STAT信号通路对小鼠脾脏MDSC极化状态的影响

利用B16F10荷瘤小鼠诱导髓源性抑制细胞(MDSC)的产生,磁珠分选小鼠脾脏中的MDSC,体外用相应的细胞因子刺激后,提取其总蛋白质,Western blot方法检测转录激活因子(STAT)通路的活化情况,并利用STAT通路抑制剂,ELISA方法检测代表MDSC极化状态的IL-10和TNF-α的分泌情况,探讨STAT...     

苹果多酚对小鼠H22细胞株移植性肿瘤的抑制作用

[目的]观察苹果多酚对小鼠H22细胞株移植性肿瘤的抑瘤作用,为进一步研究其抗肿瘤机制提供参考。[方法]以CTX为对照,研究灌胃不同剂量苹果多酚溶液对小鼠H22细胞移植性肿瘤的抑制作用及其对EAC腹水型小鼠生命延长率的影响。[结果]大、中、小剂量苹果多酚对}122实体瘤的体内抑瘤率分别为48．70％、62．12％、42．97％,但效果均不如CTX（76．11％）。随着给药时间的延长,肿瘤的大小与空白对照组相比均有明显的减小,但剂量-效应关系不明确。经大、中、小剂量苹果多酚处理后,EAC腹水型小鼠模型的平均存活天数分别为15．43、16．05和17．51d,均高于空白对照组（15．51d）,但均低于CTX对照组（20．67d）,生命延长率分别为3．06％、7．78％、15．31％,也无明确的剂量-效应关系。[结论]苹果多酚在体内对H22移植性肿瘤具有良好的抑制作用,但其剂量一效应关系不明确;对于荷EAC小鼠的生存时间无显著影响。     

pH与光照对苹果多酚稳定性的影响

以干苹果渣为原料,用水浸提得到苹果渣多酚提取液。以总酚含量、DPPH自由基清除率和对脂质过氧化的抑制率为指标,探讨了pH和光照对苹果多酚提取液稳定性的影响。结果表明院pH对苹果多酚的总酚含量和抗氧化性能力的影响显著,中性和偏酸性的环境下,苹果多酚稳定,适宜贮藏。光照对苹果多酚的稳定性影响很大,紫外光和自然散射光条件下,总酚含量和抗氧化性能均呈现明显的减少和减弱趋势。同时也发现多酚本身也不稳定,即使在避光条件下,其抑制脂质过氧化的能力也快速减弱。但是避光的条件对于减缓其总酚含量的减少和清除DPPH自由基能力的下降还是有一定帮助的,因此在研究苹果多酚时最好将其避光贮藏。     

钙信号通过IP3通路对肥胖小鼠脂肪合成代谢的影响

【目的】探讨IP3信号通路是否会影响肥胖小鼠细胞内的钙离子浓度以及钙信号对肥胖小鼠脂肪代谢的作用机制,进一步了解胞内钙离子浓度变化对脂肪代谢的作用机理。【方法】用高脂日粮饲喂小鼠30d以建立肥胖模型,将肥胖小鼠分为对照组、去甲肾上腺素(NE)组、肝素组、钙组、钙+NE组和钙+肝素组,除对照组和钙组外的各药物组小鼠分别给予相应的药物处理,腹腔注射质量浓度0.1mg/mL的NE或1.5mg/mL的肝素0.2mL/(只.d);对照组和钙组同法给予等体积的生理盐水。对照组、NE组和肝素组小鼠饲喂普通日粮,钙组、钙+NE组和钙+肝素组小鼠饲喂加钙饲粮(钙含量12g/kg),小鼠共饲喂16d,期间每3d测1次体质量,17d时禁食12h,摘眼球取血后脱颈椎处死,分离血清检测其中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白(HDL-C)的浓度,并取脂肪组织,测定附睾脂肪和肾周脂肪组织质量,分析附睾脂肪、肾周脂肪和肝脏的钙含量。通过RT-PCR法分析与脂肪生成密切相关的转录因子PPARγ、C/EBPα和脂解基因HSL及生脂基因FAS mRNA的表达水平,检测IP3受体IP3R1的mRNA表达水平。【结果】肝素和膳食钙处理对肥胖小鼠有极显著的减肥效果(P<0.01),可极显著减少体脂质量(P<0.01),降低血清中TG和TC浓度(P<0.01),而HDL-C浓度极显著升高(P<0.01),肝素和膳食钙处理肥胖小鼠的PPARγ、FAS和IP3R1的mRNA水平均极显著降低(P<0.01),HSL mRNA水平极显著升高(P<0.01),C/EBPα的mRNA水平无明显变化;NE处理对肥胖小鼠的作用效果与肝素相反,其可明显削弱减肥作用(P<0.01)。膳食钙有显著的减肥效果(P<0.01),但钙+NE组的减肥效果弱于钙组(P<0.01),钙+肝素组的减肥效果强于膳食钙的处理效果(P<0.01)。【结论】IP3通路激活可引起胞内钙离子浓度升高,脂肪蓄积增加;反之,脂肪蓄积减少。通过IP3通路,膳食钙可抑制胞内钙离子增加。     

