云南三七根腐病病原细菌的鉴定

[目的]明确云南三七根腐病致病细菌的种属,为三七根腐病的综合防治提供科学依据.[方法]从云南省不同三七种植区采集三七根腐病植株,采用组织分离法进行病原细菌分离,通过柯赫氏法则验证病原菌的致病性,利用形态学、生理生化与基因序列分析相结合的方法明确病原细菌的分类学地位.[结果]采用组织分离法从发生三七根腐病的块根中共分离到200多株细菌,经室内组培离体筛选得到10株细菌能引起三七块根腐烂,其中1株细菌MA9对健康三七切伤组织的致病力最强,选取该株细菌进行后续研究.健康三七块根离体接种MA9菌液9 d后出现菌脓,块根开始腐烂变黑、变软,并伴随有恶臭味.将MA9菌株摇瓶发酵制备成OD600约0.5的菌悬液灌根接种到温室和田间健康三七植株上,均表现出与田间病株一致的症状:最初在芦头与芽基结合处出现褐色水渍状病变,随着病变不断扩展最终导致三七地下块根顶芽腐烂和地上部植株死亡.在田间接种后发病的三七块根重新分离到该病原细菌.利用Biolog微生物鉴定系统和16S rDNA序列比对结果均显示MA9菌株与产吲哚金黄杆菌(Chryseobacterium indolo-qenes)为同一种属.[结论]引起云南三七根腐病的致病细菌为产吲哚金黄杆菌.这是国内首次报道该菌能引起三七根腐病.     

三七根腐病病原研究

【目的】三七根腐病是三七的重要病害，是限制三七种植业发展的严重障碍。【方法】在田间进行系统的三七根腐病害观察、调查和采样；在室内进行病原分离、鉴定和室内致病性测定，并进行田间人工接种试验。【结果】发现三七根腐病的主要症状表现有黄腐型、干裂型、髓烂型、急性青枯型、湿腐型和茎基干枯型等，但以黄腐型和急性青枯型较为常见，其中干裂型、髓烂型和茎基干枯型是新发现的三七根腐病症状表现。分离和鉴定结果表明，引起三七根腐病的病原真菌类群主要包括Cylindrocarpon destructans、C. didynum、Fusarium solani、F. oxysporum、Phytophthora cactorum、Phoma herbarum、Rhizoctonia solani等。室内致病性测定结果表明C. didynum、C. destructans、P. cactorum、P. herbarum和R. solani均能导致块根不同程度的腐烂。田间人工接种以P. cactorum和P. herbarum的致病性较强，发病率分别为48.4%和50.0%。C. destructans和C. didynum的致病力虽然较弱（C. destructans为23.5%，两株C. didynum分别为28.0%和15.2%），但在田间分布范围广，分离频率高（Cylindrocarpon属真菌最高组织分离频率为100%），且可导致典型的黄腐型症状。【结论】C. destructans和C. didynum是田间三七根腐病的重要病原真菌。     

三七根腐病复合侵染中病原细菌的研究

 三七根腐病复合侵染中病原细菌从根部侵入,引起根腐,叶片褪绿变黄或青枯,病菌随病残体、土壤和种苗传播.病菌在金氏B培养基上菌落圆形,灰白色,略凸起,边缘整齐,半透明,湿润光滑,不产生荧光色素,菌体杆状,直或稍弯,革兰氏染色阴性,具1-6根极生鞭毛.     

文山三七根腐病病原真菌的鉴定与药剂防治

从云南文山三七药材基地感染根腐病的三七组织获得分离物,并对其进行培养和纯化,并运用科赫法则（Koch’s Postulate）进行病原菌回接感染,得3株致病明显的菌株,后对此菌株进行生物学和18S-rDNA全序列分析鉴定及室内药效防治。结果表明,此3株菌分别是尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,茄病镰刀菌（Fusarium solani）和链格孢菌（Alternaria alternata）。甲基硫菌灵、根康、多菌灵对茄孢镰孢菌、尖镰孢菌的抑菌效果最好,腐霉利、甲基硫菌灵对链格孢菌的抑菌效果最好。该研究可为尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌和链格孢菌引起的三七根腐病的防治提供参考。     

