3种吸附剂对黄曲霉毒素B1吸附能力的研究

 【目的】体外试验评价3种吸附剂（吸附剂A：主成分为酵母细胞壁提取物;吸附剂B：主成分为水合铝硅酸盐;吸附剂C为复合物,主成分是酵母细胞壁及水合铝硅酸盐）对黄曲霉毒素B1（AFB1）的吸附效果,并通过吸附剂对摄入AFB1肉仔鸡生长性能及血清蛋白水平的影响验证体外试验结果。【方法】（1）pH为2.0、6.0、8.0的磷酸盐缓冲溶液（PBS溶液）、人工胃液和人工肠液环境下吸附剂对AFB1的吸附能力;（2）吸附剂对AFB1的结合速率;（3）吸附剂结合AFB1形成的复合体的稳定性;（4）240只1日龄雄性AA肉仔鸡,随机分为8个处理,比较吸附剂对摄入AFB1肉仔鸡生长性能及血清蛋白水平的影响。【结果】（1）5种酸碱条件下吸附剂结合AFB1的能力大小顺序为B＞C＞A;（2）吸附剂B在10 min内对AFB1吸附率达到97.69 %,且60 min内一直处在96.03 %以上,而吸附剂A、C在60 min内对AFB1的吸附能力不稳定;（3）与吸附剂A、C相比较,体外条件下吸附剂B与AFB1形成的复合体解吸附率最低;（4）与基础组比较,AFB1组肉仔鸡采食量、体重增加显著下降,料重比显著增加（P＜0.05）,血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）水平均显著下降（P＜0.05）。3种吸附剂均能提高肉仔鸡生长性能,吸附剂B能显著改善摄入AFB1污染日粮（98.98 μg?kg-1）的肉仔鸡血清蛋白水平的降低,添加吸附剂A或C效果不显著。【结论】3种吸附剂对AFB1均有一定的吸附作用,吸附剂B的作用效果优于吸附剂A和吸附剂C。结果提示,将吸附剂B应用于被AFB1污染的家禽饲料中,与其它霉菌毒素管理措施相结合,能降低AFB1对肉仔鸡的危害。     

饲料中黄曲霉毒素B1和呕吐毒素生物法降解研究进展

黄曲霉毒素B1(AFB1)和呕吐毒素(DON)是由寄生曲霉、黄曲霉、镰刀菌等产生的次级代谢产物,广泛存在于受污染的饲料及其原料中,不仅给农业经济造成重大损失,也给动物的健康带来严重威胁。传统脱除AFB1和DON方法主要有物理法和化学法,但上述两种方法都具有局限性,而利用微生物脱毒方法安全、高效,绿色环保已成为目前研究的热点,且展现出良好的应用前景。文章对AFB1和DON的特点、危害和致毒机制以及生物脱毒方面的研究进展进行阐述。     

饲料中黄曲霉毒素B_1和呕吐毒素生物法降解研究进展

黄曲霉毒素B1(AFB_1)和呕吐毒素(DON)是由寄生曲霉、黄曲霉、镰刀菌等产生的次级代谢产物,广泛存在于受污染的饲料及其原料中,不仅给农业经济造成重大损失,也给动物的健康带来严重威胁。传统脱除AFB_1和DON方法主要有物理法和化学法,但上述两种方法都具有局限性,而利用微生物脱毒方法安全、高效,绿色环保已成为目前研究的热点,且展现出良好的应用前景。文章对AFB_1和DON的特点、危害和致毒机制以及生物脱毒方面的研究进展进行阐述。     

