冻融和超声波处理提高大米蛋白质提取率初报

为了提高大米蛋白质的提取率,研究采用冻融及低频超声波处理大米浆体后,再用碱液法提取大米中的蛋白质。结果表明,大米浆体经冻融处理和低频超声波处理后,蛋白质提取率较常规碱液法提取分别提高了2．6％和16.3％;在低频超声波和冻融协同处理下,蛋白质提取率较常规碱液法提取提高了22．7％。大米蛋白质的最佳提取工艺为：大米浆体经冻融2次、低频超声波处理14min,NaOH浓度为3．6g／L,浸提时间4h,提取温度为20℃,固液比1：6,大米蛋白质的提取率可达92．6％。     

三角褐指藻F-box like蛋白基因的原核表达及蛋白纯化

F-box蛋白是SCF复合体的重要组成元件之一,能通过泛素蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome system, UPS)参与调控胞内蛋白降解、受体识别、信号传导等生物学过程。为了探究一个F-box like蛋白在三角褐指藻细胞周期调控过程中的作用机制,本研究从三角褐指藻中克隆得到一个F-box like蛋白基因,构建原核表达载体Tph-pET28a-F-box,将其转入大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中诱导表达,并对其诱导表达条件进行了优化,最后使用镍螯合亲和层析柱(Ni-NTA Agarose)对重组蛋白进行纯化并进行了生物信息学分析。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测。结果显示,导入大肠杆菌BL21 (DE3)的三角褐指藻F-box like蛋白基因能够被诱导表达,重组可溶性蛋白最佳诱导条件为16℃时,以浓度为0.1 mmol/L的异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导12 h,纯化后的蛋白通过Western blot鉴定,显示在相对分子质量约为72.75 kD处出现一条与预期大小相符的蛋白印迹条带。生物信息学分析结果表明,该蛋白具有F-box蛋白的典型特征,位于膜外且不含有跨膜结构域,为亲水性蛋白,α-螺旋和无规卷曲为三角褐指藻F-box蛋白二级结构的主要组成元件。本研究为进一步研究三角褐指藻F-box like蛋白的作用机制奠定了基础。     

发芽糙米抗氧化性质的研究

以超声波—微波辅助乙醇提取法和乙醇提取法比较糙米发芽前后总多酚的变化。并对糙米和发芽糙米的多酚提取物进行羟基自由基清除能力、超氧阴离子清除能力、总还原力及油脂的抗氧化性质进行研究。结果表明,超声波—微波辅助乙醇提取法优于单纯的乙醇提取法,总多酚提取率提高了1.43倍。发芽糙米清除羟基自由基效果比糙米原料高40%;超氧阴离子清除能力比糙米原料高24.34%;还原能力比原料糙米高1.84倍,对延缓植物油脂的酸败效果明显好于原料糙米。     

改良冷冻法测定梨果实的石细胞含量

为了提高梨石细胞的提取效率,以黄金梨和茌梨的果实为试材,在冷冻提取方法的基础上,通过设置不同的冷冻时间和冻融次数来研究其对梨石细胞提取效果的影响。结果表明：所有处理中以处理（1）(3 h+3 h+3 h)反复冻融处理的提取效果最好,石细胞提取的量随着冻融次数的增加而增加,说明增加冻融次数有利于梨果实石细胞的提取;在冻融次数相同时,每次冷冻时间满足3 h后,再增加冷冻时间对提取效果影响不大。冷冻法提取石细胞效果与冻融次数密切相关,在满足基本的冷冻时间后,增加冻融次数可以显著提高梨石细胞的提取率。     

