山羊和绵羊呼吸道中最常见的支原体,引起非进行性肺炎(CNP).2001～2002年对河北省的保定、邢台、邯郸、廊坊的6个种羊场的绵羊、山羊通过微量间接血凝试验(IHA)进行血清学检测,发现绵羊肺炎支原体的自然病例的阳性检出率为84.2%;并且从病羊的肺脏和鼻腔中分离出18株支原体,经过理化特性鉴定与生长抑制试验定型,证明其中12株为绵羊肺炎支原体,6株为精氨酸支原体.     

家兔豆状囊尾蚴的免疫诊断与药物治疗

本文对兔豆状囊尾蚴病的免疫学诊断和治疗进行了试验。首先对酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断本病的条件进行了研究。运用ELISA和间接血球凝集法(IHA)共检查感染免血清79例,未感染免血清47例。ELISA的符合率分别为98.73％和100％。IHA的未感染血清符合率亦为100％,但感染血清检出71例,符率为89.87％,显著低于ELISA的符合率(P<0.05)。此外,作者分四批对人工感染本虫的病兔进行治疗试验。结果表明,甲苯咪唑和吡喹酮对该病均有效,而且前者的效果优于后者,两者合用有协同作用。以甲苯咪唑治疗该病,35mg/kg×3剂量组的有效率可达99.74％,按200mgl/kg大剂量一次投药,疗效可达97％。感染后第10天或第40天开始治疗,效果没有显著差异。     

猪瘟免疫监测中微量间接炭凝与间接血凝的对比试验

猪瘟是一种常见病、多发病,临床发病较多,检测抗体仍然是实验室中常用的检测方法。为了验证微量间接炭凝集试验在监测猪抗体水平上的作用,我们进行了微量间接炭凝和间接血凝的对比试验。本试验采用炭凝抗原与血凝抗原,在U型板上检测待检血清。通过对比发现,微量间接炭凝集试验与在实践上推广应用的间接血凝有类似的效果,而微量间接炭凝集试验的抗原制作成本低廉,可以长期保存,经验证后有望在基层推广应用。     

副猪嗜血杆菌间接血凝诊断液的制备

【目的】建立一种便于检测副猪嗜血杆菌抗体的方法。【方法】将分离纯化的副猪嗜血杆菌5型超声裂解后,致敏双醛处理的健康绵羊红细胞,制成副猪嗜血杆菌5型间接血凝诊断液,检测该诊断液的活力及特异性。【结果】该诊断液特异性强,仅与副猪嗜血杆菌5型阳性血清发生凝集反应。活力也比较高,达到1:512以上,可以用其进行副猪嗜血杆菌疫苗免疫后抗体检测。【结论】该间接血凝诊断液成功制备为广大兽医化验人员提供一种简单、快速、经济的检测副猪嗜血杆菌抗体的方法,为副猪嗜血杆菌病的诊断和防治提供一种有效的手段     

鸡霍乱组织灭活苗的研究

选择鸡源多杀性巴氏杆菌C481强毒株(血清1型)接种鸡胚,收集死胚组织,分别以油乳剂、蜂胶和铝胶为佐剂,按一定比例配制成含1.5×1010个/ml巴氏杆菌的灭活苗。经试验证明,该疫苗安全、有效,其中油乳剂灭活苗的保护期和蜂胶灭活苗的保护期相当,但蜂胶灭活苗的抗体水平上升速度比油乳剂苗快且保护率高;铝胶苗的效果不及蜂胶苗和油苗。     

诊断兔豆状囊尾蚴病的不同血清学检查方法的对比研究

本研究用兔豆状囊尾蚴的囊液作抗原，用皮内变态应、琼脂双向扩散试验、对流兔疫电泳、炭凝集试验、胶乳凝集试验和间接血凝试验，检测了兔三状囊尾蚴病的阳性血清及阴性血清．并分析、比较了各种方法在诊断兔豆状囊尾蚴病的应用效果和价值．结果问接血凝试验的效果最好，其次是胶乳凝集试验、炭凝集试验．但三种方法检测效果差异不显著，都具有简便、早期、快速、敏感、准确等优点，均可在现地推广使用．而皮内变态反应、琼脂双向扩散试验、对流兔疫电泳的检出率低，不适合用于兔豆状囊尾蚴病的免疫学诊断．     

鸡非典型新城疫的诊断报告

对某鸡场因不明原因已死亡及濒死产蛋鸡进行病理剖检变化及实验室诊断，确诊为鸡非典型性新城疫．抗体检测的结果显示，随机抽样检测32份鸡血清的新城疫血凝抑制效价在1：40～1：2560之间，表明该鸡场的鸡群存在野毒感染．     

影响血凝抑制试验因素的研究进展

血凝抑制试验(HI)在畜牧业生产中应用非常广泛,但是影响其试验结果的因素较多.对红细胞、抗原、血清、稀释液、温度、作用时间及判定时间、试验器材、试验方法、判定方法和操作等因素对HI试验的影响进行了概述,以期能对生产应用提供参考.     

副猪嗜血杆菌间接血凝诊断液的研究

将分离纯化的副猪嗜血杆菌5型超声裂解后,和致敏双醛处理的健康绵羊红细胞,制成副猪嗜血杆菌5型间接血凝诊断液,用于检测血清中的抗副猪嗜血杆菌抗体的效价。实验表明该法操作简便,特异性强,不与其他传染病阳性血清发生交叉凝集。     

一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验

用热酚—水法提取沙门氏菌脂多糖(LPS),经pH8.0热处理后,致敏醛化的绵羊红血球,建立了一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验。用致敏血球在96孔V型血凝板上与杂交瘤培养上清作凝集试验,数秒钟即能判定结果。本试验具有快速的特点,且有一定的敏感性。     

鸡大肠杆菌(O78)超声波灭活菌苗研究

菌毛提取液,荚膜多糖－破伤风类毒素（ＣＰＳ－ＴＴ）载体抗原液及热、甲醛和超声波灭活菌液中加入蜂胶佐剂,制成菌苗免疫石岐杂鸡,７７及１１２ｄ攻毒保护试验结果表明,超声波灭活菌体的免疫原性最好,热灭活菌体最差,菌毛,ＣＰＳ－ＴＴ及甲醛灭活菌体的免疫原性相当。尤其采用超声波处理的菌液作抗原为明显。