三种吸附剂对饲喂黄曲霉毒素B1泌乳初期至中期奶牛降低黄曲霉毒素M1的有效性

本试验旨在确定3种吸附剂Soils（SO,Novus国际公司）、NovasilPlus（NOV,美国安格公司）和试验采用结核菌-100（MTB,美国奥泰奇公司）分别添加在含黄曲霉毒素（AF）日粮中,对奶牛乳中AFM1的影响。采用3个重复的4×4拉丁方设计,选择12头平均泌乳天数为163d的泌乳初期至中期奶牛,依据胎次、体重和产奶量分组,不限量采食和饮水。在4个连续的7d,每个重复时期,母牛随机分组,饲喂4个日粮配制。日粮配制为：AF组（112肛gAFB1·kg饲料千物质M）、SO组：AF＋O．56％SO、NOV组：AF＋0．56％NOV和MTB组：AF＋0．56％MTB。在每个试验期的第6、7天收集奶样.结果表明,所有处理的采食量、产奶量、乳脂率、乳蛋白率和线性体细胞评分不受日粮配制的影响,4组平均分别为22．20kg·d、33．87kg·d^-1、3．78％、2．95％和1．60％。AF从饲料到牛奶的转化率4组分别为2．65％、1．48％、1．42％和2．52％,每天分泌到乳中的AFM。分别为66、37、35和63μg·d^-1。在含AF饲料中添加SO和NOV显著降低乳中AFM,浓度（SO组为45％,NOV组为48％）和AFM,的分泌（SO组为44％,NOV组为46％）。相反,MTB组对降低乳中AFM．浓度（4％）、AFM,分泌（5％）以及AF从饲料到乳的转化无效。结果表明,占日粮0．56％的SO组和NOV组对采食舍12μgAFB1·kg^-1日粮DM的母牛降低乳中AFM,浓度是有效的。     

凹凸棒土对黄曲霉毒素B1的吸附特性

凹凸棒土具有较大的比表面积,且储量丰富,价格便宜,可作为黄曲霉毒素B1( AFB1)的吸附剂.通过选择凹凸棒土对黄曲霉毒素B1的吸附热力学和动力学特性进行研究,得出其吸附为简单的单分子层优惠吸附,属于二级吸附过程.     

黄曲霉毒素B1检测与脱毒方法最新研究进展

食品和谷物中的黄曲霉毒素污染在全球范围内造成了严重的经济和健康问题.黄曲霉毒素B1(AFB1)具有极强的致突变性和毒性,并且对人类和牲畜均具有强致癌性.有关毒素的脱毒技术一直是国内外的一个研究热点,其中物理法、化学法和生物法脱毒是主要的脱毒方法.本文结合最新的研究成果,详细介绍了黄曲霉毒素B1的毒性及主要的检测方法,对...     

改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1吸附机理的研究

研究了改性蒙脱石对黄曲霉毒素了的等温吸附,以及赖氨酸、酸碱度、温度、离体肠管吸收及透析袋透析对其吸附的影响。结果表明,改性蒙脱石在pH2．0和pH8．0时对黄曲霉毒素B1的最大吸附量分别为598．8μg/g、682．4μg/g;赖氨酸含量为2．0mg／mL和4．0mg／mL时对吸附无影响I酸碱度在pH2．0至pH8．0及温度在20℃至60℃时对吸附无明显影响;改性蒙脱石可减少离体肠管对黄曲霉毒素B1的吸收率及黄曲霉毒素B1通过透析袋的透析率。改性蒙脱石对黄曲霉毒素B1可能以化学吸附为主鸡小肠对黄曲霉毒素B1存在主动吸收过程。     

不同植物精油对玉米黄曲霉毒素B1的脱毒效果研究

为了研究植物精油对玉米黄曲霉毒素B1的脱毒效果,本试验选用肉桂精油、山苍子精油、罗勒精油作为脱毒物质,采用酶联免疫法测定黄曲霉毒素B1含量,研究3种精油用量为60 mg/20 g,熏蒸30 d的脱毒效果;研究3种精油用量为60 mg/20 g时的最佳熏蒸天数;研究3种精油熏蒸30 d时的最佳精油用量。结果表明,肉桂精油、山苍子精油、罗勒精油均对玉米黄曲霉毒素B1有一定的脱毒效果,且熏蒸天数不同、精油用量不同脱毒效果有差异。     

