美洲南瓜远缘杂交亲和性研究

选取南瓜属3个主要栽培种29个材料并选配了大量杂交组合,结果表明:美洲南瓜与中国南瓜或印度南瓜进行种间杂交,美洲南瓜只适合作为父本;中国南瓜或印度南瓜的不同试材作为母本与美洲南瓜杂交,存在亲和性差异,表现在坐果率、单果种子数、种子发育程度以及有胚果实率等方面的不同;美洲南瓜种内变种间不存在生殖隔离,可通过相互杂交融合目标性状。试验总结出杂交授粉时间在上午6:30至8:30,采用全程防虫网覆盖、吊蔓栽培技术,可提高坐果率并延长种胚发育时间,改善南瓜属远缘杂交亲和性。     

裸仁美洲南瓜ISSR-PCR反应体系的正交优化

利用正交试验设计L16(44)对美洲南瓜ISSR-PCR反应体系的4因素(Mg2+,dNTPs,引物,Taq酶)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用SPSS16.0统计软件分析,结果表明,各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中引物浓度的影响最大;本研究还筛选出各反应因素的最佳水平,建立美洲南瓜IS-SR-PCR反应的最佳体系(25μL)为:0.75 U Taq酶,2.0 mmol.L-1Mg2+,300μmol.L-1dNTPs,10μmol.L-1引物和DNA模板30 ng,2.5μL 10×buffer。     

子用美洲南瓜新品种金龙瓜1号

<正>金龙瓜1号是黑龙江省农业科学院生物技术研究所选育的子用美洲南瓜杂交一代新品种,具有高产、适宜密植和抗病性强的优点。该品种从播种到第一雌花开放需40～45天,单瓜发育期40～50天,全生育期1 0 5天左右。短蔓型,主茎长50～70厘米,茎五棱、有沟,茎、瓜梗、叶片上均着生小刺,叶片深绿色、有缺刻,可以产生不定根。单株结瓜1～2个,     

美洲南瓜种皮发育相关物质含量变化研究

以美洲南瓜有壳品种04LAg-26-2和无壳品种04LAg-26-28为试材,研究了种皮发育过程中种皮鲜重、种皮干重、可溶性糖、淀粉、纤维素、半纤维素和酚类物质的变化规律,结果表明:种皮鲜重,从授粉至种子成熟有壳美洲南瓜高于无壳美洲南瓜,且均逐渐增加;种皮干重,有壳美洲南瓜随种子成熟逐渐增加,无壳美洲南瓜种皮干重随种子成熟逐渐减少,但从授粉开始至授粉20 d有壳美洲南瓜的种皮干重低于无壳美洲南瓜;可溶性糖,有壳美洲南瓜呈低-高-低趋势,无壳美洲南瓜呈逐渐降低趋势,且总体上有壳美洲南瓜高于无壳美洲南瓜;淀粉含量波动较大,总体基本呈降低趋势,而且无壳美洲南瓜低于有壳美洲南瓜;纤维素含量无壳美洲南瓜低于有壳美洲南瓜,从授粉开始至授粉20 d均呈降低趋势,但授粉20 d至种子成熟,有壳美洲南瓜逐渐增加,而无壳美洲南瓜则逐渐降低;半纤维素和酚类物质的变化趋势相似,即有壳美洲南瓜高于无壳美洲南瓜,而且从授粉开始至授粉20 d均呈增加趋势,授粉20 d至种子成熟,有壳美洲南瓜持续增加,而无壳美洲南瓜则逐渐降低,接近于0。     

美洲南瓜种皮RNA提取方法的比较

为探索提取高质量RNA的方法,采用改良CTAB法、SDS法、异硫酸氰胍法和Trizol法从美洲南瓜种皮中提取总RNA.结果表明:改良CTAB法提取的RNA中28 S rRNA和18 S rRNA 2条带清晰,且28 S rRNA在亮度约为18 S rRNA的2倍,两条带之间无弥散现象;OD260/OD280值为1.996 5,OD260/OD230为2.235 7,RNA产率为161 μg/g.异硫酸氰胍法提取的总RNA纯度较高,但产量较低;SDS法和Trizol法提取的总RNA产量较低,且纯度不高.改良的CTAB法从种皮中提取的RNA质量好、产率高、完整性强,是从富含次生代谢物质的种皮中提取高质量总RNA的有效方法.     