华蟾毒精对小鼠巨噬细胞功能的影响

【目的】阐明华蟾毒精(CBG)对巨噬细胞功能的影响,为CBG的开发和利用提供理论依据。【方法】利用Balb/c小鼠制备与纯化腹腔巨噬细胞,采用不同质量浓度(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L)CBG作用于巨噬细胞,采用MTT法检测CBG对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的影响;采用Griess法检测CBG对巨噬细胞分泌NO的影响;采用ELISA法检测CBG对巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α和GM-CSF的影响。【结果】CBG质量浓度为1.0,1.5和2.0mg/L组均能极显著提高巨噬细胞的吞噬功能;CBG质量浓度为0.5 mg/L组能显著促进巨噬细胞NO的分泌,而1.0,1.5和2.0mg/L CBG组均能极显著促进巨噬细胞NO的分泌;CBG质量浓度为1.0,1.5和2.0mg/L组均能极显著促进巨噬细胞IL-6的分泌;1.0mg/L CBG组能显著促进巨噬细胞TNF-α的分泌,1.5和2.0mg/L CBG组均能极显著促进巨噬细胞TNF-α的分泌;CBG质量浓度为0.5,1.0,1.5和2.0mg/L组均能极显著促进巨噬细胞GM-CSF的分泌。【结论】CBG能提高巨噬细胞的吞噬功能和分泌功能,说明CBG具有良好的抗炎、抗肿瘤和提高免疫等作用。     

内毒素对妊娠小鼠子宫内巨噬细胞的影响

研究了内毒素对妊娠小鼠子宫内巨噬细胞的数量和分布的影响,以探讨巨噬细胞对胚胎的着床和维持的作用。采用昆明系妊娠小鼠分为对照组和试验组,在小鼠妊娠6 d(D_6)对照组腹腔注射生理盐水,试验组分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,分别注射1、2、4μg剂量的内毒素,用酶组织化学染色的方法显示出子宫内巨噬细胞的数量和分布。结果显示,与对照组相比较,试验Ⅰ、Ⅲ组子宫内巨噬细胞的数量明显增多,差异极显著,而试验Ⅱ组与对照组没有显著差异。巨噬细胞在子宫环肌外层、环肌内层和内膜上的分布与对照组相比较,环肌外层巨噬细胞数量减少,而环肌内层和内膜的巨噬细胞数量明显增多,差异显著。提示内毒素使妊娠小鼠子宫内巨噬细胞数量增多,细胞向子宫内膜迁移,而不利于胚胎着床和维持,可能对母胎免疫耐受产生影响。     

甘草多糖对小鼠血红蛋白和巨噬细胞的影响

将从甘草根中提取的多糖(GPS)给小鼠腹腔注射,测其对小鼠血红蛋白(Hb)及巨噬细胞(ΜΦ)吞噬功能的影响。结果表明GPS对机体Hb和ΜΦ吞噬功能均无显著影响。     

苹果多酚抗氧化性的测定

以新鲜苹果为原料,研究了所提取的苹果多酚的抗氧化特性。结果表明:在油脂中按油重的0.02%添加苹果多酚,可延长菜籽油出厂期9 d,过氧化值(POV)为10.42 mmol/kg,抑制率达到51.71%;对猪油的抗氧化性在10 d时达到最大,抑制率达到53.71%。由此可见,苹果多酚对延长菜籽油的保质期有明显的功效,对植物油和动物油均有较明显的抗氧化作用。     

苹果多酚对灌肠的抗氧化性能研究

苹果汁生产废渣经70%乙醇提取制得苹果多酚(AP),与BHT(1∶1)复配后,按0.02%的比例加入灌肠,对其抗氧化活性进行跟踪检测。结果表明:加入复配物的灌肠抗氧化性是空白的12.8倍,风味明显改善,抗氧化效果明显,能使得灌肠保鲜期延长半年左右。     

