壳寡糖对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪肠道免疫钙敏感受体活性的影响

壳寡糖作为壳聚糖降解后的产物,具有抗氧化、提高免疫和抗菌的作用。本研究旨在探究日粮中添加壳寡糖对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪肠道免疫、钙敏感受体和NF-κB信号通路的影响。本次试验选取28日龄杜×长×大断奶仔猪40头,按双因素试验设计,随机分为4个处理:2个日粮处理(不添加或添加壳寡糖300μg/kg)和免疫应激(注射大肠杆菌LPS或生理盐水)。在试验第14天,腹部注射60μg/kg大肠杆菌LPS,以生理盐水为对照,2小时后进行颈静脉采血;在试验第21天时腹部注射80μg/kg大肠杆菌LPS,以生理盐水为对照,2小时后进行颈静脉采血并屠宰,采集空肠和回肠肠段测定肠道形态。试验结果表明,LPS处理显著降低了仔猪的日增重和日采食量(P0.05),破坏了空肠和回肠的肠道形态(P0.05),而日粮添加壳寡糖后可以有效缓解LPS所带来的肠道损伤。与LPS处理组相比,日粮添加壳寡糖可以显著降低血液及肠道的促炎性细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-8)浓度和基因表达量,提高抗炎性细胞因子基因表达量(P0.05)。在空白组和LPS组中加入壳寡糖后,可以提高小肠钙敏感受体和磷酸激酶Cβ2蛋白表达量(P0.05),在LPS处理组加入壳寡糖可以降低p-NF-κB p65、IKKα/β、IκB蛋白表达量(P0.05)。以上试验结果表明,在炎症刺激下,壳寡糖可以通过激活钙敏感受体的活性,抑制NF-κB信号通路来缓解肠道免疫反应。     

日粮中添加栀子花对LPS诱导免疫应激仔猪淋巴细胞中炎症蛋白表达的影响

选用体质量相近、日龄接近的21日龄杜长大健康仔猪24头,随机分为4组,每组6头。各组每头仔猪每日添加栀子花粉0.00,1.25,2.50,5.00 g,于饲养第10天的清晨用LPS腹腔注射致炎,注射后0,3,24 h采血分离血清和血液淋巴细胞。结果显示,添加栀子花粉显著降低仔猪的日增重及日采食量(P0.05)。注射LPS之前,添加栀子花各组NF-κB通路的P65和IκB蛋白表达量显著低于对照组(P0.05),磷酸化的P-P65和P-IκB蛋白表达量也显著低于对照组(P0.05);而在注射LPS之后,P65和IκB蛋白表达量与炎症组相比无显著性差异,添加栀子花组的IAP、IKB、磷酸化的P-P65和P-IκB蛋白表达量均显著低于炎症对照组(P0.05)。同时细胞因子发生相应变化,抗炎细胞因子IL-4和IL-10在添加栀子花组含量显著高于致炎对照组(P0.05),而添加高剂量栀子花组中的IL-1b、IL-6、IL-8、IL-12和IFN-γ在致炎后含量较炎症对照组显著降低(P0.05)。结果表明,栀子通过调节炎症通路蛋白表达,抑制炎症产生,并刺激抗炎细胞因子增加和促炎细胞因子减少,起到对LPS诱导仔猪免疫应激的保护作用,为栀子作为抗炎药物或添加剂的应用打下理论基础。     

褪黑素调节LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞炎性因子的表达及其机制

为探索褪黑素降低奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤的作用机制,分别用不同浓度的脂多糖(LPS)诱导奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)产生炎症反应,采用MTT法确定LPS的最佳致炎剂量,建立体外MAC-T炎症模型;采用ELISA检测褪黑素对LPS诱导MAC-T分泌TNF-α和IL-6、IL-8的影响;采用荧光定量PCR检测褪黑素对LPS诱导MAC-T Toll样受体信号通路关键因子,TLR4、NF-κB p50、NF-κB p65 mRNA表达量的影响。结果显示,5 mg/L LPS是诱导MAC-T炎症模型的最佳剂量,可极显著提高MAC-T培养液上清中TNF-α和IL-6、IL-8的含量(P0.05),而50μmol/L褪黑素可显著下调LPS诱导的MAC-T炎症因子TNF-α和IL-6、IL-8的蛋白表达(P0.05)。同时,TLR4/NF-κB信号通路关键因子NF-κB p50 mRNA的表达量也显著下调。表明褪黑素可能通过调节TLR4/NF-κB信号通路,影响LPS诱导的MAC-T炎症损伤反应。     