美洲南瓜种质资源遗传多样性的ISSR分析

【目的】解决武威地区美洲南瓜品种归类不明确的问题.【方法】利用ISSR标记对28份美洲南瓜材料进行了遗传多样性的研究.【结果】从48条ISSR引物中共筛选出7条重复性高和扩增条带清晰的引物,PCR扩增共获得56条条带,平均每条引物扩增条带数为8条,多态性条带54条,多态性比率为96.43%,材料间遗传相似系数为0.60~0.93,表现出丰富的遗传多样性,并通过UPGMA分子系统聚类法,将28份美洲南瓜材料分为5个大类群.【结论】本研究为拓展美洲南瓜种质资源和发掘新种质提供了理论基础.     

双重RT-PCR法快速检测多种马铃薯病毒的研究

为建立快速、简便、灵敏度高、特异性强的RT-PCR检测马铃薯病毒技术,依据马铃薯X病毒、马铃薯S病毒、马铃薯A病毒以及马铃薯卷叶病毒的基因组RNA保守序列设计特异性引物对,从反转录和PCR等方面优化双重RT-PCR反应条件,同步扩增出上述四4种病毒,分别得到620(PVX)、435(PVS)、300(PVA)、222 bp(PLRV)大小的扩增片段。结果表明,反转录反应中引物浓度比例、dNTPs浓度和PCR反应中Mg2+浓度对双重RT-PCR检测多种马铃薯病毒的影响较大。优化的双重RT-PCR反应体系可以同步快速检测田间自然感染的马铃薯病毒,此方法还适合检测马铃薯脱毒种薯及试管苗,对马铃薯病毒病早期监测有一定的作用。     

外源激素处理对美洲南瓜植株生长的影响

为探究激素对南瓜植株生长的影响,试验采用不同浓度GA3、IAA、6-BA和BR处理短蔓美洲南瓜自交系X10和长蔓美洲南瓜自交系JIN234幼苗。结果表明,外源喷施GA3显著增加南瓜植株主蔓和第一节间长度,50 mg·L-1GA3使短蔓X10主蔓长度与长蔓JIN234达相同水平,外源喷施IAA、6-BA和BR均未增加南瓜植株主蔓长度,推测短蔓自交系X10属于GA激素敏感型。外源喷施IAA显著增加南瓜植株下胚轴粗度,对植株叶片和叶柄生长无影响;外源喷施6-BA抑制南瓜植株下胚轴伸长,低浓度(1 mg·L~(-1))6-BA增加叶片长度,降低叶片宽度,而高浓度(30 mg·L-1)6-BA抑制叶柄伸长;外源喷施BR对南瓜植株生长影响较小。内源激素检测发现X10体内有生物活性的GA3和GA4含量显著低于JIN234,无活性的GA34含量显著高于JIN234,推测自交系X10矮化与植物体内GA活性相关。     

双重RT-PCR同时检测兰花两种主要病毒的研究

以利用Trizol试剂盒提取的蝴蝶兰组培苗叶片总RNA为模板,根据已报道的建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglussm ringspot virus,ORSV)外壳蛋白基因(cp)的保守序列设计特异性引物,探索RT-PCR反应条件,建立了可同时检测CyMV和ORSV的双重RT-PCR体系。     

美洲南瓜枯萎病生防药剂和生防菌株筛选

为筛选对美洲南瓜枯萎病具有良好抑制作用的生防药剂及生防菌株,选择4种植物源生防农药和4种生防菌株对美洲南瓜枯萎病进行药剂筛选和室内防效测定。结果表明:生防木霉T6菌株发酵液以及0.3%丁子香酚对该病菌具有较强的抑制作用,稀释5倍的生防木霉T6菌株发酵液制成含药培养基培养7 d时,对病原菌的抑制率为85.7%;稀释250倍的0.3%丁子香酚可溶性液剂制成含药培养基培养7 d时,对病原菌的抑制率为82.6%。长枝木霉T6菌株发酵液室内防效测定结果显示有一定防效。     