不同提取方法对半叶马尾藻多糖提取率的影响研究

应用热水提取法、酶解法、超声波提取法3种方法,从半叶马尾藻中提取多糖,以多糖提取率为指标,通过单因素和正交优化实验分别确立提取多糖的最佳工艺条件。结果表明,热水提取法的最佳工艺为：水浴温度85℃,pH值2．0,水浴时间5h,料液比1：30;酶解提取法的最佳工艺为：酶解温度50℃,时间2．5h,酶用量l％,pH值4．8,料液比1：30;超声波提取法的最佳工艺条件为：超声时间30min,温度80℃,功率300W,pH值2．0,料液比1：30。3种工艺的多糖提取率分别为：热水提取法4．50％,酶解法6．13％,超声波法10．55％。     

超声波强化提取香椿叶总三萜的工艺研究

为提高香椿叶总三萜提取率,采用超声波细胞破碎仪对香椿叶中的总三萜进行提取研究,通过单因素试验和正交试验确定最佳工艺参数。通过正交试验得出超声强化提取香椿叶总三萜的最佳提取工艺参数为乙醇体积分数80%,提取时间35 min,料液比1∶60,超声功率700 W,超声工作间歇比3S/1S,在此条件下提取量可达到19.26 mg/g。试验结果表明,超声波法强化提取香椿叶中的总三萜可以提高提取率,为香椿资源的合理开发提供理论依据。     

超声波预处理对水酶法提取扁桃仁油及水解蛋白影响的研究

以扁桃仁为原料,在水酶法提取扁桃仁油及水解蛋白前对原料进行超声波预处理。通过单因素试验与正交试验,确定最佳处理条件为:超声波功率300 W,温度40℃,时间15 min。在此条件下,扁桃仁油与水解蛋白提取率分别为80.43%和89.59%,比未经超声波预处理分别提高4.4%和5.2%。通过番红染色法观察了超声波与纤维素酶对原料细胞的破坏效果。     

超声波法提取蒲公英中绿原酸的工艺优化研究

蒲公英中含有的绿原酸具有抗菌消炎等多种活性。以蒲公英为原料,采用超声波法提取绿原酸,正交试验优化提取工艺。结果表明,提取蒲公英中绿原酸的最佳工艺条件为:蒲公英粉碎度60～80目,料液比1∶30(g/mL),超声功率198 W,乙醇浓度60%,提取时间60 min,超声温度80℃,在此条件下粗品绿原酸提取率达到1.803%。超声波法提取的绿原酸提取率(1.803%)显著高于热水浸泡法(1.257%)和冷浸法(0.984%)(P0.05)。     

超临界CO2萃取联合超声处理对凡纳滨对虾虾头油脂提取效果的影响

凡纳滨对虾在加工过程中会产生大量的虾头等副产物，其含有丰富的蛋白和脂类等物质。以虾头为原料，研究不同超临界CO2萃取压力（15~35 MPa）、温度（35~55 ℃）、时间（30~150 min）对虾头中油脂提取率的影响，采用超声波联合超临界技术提取油脂，气相质谱仪测定挥发性风味物质。结果表明，在超临界CO2萃取压力为30 MPa，35 ℃提取120 min时，虾头中油脂提取率为38.03%，联合超声处理（功率2.5 kW、频率35 kHz处理20 min），提取率可提高至52.97%±0.95%。经气相质谱检测，从虾头油脂中共检测出22种挥发性成分，包含烷烃类、醛类、酯类、酸类等。超声联合超临界提取方式可为对虾加工副产物的利用提供新技术。     

石蒜中加兰他敏微波提取工艺研究

石蒜富含重要药用成分加兰他敏,为了优化石蒜中加兰他敏的微波提取工艺,以石蒜为原料、乙醇作提取剂,研究微波功率、料液比、温度、提取时间及次数等单个因素对微波法提取加兰他敏的影响,用正交实验L9(34)确定最佳工艺条件,并与超声波法进行比较。结果显示:用微波法提取石蒜中加兰他敏的最佳条件为料液比1:7,提取温度45℃,微波功率350 W,提取时间7 min;在提取2次的情况下,加兰他敏的提取率达95.8%,产率达0.0549%,粗提取物中加兰他敏含量达15.15%。用微波法提取石蒜中加兰他敏具有提取温度低、时间短、提取率高等优点,整体效果优于超声波法。     