当归根腐病的病原初步研究

 从当归根腐病植株根部分离到丝核菌(Rhizoctonia sp.)、南方根结线虫（Meloidgyne incognita）和丁香假单胞杆菌(Pseudomonas syringae )。为明确这些分离物在当归根腐病病害系统中的作用,分别进行了单一接种、两两混合接种及先后接种的方式来鉴定其致病性。结果表明,无论是采用何种接种方式,包含有丝核菌的接种体均没有导致当归湿腐症状;南方根结线虫和丁香假单胞杆菌同时混合接种发病率为48%,先接种南方根结线虫,后接丁香假单胞杆菌致病性最强,发病率为81%;而且,包含线虫接种体的混合接种与不含线虫接种体的接种,其致病性有明显差异,说明南方根结线虫在当归根腐病病害系统中是关键因子。     

三七根腐病及生物防治研究进展

三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen]根腐病是当前三七病害中最严重的一种,也是影响三七产业化发展的重要原因.目前针对三七根腐病的研究主要集中在探究病原菌、栽培及管理措施对三七根腐病发生的影响、三七根际微生态和三七根腐病生物防治等方面,但大多是从单一影响因素进行研究,目标性和针对性不强....     

三七根腐病中线虫病原问题的研究

 1989年至1991年,对云南省文山州的文山、砚山、马关、富宁及昆明市晋宁县的三七根腐病病根及根际土壤进行了广泛地调查与采集。分离所得线虫经纯化、鉴定、扩大培养,接种三七根,观察其致病性。结果表明:在文山州未采集鉴定到茎线虫(Ditylenchussp.)和根结线虫(Meloidogyne sp.).说明目前这两种线虫不是文山州三七根腐病病原,过去有关报道有误。经常能大量分离、鉴定到小杆线虫(Rhabditis elegans).活体接种不能侵染三七植株,离体接种对三七根切片表现侵染能力,加快其腐烂速度与腐烂程度,说明在三七根腐病中小杆线虫能起促进根腐作用。     

三七根腐病发生与生态因子的关系

三七根腐病的发生与海拔、地势、三七种植制度、土壤类型、前作种类、荫棚透光率等多种因子有关。调查说明：三七根腐病是典型的土传性病害；除温、湿条件外，各生态因子对根腐病的发生也起着制约或促进作用。     

三七根腐病研究进展

\t\t\t\t\t目的\t\t\t\t\t明确臭氧处理连作土壤后对三七出苗和生长的影响,以及对三七自毒皂苷的降解和对根腐病菌的抑制作用。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t方法\t\t\t\t\t用不同质量浓度的臭氧水处理三七连作土壤,调查不同处理对三七种子出苗和农艺性状的影响;用高效液相色谱法研究臭氧对自毒皂苷R₁、Rg₁、Re、Rd和Rg₂的降解作用;用平板计数法研究臭氧对主要根腐病菌茄腐镰刀菌(Fusarium solani)和毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destructans)的杀灭作用。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结果\t\t\t\t\t利用0.3~0.6 mg/L臭氧水处理连作土可显著提高三七种子的出苗率和生长势,但不同质量浓度及水量的处理间三七幼苗的株高、整株鲜重和地下部干重等农艺性状指标不存在显著差异。臭氧可以降解三七连作土壤中主要的皂苷类自毒物质,抑制引起三七根腐病的主要病原菌茄腐镰刀菌和毁灭柱孢菌的生长。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结论\t\t\t\t\t臭氧处理可以通过降解自毒皂苷抑制三七主要根腐病菌,从而促进连作土壤中三七的出苗和生长。\t\t\t\t     

连作地土壤处理对三七根腐病的控制效果

探索三七连作地根腐病控制技术。应用现有农药按一定比例组配,对连作土壤和三七种苗进行盆栽和田间试验。复配剂Ⅱ型盆栽处理、田间试验和大田示范对三七苗期根腐病的控制效果分别达到80.68%、80.42%和62.28%。复配剂Ⅱ型处理连作土壤对三七苗期根腐病有明显的控制效果。     