牛磺胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

为了阐明TCA对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响,本研究分别采用鸡红细胞半体内法和体外培养的腹腔巨噬细胞吞噬中性红法测定了TCA对体内、外小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果证明,高、低剂量的TCA均能极显著的提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率（P〈0.01）,显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的鸡红细胞吞噬指数;0.015μg/ml、0.3μg/ml、1.5μg/ml和15μg/ml的TCA均能显著提高体外培养小鼠腹腔巨噬细胞对中性红的吞噬率（P〈0.05）,表明TCA具有提高巨噬细胞吞噬功能的作用。采用ELISA法测定了TCA对小鼠巨噬细胞分泌白介素-1β的影响,试验结果表明,高、低剂量的TCA均能极显著提高正常和免疫抑制小鼠血清中的含量（P〈0.01）,1.5和15？g/mL的TCA可显著提高体外培养小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.01）,0.015μg/ml和1.5μg/ml的TCA可极显著提高LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.01）,0.3μg/ml和15μg/ml的TCA可显著提高LPS活化的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β的分泌量（P〈0.05）,表明TCA具有促进腹腔巨噬细胞的分泌IL-1β的功能。     

消黄散对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬机能的影响

用胃管每日一次给两个试验组小鼠灌服消黄散汤剂0．5ml/只,在给药第三天,第六天分别腹腔注射3％的鸡红细胞悬液1ml/只,11小时后处死吸取腹腔冲洗液,滴片,染色,孵育,镜检观察。结果,消黄散能显增强腹腔巨噬细胞的吞噬机能。     

苹果多酚抑菌作用的研究

为建立多酚浓度与细菌生长速率之间的关系,该文采用微量量热法研究了不同浓度的苹果多酚对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用。结果表明,苹果多酚对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有一定程度的抑制作用,且多酚浓度与细菌生长速率常数之间存在线性关系,其抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的临界生长用药浓度分别为0.218 6和1.558 0 mg/mL。      

中药抗病毒合剂对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响

用中药抗病毒合剂(KBDHJ)对小白鼠进行皮下注射给药,研究其对小白鼠巨噬细胞吞噬能力的影响。结果表明,KBDHJ对小鼠巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数有提高作用,而且随着药液浓度增加,巨噬细胞的吞噬能力进一步增强(P<0.05)。致炎物质10%牛肉汤的致炎效果比4%淀粉液更明显(P<0.05)。     

ZD制剂对小鼠巨噬细胞促炎性介质的影响

目的:研究ZD制剂在体外的抗炎机制。方法:通过脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型,使用5种不同浓度的ZD制剂进行试验,分别采用Griess反应测定细胞上清液中NO水平,ELISA法检测ZD制剂干预前后细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度。结果:用ZD制剂干预后,上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量与模型组相比均有下降,并存在剂量依赖关系。结论:因此,中药复方汤剂ZD制剂的体外抗炎作用机理之一是抑制NO、TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性介质的产生。     

中药抗病毒合剂对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响

用中药抗病毒合剂(KBDHJ)对小白鼠进行皮下注射给药,研究其对小白鼠巨噬细胞吞噬能力的影响。结果表明,KBDHJ对小鼠巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数有提高作用,而且随着药液浓度增加,巨噬细胞的吞噬能力进一步增强(P<0.05)。致炎物质10%牛肉汤的致炎效果比4%淀粉液更明显(P<0.05)。     

牛抵抗素对牛肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88非依赖信号通路基因表达的影响

旨在探究牛抵抗素通过TLR4/MyD88非依赖信号通路诱发牛肺泡巨噬细胞的相关炎症反应机理。使用100 ng·mL^-1终浓度牛抵抗素诱导牛肺泡巨噬细胞,分别在0、1.5、3.0、6.0、12.0、24.0 h时采用qRT-PCR检测TLR4/MyD88非依赖信号通路相关基因(TLR4、TRAM、NF-κB)mRNA水平表达量,通过ELISA法检测下游IL-6、1L-1β、TNF-α等促炎细胞因子表达水平。结果显示,100 ng·mL^-1牛抵抗素处理牛肺泡巨噬细胞后,TLR4、TRAM、NF-κB基因表达量于6.0 h时极显著上调(P<0.01),诱导12.0 h时,相关基因表达量达到最高;IL-6、1L-1β、TNF-α等促炎细胞因子于1.5 h表达量极显著上调(P<0.01),且均存在时间依赖效应。抵抗素诱导牛肺泡巨噬细胞后,可激活TLR4/MyD88非依赖信号通路,通过信号传递,释放大量促炎细胞因子,引起肺部炎症。     