日粮添加金霉素对断奶仔猪肠道核因子NF-κB活化的影响

以72头平均体重(5.06±0.49)kg的21日龄杜×大×长断奶仔猪为研究对象,探讨了日粮添加金霉素对肠道核因子NF-κB活化的影响。结果表明,在断奶仔猪日粮中添加75和150mg/kg金霉素,日均采食量分别提高了3.62%和8.35%(P<0.05);腹泻率分别下降了22.10%和52.23%(P<0.01);血清中TNF-α水平下降了28.78%(P<0.05)和78.29%(P<0.01);IL-6水平下降了12.85%和83.40%(P<0.01);空肠黏膜中核因子NF-κB活性分别下降了41.57%(P<0.05)和91.01%(P<0.01);IκK-βmRNA表达分别下降了56.16%(P<0.05)和89.72%(P<0.01),显著提高空肠和回肠组织绒毛长度,显著降低隐窝深度。结果提示,日粮中金霉素可能通过调控肠道黏膜组织NF-κB抑制蛋白激酶IκK-βmRNA水平,抑制核因子NF-κB的活化和核移位,进而影响肠道炎症因子的表达,改善断奶仔猪肠道黏膜形态结构,提高采食量,降低腹泻率。     

丁酸钠对LPS刺激肉仔鸡肠道炎症反应的作用研究

本试验旨在研究肉鸡在LPS应激下添加丁酸钠对肠道炎症反应的影响。120只1日龄AA肉仔鸡随机分成2个处理组,对照组饲喂基础饲粮(未添加丁酸钠),试验组饲喂基础饲粮+1g/kg丁酸钠。在试验第16、18和20天时,各处理组一半试鸡皮下注射0.5g/kg体重大肠杆菌LPS。试验发现LPS刺激显著降低是绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度值(V/C值,P0.05),显著提高十二指肠隐窝深度(P0.01);添加丁酸钠显著提高十二指肠、空肠绒毛高度、V/C值和十二指肠隐窝深度(P0.05),对空肠隐窝深度无显著影响。LPS刺激显著提高空肠和回肠粘膜髓过氧化物酶(MPO)活性、细胞粘附分子1(ICAM-1)和NF-κB水平(P0.05),降低IGF-1含量。LPS刺激提高十二指肠粘膜白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达水平(P0.05)。添加丁酸钠降低十二指肠粘膜MPO活性和TNF-α基因表达水平,并降低十二指肠和空肠TNF-α基因表达水平(P0.05)。添加丁酸钠和LPS刺激对十二指肠粘膜MPO活性和ICAM-1水平具有交互作用(P0.05),对肠道组织形态和炎症因子没有影响。试验表明,添加丁酸钠可以改善肉仔鸡小肠形态结构和功能,并能降低LPS刺激引起的免疫应激,但不是通过激活NF-κB途经。     

复合植物精油对脂多糖诱导的断奶仔猪免疫应激的影响

试验旨在研究复合植物精油(OCT)对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪的免疫应激的影响。试验选取28日龄左右的杜×长×大三元杂交仔猪,随机分成3个处理组:对照组(基础日粮,注射生理盐水),LPS组(基础日粮,注射LPS),OCT组(基础日粮+50mg/kg OCT,注射LPS)。每组8个重复,每个重复1头猪。于试验第21天注射LPS(100μg/kg体重)或等体积的生理盐水,注射3h后前腔静脉采血进行白细胞分类计数;6h后屠宰,取胸腺、脾脏,-80℃保存,用于测量胸腺、脾脏免疫相关基因白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、核因子(NF-κB)以及转录相关基因转录激活因子3(STAT3)的基因相对表达量。结果表明:(1)与对照组相比,LPS刺激降低了仔猪血液中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞数量(P0.05);与LPS组相比,日粮中添加OCT提高了白细胞的数量(P0.05);(2)与对照组相比,LPS刺激上调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3mRNA水平(P0.05),下调了脾脏IL-4、TNF-α及胸腺IL-4、TNF-α、NF-κB mRNA水平(P0.05);与LPS组相比,添加OCT下调了脾脏、胸腺IL-6、STAT3mRNA水平(P0.05);上调了胸腺IL-4、IL-10、TNF-α、NF-κB的mRNA水平(P0.05)。综合上述结果,LPS诱导发生了仔猪免疫应激,OCT在一定程度具有缓解作用。     