饲料中黄曲霉毒素B_1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鲤鱼的联合毒性研究

为了探讨黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)两种真菌毒素单独或联合应用对水产养殖的影响,本试验选用鲤鱼270尾(体重为(18±0.1)g),均分为9组,每组设3个平行,2个平行组进行试验观察和统计,1个平行组作为试验过程中解剖检查用。试验采用二因素三水平设计,AFB1的含量分别为0、0.05和0.1mg·kg-1,DON的含量分别为0、1和5mg·kg-1。试验期为40d。每20d进行增重、体长、丰满系数的检测。试验结束时进行肝胰脏重/体重值、血清生化指标(碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP))检测以及肝胰脏、脾脏和肠道的组织学检查。试验结果表明:除1mg·kg-1DON组外,其他7个试验组鲤鱼的增重都明显受到抑制(P<0.05),但在体长、丰满系数等方面差异不显著(P>0.05)。生化指标中AST活性增加明显(P<0.05)。肝脏的病理变化为肝细胞变性、坏死;肠道为肠黏膜脱落、绒毛萎缩,而毒素对脾脏的影响较小。两种毒素联合作用后毒性具有一定的协同效应。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇和黄曲霉毒素B1单一及联合染毒对小鼠脑组织病理变化、抗氧化性能和紧密连接蛋白表达量的影响

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和黄曲霉毒素B₁(AFB₁)单一及联合染毒对小鼠脑组织病理变化、抗氧化性能和紧密连接蛋白mRNA表达量的影响。选取96只18日龄昆明系雄性小鼠,随机分为对照组、DON组、AFB₁组和AD组(DON+AFB₁组),每组分别灌服生理盐水、500 μg·kg^-1 DON、200 μg·kg^-1 AFB₁和200 μg·kg^-1 AFB₁+500 μg·kg^-1 DON,连续灌服45 d。分别于试验的第0、15、30、45天,每组随机选取6只小鼠,麻醉后处死,取脑组织观察病理变化,并检测脑组织氧化与抗氧化指标及紧密连接蛋白ZO-1和Occludin mRNA的表达量。结果显示,与对照组相比,DON组小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性显著下降(P<0.05),NO含量显著升高(P<0.05);AFB₁组小鼠脑组织中CAT活性显著下降(P<0.05);AD组脑组织总抗氧化能力(T-AOC)、CAT、SOD活性显著下降(P<0.05),丙二醛(MDA)和NO含量显著上升(P<0.05);各染毒组脑组织ZO-1和Occludin mRNA的表达量显著下降(P<0.05)。研究结果表明,DON与AFB₁单一及联合染毒均能造成小鼠脑组织不同程度的病理变化,降低抗氧化性能及紧密连接蛋白ZO-1和Occludin mRNA的表达量,且DON与AFB₁的联合毒性大于单一毒性。     

羧甲基壳聚糖-膨润土复合吸附剂对水中铊的吸附作用研究

以羧甲基壳聚糖和膨润土为原料,制备羧甲基壳聚糖-膨润土复合吸附剂,并将其用于对水中铊的吸附,研究了吸附时间、溶液pH值和温度等对铊吸附性能的影响.结果表明,羧甲基壳聚糖-膨润土复合吸附剂对废水中铊的吸附,随废水pH值升高而增大;当水温低于50℃时,升温对吸附有利,当水温高于50℃时,再进一步升温,会导致吸附剂对铊的平衡吸附量减小;吸附剂对铊的吸附容量与铊的浓度关系密切,当铊的初始浓度为100 mg/L,吸附平衡时铊的浓度为48.54 mg/L,对应的吸附容量为15.43mg/g.通过改变吸附剂的用量可以达到控制出水铊浓度的目的.     