崂山奶山羊瘤胃微生物总DNA的提取方法优化

本试验对对瘤胃微生物总DNA提取方法进行了改进,将冻融法和CATB法相结合,可以将细菌、真菌和古细菌在内的各种微生物的细胞壁充分的粉碎,且DNA提取效果稳定,可以获得足够大的DNA片段（23kb）,可以满足后续试验的需要     

Comparison of the Essential Oils Extracted from HERBA MENTHAE by Different Methods

[Objective]To compare the effects of different extraction methods on the extraction rates of menthol and essential oil from HERBA MENTHAE. [Methods]Essential oils were extracted from HERBA MENTHAE by ultrasonic extraction method,cold leaching method,steam distillation method and supercritical CO2method. Menthol content was detected by gas chromatography. [Results]Extraction rates of essential oil and menthol were 2. 43% and 1. 77%,respectively. Extraction rates by ultrasonic extraction method were 1. 34% and 1. 09%; those by cold leaching method were 1. 27% and 1. 02%. And the extraction rates by steam distillation method were 1. 15% and 0. 90%,respectively.[Conclusions]Among the four extraction methods,supercritical CO2method was the most ideal.     

银杏愈伤组织细胞中总黄酮提取工艺的比较

为探索从药用植物细胞中提取黄酮类活性物质,用简单、易工业实现的低成本工艺获得较大的总黄酮提取率,为工业生产提供理论依据和实践指导,以银杏愈伤组织为材料提取总黄酮并测定含量。利用乙醇提取、超声波提取和水提取3种方法对银杏愈伤组织中黄酮类化合物进行提取,以络合分光光度法测定的黄酮得率为衡量指标,得到各自最佳的提取条件。结果表明：利用乙醇法提取愈伤组织中总黄酮提取最佳条件是：80%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶7（m∶v）,于60℃提取3次,总黄酮得率为3.67%;超声波法提取最佳条件为60%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶34（m∶v）,提取65 min总黄酮,得率为4.57%;水提法的最佳条件是：水温90℃,料液比为1∶30（m∶v）,提取3.5 h,总黄酮得率为2.95%。3种优化后的提取方法黄酮得率依次为：超声法＞乙醇法＞水提法。     

超声波联合混凝法处理制药废水的研究

为了探讨单独超声波降解法、混凝法及2种方法联合处理制药废水的可行性,研究了超声波辐射时间、功率以及混凝剂的种类、浓度对制药废水中COD和NH3-N去除的影响。结果表明：（1）超声波单独处理制药废水时,COD和NH3-N去除率先随着超声波辐射时间(200~1000 s)的增大而增大,最佳时间为1000 s,COD和NH3-N的最大去除率分别为27.80%、45.34%;超声波辐射时间为1000 s,COD和NH3-N去除率随着超声波辐射功率的增大而先增大后减小。（2）单独用混凝剂处理制药废水时,COD的去除率随着混凝剂的浓度(0.1~0.6 g/L)的增大而先增大后减小,PAC在0.3 g/L时为最佳,COD的去除率为40.10%,NH3-N的平均去除率保持在5%左右。（3）在各自的最佳状态下,先用超声波处理后加混凝剂比先加混凝剂后用超声波处理的COD和NH3-N的去除率高,分别为61.24%、58.63%。试验表明,先用超声波处理后加混凝剂比先加混凝剂后用超声波处理对COD和NH3-N的去除率高。     