牛膝多糖对仔猪肠上皮细胞免疫应激的调控及其作用机制

本试验旨在考察牛膝多糖(ABPS)对脂多糖(LPS)免疫应激下仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)促炎细胞因子分泌和表达的影响,并探讨ABPS调控IPEC-J2免疫应激可能的作用机制。选用4~5代的IPEC-J2,培养基中分别添加0(对照)、300、600、900、1 200μg/m L ABPS和10μg/m L LPS,每组12个重复,每孔为1个重复。培养72 h后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测ABPS对促炎细胞因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌量的影响,采用实时定量PCR测定Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)的mRNA表达量,采用Western blot法测定TLR4、NF-κB、磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB)蛋白表达量。结果显示:与对照组相比,300、600、900和1 200μg/m L ABPS组能显著减少IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的分泌量(P0.05);300μg/m L ABPS组能显著减少p-NF-κB蛋白的表达量(P0.05),900和1 200μg/m L ABPS组能显著减少TLR4、NF-κB的mRNA和NF-κB蛋白的表达量(P0.05)。由此可见,ABPS通过TLR4/NF-κB信号转导途径来调控促炎细胞因子的分泌,从而缓解免疫应激,低浓度ABPS通过直接抑制NF-κB磷酸化过程来降低免疫应激,高浓度ABPS则是通过抑制TLR4 mRNA、NF-κB mRNA和NF-κB蛋白的表达量来缓解免疫应激。     

刺五加多糖对脂多糖连续刺激的断奶仔猪肠黏膜炎症反应的影响

为了研究日粮中添加刺五加多糖(ASPS)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪肠黏膜炎症反应的影响,试验选择体重(7.98±0.04) kg的杜×长×大仔猪36头,随机分为3组(对照组、LPS组、ASPS组),每组4个重复,每个重复3头猪。对照组和LPS组饲喂基础日粮,ASPS组在基础日粮中添加800 mg/kg ASPS,于试验第15,18,21天时LPS组和ASPS组仔猪按体重腹腔注射100μg/kg LPS,对照组仔猪注射等量生理盐水,试验期为21 d。对仔猪外围血细胞分类计数并测定肠黏膜炎症细胞因子和肠黏膜肥大细胞数量。结果表明:与LPS组相比,ASPS组仔猪外周血白细胞和中性粒细胞数量显著减少(P0.05);肠黏膜抗炎因子IL-10水平显著提高(P0.05),IL-8水平降低;肠黏膜肥大细胞数量减少。说明日粮添加ASPS具有缓解LPS刺激的仔猪肠黏膜炎症反应的作用。     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪免疫应激和能量状况的影响

本研究旨在N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激仔猪肝脏免疫应激和能量状况的影响及其机理进行探讨.选取18头健康仔猪(杜洛克×长白×大白,体质量(11.58±0.26)kg),随机分成3个处理(对照组、LPS组和NAC组),每个处理6个重复,每个重复1头猪.对照组和LPS组饲喂基础日粮,NAC组饲喂基础日粮+500 mg·kg-1 NAC,LPS和NAC组仔猪分别于试验的第10、13、20天腹膜注射100 μg·kg-1 BW的LPS,对照组注射等量的灭菌生理盐水.第10、20天注射LPS后3h前腔静脉采血,第21天仔猪麻醉后进行屠宰,取肝脏样品待测.试验结果显示:(1)日粮中添加NAC显著缓解了LPS刺激导致的ADG降低(P＜0.05)和F/G的升高(P ＜0.05).(2)日粮中添加NAC缓解了LPS刺激导致的血浆、肝脏中TNF-α、IL-6和PGE2的升高(P＜0.05).(3)日粮中添加NAC缓解了LPS刺激导致的肝脏核因子-κB(NF-κB)和热休克蛋白70 (HSP70)蛋白表达量的升高(P＜0.05).(4)日粮中添加NAC缓解了LPS刺激导致的肝脏中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺昔(ADP)和能荷(EC)水平的降低(P＜0.05)及一磷酸腺苷(AMP)水平和AMP/ATP比值的升高(P＜0.05).由此可见,日粮中添加500 mg·kg-1 NAC可能通过缓解LPS导致的免疫应激和能量的过度损耗,促进仔猪生长.     