不同浓度苹果多酚对壳聚糖复合膜液理化性质的影响

【目的】以5%（w/v）的壳聚糖（chitosan）溶液和苹果多酚（apple polyphenols,AP）为原料制备一种复合膜液,研究不同多酚添加量对复合膜液抗氧化活性、流变特性及稳定性的影响,以期制备性能良好的可食液体涂膜,为食品保鲜提供理论依据及技术参考。【方法】以浓度为5%的壳聚糖溶液为基质,通过添加苹果多酚,分别制备多酚含量为0.5%、1.0%、1.5%的复合膜液。同时以不添加多酚的膜液作对照。采用磁力搅拌将多酚均匀分散于膜液体系后,对膜液DPPH自由基清除能力、脂质氧化抑制能力、总还原力及OH自由基清除能力进行测定。采用AR-G2流变仪研究不同苹果多酚添加量对复合膜液剪切流变特性的影响。同时采用红外光谱（fourier transform infrared spectrum, FTIR）和X射线衍射（X-ray diffraction）对复合膜液体系中的分子间作用力和晶体结构进行表征。此外,采用Q600SDT热分析系统在50℃-400℃范围内对复合膜液样品进行热稳定性分析。【结果】苹果多酚可显著提高复合膜液的抗氧化活性（P＜0.01）,且随苹果多酚添加量增加,复合膜液抗氧化活性也随之增加。当苹果多酚添加量为0.5%时,复合膜液的DPPH自由基清除率、脂质氧化抑制率和OH自由基清除率分别为41.33%、56.32%、35.44%;当苹果多酚添加量增至1.5%时,DPPH自由基清除率、脂质氧化抑制率和OH自由基清除率增加至94.3%、95.9%、98.4%。与同等浓度的BHT（2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚）相比,复合膜液具有更高的抗氧化活性（P＜0.01）。此外,随着苹果多酚浓度的增加,复合膜液的总还原力也显著提高。流变学分析结果表明,复合膜液为非牛顿剪切变稀型,随剪切速率增加,复合膜液表观黏度逐渐降低,最终趋于平稳（5 Pa·s）。此外,随苹果多酚添加量增加,复合膜液的非牛顿假塑性流体特征逐渐明显。当苹果多酚添加量为1.5%时,复合膜液动态流变特性由黏性模量主导转变为弹性模量主导。红外光谱和X-RAD分析结果表明,苹果多酚中-OH和壳聚糖分子中的-OH以及-NH₂形成明显的分子间弱作用力,使复合膜液在3 400 cm^-1处的红外吸收峰出现红移,1 545 cm^-1、1 245 cm^-1处的红外吸收峰有轻微减弱,且这种分子间弱作用力降低了壳聚糖的结晶度。热分析结果表明,苹果多酚添加量增加显著提高了复合膜液的热稳定性。对照组的3个阶段质量损失温度为50.8℃、110.7℃、269.9℃,当添加量1.5%苹果多酚时,复合膜液的质量损失温度增至56.6℃、128.7℃、272.9℃。【结论】苹果多酚-壳聚糖复合膜液具有良好的抗氧化能力,且膜液的黏度和热稳定性也较好,可作为一种优良的可食性液体涂膜应用于食品保鲜方面。     

苹果多酚对鲜切莲藕品质及褐变的影响

采用不同质量分数(0.1%、0.3%、0.5%)苹果多酚处理鲜切莲藕,通过测定低温贮藏期间色泽、脆度、抗坏血酸、总酚含量、多酚氧化酶和过氧化物酶活性等指标变化,研究苹果多酚对鲜切莲藕褐变及品质的影响。结果表明,苹果多酚处理显著抑制了鲜切莲藕褐变的发生,与其他处理组相比,0.1%苹果多酚处理保持了莲藕较好的色泽和脆度,延缓抗坏血酸和总酚含量的降解,减缓丙二醛含量的上升,抑制PPO和POD活性的升高。由此表明,苹果多酚处理可较好地保持鲜切莲藕的品质。     

牛磺胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞钙调素基因表达的影响

目的:观察牛磺胆酸(Taurocholate Acid,TCA)对小鼠腹腔巨噬细胞钙调素(calmodulin,CaM)基因表达的影响,探讨TCA对小鼠腹腔巨噬细胞的作用机制.方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,应用荧光定量RT-PCR技术检测TCA对小鼠腹腔巨噬细胞CaM mRNA表达的影响.结果:与LPS刺激组相比较,高剂量(15μg/mL)和低剂量(0.15μg/mL)的TCA组小鼠腹腔巨噬细胞CaM mRNA的表达均显著高于LPS刺激组(P＜0.05).结论:TCA能显著促进小鼠腹腔巨噬细胞CaM mRNA的表达.