黏细菌降解黄曲霉毒素B_1的产酶条件优化

本研究对一株具有降解黄曲霉毒素B1活性的黏细菌的产酶条件进行了优化。通过单因素实验和正交实验得到最优化的培养基以及培养条件。优化后的培养基为:酵母粉7 g/L、CaCl2.2H2O为1 g/L、MgSO4.7H2O为0.5 g/L、VB12为750μg/L;并确定其最佳培养条件为:初始pH 7.5、接种量20%、发酵时间50 h、发酵温度30℃。在上述最佳培养基和最佳发酵条件下,该菌株降解黄曲霉毒素B1的能力为78.2%。     

抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析

[目的]克隆构建黄曲霉毒素B1(AFB1)单链抗体(scFv)基因,并对其编码蛋白序列和结构进行分析预测,为scFv分子修饰改造及在免疫学检测中的应用提供参考依据.[方法]以抗AFB1单克隆抗体杂交瘤细胞株为原料,通过PCR扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),以(Gly4Ser)3为柔性接头(Linker)拼接构建抗AFB1 scFv基因,并采用在线生物信息学分析软件对其氨基酸序列、理化性质及蛋白结构进行分析预测.[结果]抗AFB1 scFv基因全长744 bp,编码248个氨基酸,分子量为26312.05 Da,理论等电点(pI)5.70,其二级结构中含有35个α-螺旋(占14.11%)、28个β-折叠(占11.29%)、85个延伸链(占34.28%)和100个随机卷曲(占40.32%),在三级结构中连接肽卷曲将VH和VL区域牵拉而相互靠近,形成典型的抗体结构——沟槽结构,是scFv的抗原结合区域.[结论]构建的抗AFB1 scFv其VH含有117个氨基酸、VL含有116个氨基酸,具备典型抗体结构——沟槽结构,能与抗原特异性结合.     

黄曲霉毒素B1间接竞争抑制ELISA定量分析法的建立和应用

以合成的黄曲霉毒Ｂ１（ＡＦＢ１）－Ｃ３－羧甲基肟－牛血清白蛋为免疫原,制备了高亲和力的多抗血清,建立了简便、灵敏的ＡＦＢ１间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ定量分析法。ＡＦ类似物Ｂ１,Ｂ２,Ｇ１,和Ｇ２与ＡＦＢ１抗体的相对交叉反应率分别为１００％,３．４％,９．１％和小于１．３％。本法测定ＡＦＢ１的线性检测范围为１２．５～２５０ｐｇ,批内和批间平均变异系数分别为５．３％和７．９％,大米和混合饲料中测定ＡＦＢ１     

黄曲霉毒素B1高效降解菌株的筛选鉴定及其降解

以香豆素为唯一碳源,利用微生物去毒法,初步筛选出32株生长良好的活性菌株,再添加AFB1标准品(菌液毒素终质量浓度2.5μg/m L),通过高效液相色谱(HPLC)检测AFB1降解率,结果显示,从鸡粪中分离并命名为F6的菌株高效降解黄曲霉毒素B1,降解率达83%。对菌株F6进行细胞形态及生理生化特性鉴定,初步判断为芽胞杆菌属,16S rRNA序列同源性比对分析,与蔬菜芽胞杆菌国际标准株ATCC700005(登录号NR043325.1)核苷酸同源性为99.3%,由此可确定,F6菌株为蔬菜芽胞杆菌,命名为Bacillus oleronius GX01(登录号KP297896)。分离菌株F6发酵液各组分,检测得上清液AFB1降解率达83%,而菌悬液、胞内液的AFB1分别仅为22.8%、17.4%,初步鉴定其降解活性成分可能为胞外酶。     

利用DONtest-HPLC检测小麦镰刀菌毒素DON含量的差异

以2003年长江中下游地区赤霉病大流行后收获的8个不同抗、感赤霉病小麦为材料,探讨DONtest HPLC在低毒素小麦选育中的利用价值,并揭示不同抗性小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)含量的差异特点。研究结果表明,本方法具有快速、准确的特点,平均回收率达78.2%;不同抗性品种DON含量差异明显,3个抗病品种中望水白含量最低,3个中抗类型中扬麦158最低。高产毒素镰刀菌菌株接种鉴定结果进一步证实了这种差异。研究结果还表明,2003年江苏4个地区12份样本均受到不同程度污染,DON变幅为0.175～7.239mg·kg-1。自然发病条件下,病粒率与DON含量存在显著相关性,可以作为毒素选择的间接指标。