三种方法提取大肠杆菌E.coli脂多糖的比较

寻找大肠杆菌E.coli脂多糖的最佳提取方法。分别用改良热酚法、超声波处理法、煮沸法从大肠杆菌细胞壁中提取脂多糖,经纯化后分别在721分光光度仪上测其吸光值;再用三种方法提取的脂多糖分别免疫草鱼,计数法测受试草鱼血液中白细胞的数量,愈创木酚法测受试鱼不同组织中过氧化氢酶的活力(用OD值表示)。改良热酚法、超声波处理法、煮沸法提取的脂多糖在稀释15倍时其吸光值分别是1.973、1.003和1.153;改良热酚法、超声波处理法、煮沸法提取的脂多糖在稀释15倍时免疫草鱼,测得受试鱼的白细胞数量分别为159个/μL、160个/μL和135个/μL,测得受试鱼血液中的过氧化氢酶活力分别是0.09、0.083、0.078,测得脾脏中的过氧化氢酶活力分别是0.083、0.078、0.06。结论改良热酚法提取的大肠杆菌脂多糖浓度高、免疫活性强,是相对比较好的一种提取方法。     

果蔬中单宁测定技术研究

为研究、建立快速、简便测定蔬菜、水果中单宁含量的方法,选用当前测定单宁应用最为广泛的可见分光光度法为基础进行可行性研究。采用配对t检验,用同一样品对不同单宁提取溶剂、温度和时间及测定的显色时间分别进行比较测定,从而选出最佳单宁提取和测定条件,并对建立的方法进行线性、精密度、准确度等的验证试验。确定了最佳的提取和检测条件为500W超声波提取,超声时间20min,提取溶剂水,温度60℃,显色时间1h。单宁测定线性范围为0~30mg/L,方法检出限0.2mg/g,加标回收率为95.8%~101.9%,相对标准偏差(RSD)1.07%~4.29%。该法具有操作简便、快速、精密度高、重现性好、加标回收率较高、分析成本低等特点。适合于果蔬中单宁酸的快速检测。     

乳制品包装材料中3种邻苯类增塑剂的检测研究

采用高效液相色谱方法对乳制品包装材料中可能含有的邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)和邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)进行了检测分析,对样品的前处理条件进行了优化。结果表明,采用20 mL正己烷为提取剂,于40℃水浴温度下超声波提取30 min,残渣再超声波提取10 min,能得到最大的提取率。样品高中低3个水平的加标回收率在89.88%～99.06%,标准偏差(RSD)在0.030 0%～2.06%。     

超声波提取菜籽粕中水溶性蛋白工艺的研究

以醇变性菜籽粕为原料,采用超声波提取水溶性蛋白,在单因素试验基础上,采用二次正交旋转组合方法,优化得到最佳提取条件为:pH值13,提取时间12 min,提取温度35℃,醇变性菜籽粕质量分数3%,在此条件下,水溶性蛋白质量分数达45.97%。     

响应面法优化棕色棉纤维原花青素的提取工艺

为了提高棕色棉纤维中原花青素的得率,优化原花青素的提取工艺。本文以棕色棉纤维为材料,研究甲醇浓度、料液比、超声时间和超声温度等单因素对原花青素提取率的影响,获得优化的提取条件。通过超声与甲醇-盐酸正丁醇相结合的方法提取原花青素,响应面法优化棕色棉纤维原花青素的提取工艺为：甲醇浓度83%,料液比1:60,超声温度42℃,超声时间18 min,提取率为(7.16±0.03)%,与一般方法相比,原花青素提取率提高4%左右。响应面法优化的提取工艺提取效率高,简单快速且可进行批量提取,为原花青素的生物活性研究和产品开发奠定基础。     

超声波辅助法提取金莲花中黄酮工艺研究

以超声波辅助法对大兴安岭金莲花中总黄酮的最佳提取工艺条件进行研究。以温度、料液比、乙醇体积分数、超声时间为提取影响因素,通过正交试验优化提取工艺。结果表明,各因素对总黄酮提取的影响次序为:料液比>超声时间>温度>乙醇体积分数,超声波辅助法的最佳工艺提取条件为:提取温度为50℃,料液比1:55,乙醇体积分数75%,超声时间40 min,总黄酮的提取率达4.659%。