黄连水提物对LPS诱导的猪肠道上皮细胞IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达及NF-κB/MAPK信号通路的调控作用

为探讨中药黄连对LPS诱导的猪肠道上皮细胞炎性免疫反应及其信号通路的调控机制,以猪肠道上皮细胞IPEC-J2作为研究对象,MTT法检测不同质量浓度黄连水提物及LPS对猪肠道上皮细胞活性的影响。用0.1,0.5,5.0 g/L黄连水提物预处理猪肠道上皮细胞,再经LPS(5 mg/L)作用1 h后,Real-time PCR法检测促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-ɑmRNA的表达水平,并用Western blot法检测NF-κB/MAPK信号通道关键蛋白表达情况。结果显示,5 mg/L LPS可诱导猪肠道上皮细胞IL-1β、IL-6、TNF-ɑmRNA的表达水平极显著升高(P<0.01),而经黄连水提物预处理的猪肠道上皮细胞的相关炎性细胞因子的表达水平则出现下降,且与药物质量浓度呈正相关;LPS可有效激活猪肠道上皮细胞NF-κB/MAPK信号通路关键蛋白的磷酸化和表达,而黄连水提物则可有效降低细胞IκB、p-IκB、p65、p-p65、p-p38、JNK等蛋白的表达,达到抑制NF-κB/MAPK信号通路的传导和调控LPS诱导的猪肠道上皮细胞炎性反应的作用。结果表明,黄连水提物可通过抑制NF-κB/MAPK信号通路的活化及其下游促炎性细胞因子的表达,起到调控LPS诱导的猪肠道上皮细胞炎性反应的作用。     

香菇多糖对脂多糖刺激断奶仔猪肌肉组织炎症反应及蛋白质降解相关基因表达的影响

本试验的目的是探究香菇多糖(LNT)对脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪肌肉组织炎症反应及蛋白质降解相关基因表达的影响。试验选取24头体重(7.84±0.21) kg的健康三元杂交断奶仔猪,按照体重近似原则随机分为2组:对照组(12头)和香菇多糖组(12头)。对照组饲喂基础饲粮,香菇多糖组饲喂基础饲粮+0.02%香菇多糖。饲喂28 d后,每组选6头猪腹膜注射100μg/kg BW的LPS,剩下的6头则等量注射0.9%生理盐水,4 h后将仔猪麻醉、屠宰,取肌肉样品检测Toll样受体4(TLR4)、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)以及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)/叉头转录因子(FOXO)信号通路相关基因mRNA表达量。结果显示:1)注射LPS后,仔猪TLR4、骨髓分化因子88(MyD88)、NOD2、受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(RIPK2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在背最长肌和腓肠肌中的mRNA表达量均显著上调(P0.05),且核转录因子-κB(NF-κB)在腓肠肌中的mRNA表达量显著上调(P0.05)。而添加香菇多糖后,背最长肌中MyD88、TNF-α和腓肠肌中TLR4、RIPK2、NF-κB的mRNA表达量显著上调(P0.05)。2)注射LPS后,仔猪背最长肌和腓肠肌中FOXO1和肌肉环指蛋白1(MuRF1)的mRNA表达量显著上调(P0.05),Akt1的mRNA表达量显著下调(P0.05)。而添加香菇多糖后,腓肠肌中肌萎缩F-box(MAFbx)的mRNA表达量显著下调(P0.05)。以上结果表明,在断奶仔猪饲粮中添加0.02%香菇多糖可能在应激急性期通过进一步激活LPS刺激导致的断奶仔猪肌肉组织中的TLR4和NOD信号通路来加强机体免疫力,同时通过调节Akt/FOXO信号通路相关基因表达来减缓肌肉蛋白质的降解。     