美洲南瓜抗白粉品种筛选及其与生理指标的相关性

【目的】建立美洲南瓜抗白粉病评价指标,筛选抗性较强的品种。【方法】试验以14个美洲南瓜品种为试材,基于病情指数、抗性划分标准和生理指标测定了不同南瓜品种对白粉病的抗性效果,并筛选出抗病品种。【结果】筛选出抗病品种1个、中抗品种5个、感病品种6个和极感品种2个。抗病品种叶片中脯氨酸（Pro）含量、苯丙氨酸解氨酶（PAL）含量、丙二醛（MDA）含量、蜡质含量均高于感病品种,可溶性蛋白（SP）含量低于感病品种,其中蜡质含量、MDA含量、Pro含量、PAL含量与病情指数呈负相关关系,SP含量与病情指数呈正相关关系。【结论】蜡质含量、SP含量、Pro含量、PAL含量、MDA含量均可作为美洲南瓜白粉病抗性品种抗性评价指标。根据病情指数和生理生化指标,JPG2015-44和JPG2015-12为美洲南瓜白粉病抗病品种。     

美洲南瓜裸仁基因的AFLP和SCAR分子标记分析

以美洲南瓜有壳品系“金辉二号-2”和无壳品系“0516-2”进行杂交,获得193个F2单株作为作图群体,利用AFLP分子标记技术和集群分析法(BSA)对与美洲南瓜裸仁基因连锁的分子标记进行研究.结果表明,找到了与裸仁基因n连锁的4个AFLP标记:E19M60-C、E22M48-B、E13M60-A和E25M51-D,连...     

双重一步法RT-PCR检测2种主要兰花病毒

[目的]研究建兰花叶病毒（CymMV）和齿兰环斑病毒（ORSV）双重一步法RT—PCR检测方法,为病毒的早期快速诊断提供技术支持。[方法]根据2种病毒的外壳蛋白基因的保守序列分别设计两对特异性引物,并进行双重与单一RT—PCR对比试验。[结果]结果在健康蜘蛛兰被人工接种病毒后第10天和第21天用一步法RT-PCR方法分别获得CymMV和ORSV与预期相符的约764和946bp扩增产物务带;且双重一步法RT—PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,出现两务与单一RT—PCR产物相对应的清晰务带,获得较理想的检出效果;扩增产物的核酸序列经BLAST分析,同源性均在85％以上,证实了检测结果的准确性。[结论]该方法具有更加灵敏、特异、快速和简便的特点,适合于两种主要兰花病毒的同时快速检测。     

马铃薯病毒RT-PCR检测体系的建立

依据马铃薯病毒PVS、PVX、PLRV、PVA的CP保守序列设计特异性引物,从马铃薯病叶组织中提取出病毒总RNA,进行cDNA合成和PCR扩增,得到了与预期片段长度一致的PCR特异扩增产物,建立了能够同步检测PVS、PVX、PLRV、PVA的RT-PCR多重检测体系。该方法对PVS、PVX、PLRV、PVA扩增出的靶带大小分别为435、625、222、300 bp,凝胶电泳易辨别区分。研究结果表明,该方法特异性好、灵敏度高、快速简便,为马铃薯病毒的高效检测提供了有效手段。     