三七花粉生活力测定研究

[目的]克服三七育种工作带来的困难,解决目前生产中存在的问题,培育高产、优质、高抗的三七品种。[方法]以盆栽三七为试验材料,采用花粉离体萌发法,对自然生长的三七花粉生活力进行测定研究,了解三七花粉在自然条件下的寿命。[结果]结果表明,三七初花期花粉萌发率较高,在恒温25℃条件下,0.6%琼脂+10.0%蔗糖+0.1%硼酸的培养基有利于花粉的萌发和花粉管的生长,低温(4℃)条件下可进行短期的花粉贮藏,延长花粉的寿命。[结论]该研究为三七优良种质资源的保存和人工育种工作提供了理论依据。     

文山三七三种病原真菌的分离、鉴定及其体外生长速率的研究

[目的]分离、鉴定文山三七根腐病、黑斑病和圆斑病的主要病原真菌,并探明其体外生长速率。[方法]用马铃薯葡聚糖琼脂培养基分离、纯化病原真菌,以真菌体外培养时的菌落形态和回接试验中的病兆特征和再分离真菌的菌落形态进行形态鉴定,以真菌ITS序列扩增与比对进行分子鉴定,用体外培养时病原真菌菌落直径和厚度的增加速率来表征其生长速率。[结果]文山三七根腐病、黑斑病和圆斑病的主要病原真菌分别为双孢柱孢、人参链格孢和槭菌刺孢。体外培养时,双孢柱孢菌落的直径和厚度增大最快,其次为人参链格孢的,槭菌刺孢的则最慢;在同一培养时间,不同真菌的菌落直径、厚度间的各自差异仅达到显著水平。[结论]文山三七根腐病、黑斑病和圆斑病的主要病原真菌分别为双孢柱孢、人参链格孢和槭菌刺孢,当三种病害同时发生时,根腐病将蔓延最快,黑斑病次之,圆斑病则最慢。     

国槐根茎腐烂病病原菌的形态与分子鉴定

为了确定引起国槐根茎腐烂病的病原菌种类,以国槐(Sophora japonica Linn.)典型根茎腐烂病病株为试材,采用组织分离法获得纯菌株,并对所得菌株进行致病性测定、形态学鉴定及rDNA-ITS序列分析,研究了国槐根茎腐烂病的病原菌种类。根据24个菌株的培养性状和形态特征,鉴定所分离菌株均为镰刀菌。致病性测定表明,24个菌株均能侵染寄主树皮组织使其腐烂变黑褐色。在Gen Bank序列数据库中,24个菌株的DNA序列分别与多隔镰刀菌(Fusarium decemcellulare)、层生镰刀菌(F.proliferatum)、木贼镰刀菌(F.equiseti)、F.keratoplasticum和腐皮镰刀菌(F.solani)的ITS序列同源性为99%~100%。     

三七的染色体核型分析

三七染色体的核型分析结果表明:体细胞染色体数目为2n=24,核型公式为K(2n)=2x=24=24 m,属于“1B”型,全部都属于中部着丝粒染色体,核型为对称型。     

三七根结线虫病病原研究

 报道三七的1种新病害:三七根结线虫病(Panax notogiseng Root-knot Nematode Disease,PRND).病害的典型症状:感染根结线虫的三七植株地上部发黄、矮化,重病株枯死;根系长了大量根结,根结上长有一些短须根.标本采自云南省晋宁县昆阳农场.用形态学,鉴别寄主试验、酯酶和苹果酸脱氢酶电泳等方法鉴定病原线虫为北方根结线虫(Meloidogyne hapla Chitwood,1949).三七根结线虫病和北方根结线虫危害三七在云南省发现属首次报道.     

花生根系腐解物对根腐镰刀菌和固氮菌的化感作用研究

[目的]研究花生根系腐解物对花生根腐镰刀菌36194和固氮菌14046的化感作用。[方法]采用培养箱培养的方法得到了不同连作年限的花生根系腐解物,灭菌后添加到花生根腐镰刀菌和固氮菌的培养基中,测定花生根系腐解物对二者生长的影响。[结果]花生根系腐解物对根腐镰刀菌菌丝的生长均有一定的化感促进作用,对固氮菌的生长有一定的化感抑制作用,且化感作用随添加浓度和连作年限的增加而增强。[结论]连作条件下花生根系残茬在土壤中的累积及其腐解物对土壤微生物的化感作用很可能是导致花生连作障碍的原因之一。