黑沙蒿多糖对脂多糖刺激的免疫应激肉仔鸡十二指肠中免疫指标及相关基因和蛋白表达的影响

本试验旨在探讨黑沙蒿多糖(AOP)对脂多糖(LPS)刺激的免疫应激肉仔鸡十二指肠炎症的缓解作用及其可能的作用机制。试验选取192只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复8只鸡。试验期为42 d,分为预试期(第1～14天)、应激Ⅰ期(第15～28天,包括7 d的LPS注射期和7 d的恢复期)和应激Ⅱ期(第29～42天,包括7 d的LPS注射期和7 d的恢复期)。处理1和2饲喂基础饲粮,处理3和4饲喂试验饲粮(在基础饲粮中添加750 mg/kg AOP)。分别在应激Ⅰ期(试验第15、17、19、21天)和应激Ⅱ期(试验第29、31、33、35天)给处理1和3的肉仔鸡腹腔注射LPS溶液,处理2和4注射等量的生理盐水。在第21和35天,每个重复随机选取1只鸡,屠宰后迅速取十二指肠组织样品,用于测定免疫指标及其相关基因和蛋白表达量。结果表明:饲粮中添加AOP显著缓解了由LPS导致的肉仔鸡生长性能的下降;此外,饲粮添加AOP显著缓解了由LPS导致的肉仔鸡十二指肠中白细胞介素(IL)-1β(第21和35天)、IL-6(第21和35天)和IL-4(第21天)的过度产生(P0.05),且显著缓解了十二指肠中免疫球蛋白M(IgM,第21天)含量的过度下降(P0.05);同时,饲粮添加AOP显著缓解了由LPS导致的肉仔鸡十二指肠中核转录因子-κB p65(NF-κB p65)(第35天)和IL-1β(第21天)基因以及NF-κB信号通路相关蛋白(NF-κB p65、IL-1β和IL-6,第21和35天)的过表达(P0.05),且显著促进了核转录因子-κB的抑制物α(IκBα)(第21和35天)的蛋白表达(P0.05)。由此推测,AOP可通过抑制NF-κB信号通路的过度激活来缓解LPS导致的肉仔鸡十二指肠中促炎因子的过度释放。     

漏芦通过TLR4/NF-κB通路抑制脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞炎症反应

为探讨漏芦醇提物（RUEE）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠乳腺上皮细胞（HC11细胞）的抗炎作用及机制,试验利用RUEE(80μg/mL)、LPS(1μg/mL)单独处理以及RUEE(80μg/mL)+LPS(1μg/mL)共处理HC11细胞,采用荧光定量PCR检测炎性细胞因子及Toll样受体4(TLR4)mRNA表达水平,采用Western blotting检测核转录因子κB(NF-κB)通路关键因子的蛋白表达量。结果表明：LPS诱导可明显提高HC11细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达水平（P<0.05）;明显上调TLR4 mRNA表达及NF-κB p65和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的磷酸化水平（P<0.05）。RUEE预处理可显著降低LPS诱导的HC11细胞TNF-α、COX-2、IL-6、IL-1β的mRNA表达（P<0.05）;显著下调TLR4 mRNA表达及NF-κB p65和IκBα的磷酸化水平（P<0.05）。由此可知漏芦醇提物可通过抑制TLR...     

壳寡糖对奶牛外周血单个核细胞抗氧化功能的促进作用

本试验以奶牛外周血单个核细胞(PBMC)为模型,旨在研究不同剂量壳寡糖(COS)对细胞活力、抗氧化功能和炎症因子含量的影响。采用单因素随机试验设计,将体外分离得到的PBMC随机分为5组,每组6个重复,对照组(CON组)细胞培养液中不添加COS;COS40、COS80、COS160和COS320组在细胞培养液中分别添加40、80、160和320μg/mL的COS,在培养箱中培养48 h。结果表明:体外添加COS对PBMC抗氧化功能的促进效果呈剂量效应,可增强抗氧化酶如硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,其中以160μg/mL的COS具有较好的效果。COS可抑制炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的产生,降低诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性与一氧化氮(NO)的含量,并呈现剂量依赖性,以160μg/mL COS具有较强的抑制作用,而320μg/mL COS的抑制作用减弱。体外添加COS抑制了核因子-κB(NF-κB)p 50和NF-κB p 65的基因表达,并且呈现剂量依赖性。综上可知,COS可通过抑制NF-κB信号通路活性降低iNOS与炎症因子的基因表达以及NO的生成,进而提高PBMC的抗氧化功能。     