裸仁美洲南瓜白粉病菌对5种三唑类杀菌剂的敏感性研究

为明确裸仁美洲南瓜白粉病菌对丙环唑、腈菌唑、己唑醇、氟硅唑和戊唑醇5种三唑类杀菌剂的敏感性,在室内条件下,测定5种三唑类药剂对南瓜白粉病菌的毒力,结果表明:腈菌唑毒力作用最强, EC_(50)值为62.11μg·mL~(-1);戊唑醇作用最差, EC_(50)值为1 503.97μg·mL~(-1);而氟硅唑、丙环唑和己唑醇的EC_(50)值介于二者之间,分别为929.43、442.01和67.53μg·mL~(-1)。进一步探讨5种三唑类杀菌剂对裸仁美洲南瓜白粉病的防治效果和白粉病菌接种前后不同施药时间对白粉病菌的抑制作用,结果表明:12.5%腈菌唑对裸仁美洲南瓜白粉病的防治效果最佳(90.13%), 25%戊唑醇防治效果最差(72.21%);白粉病菌接种前后不同施药时间对白粉病菌的抑制作用不同,接种后24 h施丙环唑和腈菌唑最敏感,接种后96 h施氟硅唑和戊唑醇最敏感,接种后48 h施己唑醇最敏感。     

PVYN与PVYO病毒RT-PCR快速检测体系研究

 马铃薯Y病毒（PVY）是侵染马铃薯的重要病毒之一，严重影响马铃薯的生产。本文通过对PVY病毒N株系（PVYN）与O株系（PVYO）的基因序列进行比较，在其外壳蛋白同源区设计一对通用引物，建立了PVY病毒的RT-PCR检测体系。另外在N株系与O株系同源区设计一条3′引物，选择N株系与O株系差异区设计两条5′端引物，建立了可鉴定PVYN与PVYO的复合RT-PCR体系。这个体系的建立，对于马铃薯脱毒苗的检测与PVY病毒的调查及病理研究都具有一定的应用价值。     

黑龙江省南瓜死秧烂瓜病原菌的研究

作者研究了近几年来导致黑龙江省南瓜大面积烂秧烂瓜的病原菌的形态、生理及致病性。该病原菌在ＣＡ上菌落呈非绒毛状，边缘清晰。菌丝柔韧，平均宽５．５０μｍ。ＣＡ培养基上和水中均不产生厚壁孢子。孢囊梗单轴分枝或不规则分枝。诱发形成椭圆形、近球形、卵形或不规则形孢子囊。孢子囊乳突明显，呈半球形，多数１个，少数２个，平均高度４．８０μｍ。孢子囊平均长５７μｍ，宽３９μｍ，长宽比为１．５。孢子囊脱落后具长柄，平均柄长４５μｍ，偶尔侧面着生。孢子囊萌发一般产生游动孢子，排孢孔平均宽７．１０μｍ，有时也产生静孢子球。异宗配合，藏卵器球形，平均直径３２μｍ，雄器围生，高１５．６０μｍ，宽１３．６０μｍ。菌丝生长最适温度２２℃～３２℃，最高生长温度３７℃。能利用淀粉作为唯一碳源，淀粉水解指数７４％。在含有１ｍｇ·ｋｇ－１孔雀石绿的培养基上能正常生长。能侵染多种葫芦科植物和辣椒、豌豆等植物，致病力较强，寄主范围较广。接种马铃薯块茎和苹果果实只造成轻微腐烂。根据Ｈｏ（１９８１）和Ｎｅｗｈｏｏｋ（１９７８）的检索表，将该病原菌鉴定为辣椒疫霉Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｃａｐｓｉｃｉ。     

洞庭湖区南瓜品种适应性研究

为了引进和筛选适宜洞庭湖区种植的南瓜新优品种,对新引进的12个南瓜品种在湖南省常德市武陵区进行了品种适应性栽培试验。结果表明,顺祺南瓜王开花早,成熟早,适于早熟栽培;嘉禾大果密本含糖量高,适于用作高品质栽培;兴蔬大果密本瓜体大,产量高,单瓜重达到4 156 g,单产达到39.95 t/hm²,适于作丰产栽培。生产上,南瓜种植者可根据市场需求特点,选择合适的南瓜品种进行栽培。     

PNRSV RT-PCR检测体系的建立与应用

以指示植物GF305和田间果树为试材,建立并优化了特异性强、灵敏度高、成本低的李属坏死环斑病毒(PNRSV)RT-PCR检测体系,使用该优化体系对樱桃树、桃树和杏树中携带PNRSV的情况进行了调查。结果表明,被检材料的李属坏死环斑病毒(PNRSV)感染率均较高,但程度不同。