脂多糖诱导的肠屏障蛋白及其信号通路研究进展

脂多糖(LPS)是诱导肠黏膜损伤的应激源之一,其不仅可损伤肠道,还会引发细菌移位,损伤的胃肠道屏障会造成肠道紧密连接蛋白异常表达,使得内毒素、病原体等得以穿过肠壁,诱导活化细胞表面Toll样受体4(TLR4)激发下游的核因子-κB(NF-κB)信号通路,并合成释放细胞炎性因子,继而加重肠道的损伤。本文就LPS在诱导炎症反应发生的作用以及其潜在作用作一综述。     

锌指蛋白A20介导锌缓解鸡肠上皮细胞炎症反应的机制

本研究通过对鸡肠上皮细胞感染锌指蛋白A20基因siRNA病毒和A20基因腺病毒,探究锌与A20基因对缓解脂多糖(LPS)诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应的作用。结果表明:LPS可显著上调鸡肠上皮细胞促炎因子白细胞介素(IL)-1β和IL-8的基因表达水平(P<0.05),作用的最佳剂量和时间分别是10 ng/mL和6 h。体外添加25μmol/L锌可显著缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达水平和蛋白产量的提高以及Toll样受体4(TLR4)的转录激活。肠上皮细胞感染A20基因siRNA病毒后,A20的蛋白产量显著下调(P<0.05),IL-1β、IL-8和TNF-α的基因表达水平和蛋白产量显著升高(P<0.05),同时加剧LPS诱导的IL-8、IL-1β基因表达水平和IL-1β、TNF-α蛋白产量的提高(P <0. 05)。相对于对照组,加锌可促进胞浆中A20和核因子-κB(NF-κB) p65的蛋白表达,并下调磷酸化NF-κB p65的蛋白表达;在进行A20基因沉默后,导致胞浆中A20、NF-κB p65蛋白表达下调和磷酸化NF-κB p65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达上调以及胞核中磷酸化NF-κB p65的蛋白表达升高,而加锌并不能改善。与感染空白腺病毒组相比,肠上皮细胞感染A20腺病毒可极显著提高A20的基因表达水平(P<0.01),并极显著降低IL-1β、IL-8的基因表达水平(P<0.01),且可极显著降低添加LPS导致的IL-1β、IL-8和TLR4基因表达水平的上升(P <0. 01)。锌添加可显著降低IL-1β的基因表达水平,显著提高NF-κB p65的基因表达水平(P<0.05)。综上所述,锌可通过A20-NF-κB p65信号通路缓解LPS诱导的鸡肠上皮细胞炎症反应。     

谷氨酰胺干预断奶仔猪肠道黏膜受损中免疫能力的作用

本试验旨在研究日粮中添加谷氨酰胺(Gln)对大肠杆菌型脂多糖(LPS)诱导肠道黏膜损伤后断奶仔猪免疫性能的影响。选取28日龄健康断奶仔猪24头,随机分为3组,每组8个重复。其中,空白对照组和LPS组饲喂常规基础日粮,Gln组饲喂添加1%谷氨酰胺的基础日粮。试验期30d,于试验期第22、25、28、30天对LPS组和Gln组腹腔注射LPS(按体重以100μg·kg-1给予),空白对照组腹腔注射等体积的无菌生理盐水。第30天对仔猪进行前腔静脉采血并屠宰采取所需样品,检测血清中免疫球蛋白、相关炎症因子浓度及各肠段中这些炎症因子基因的表达丰度。与空白对照组相比,LPS组和Gln组血清IgM水平显著提高40.00%和62.86%(P0.05);LPS组血清IL-8含量显著提高7.11%(P0.05),而Gln组则无明显变化。不论在LPS攻毒前还是攻毒后,日粮添加Gln均可显著提高仔猪血清IL-17含量(P0.05)。与空白对照组相比,LPS组和Gln组十二指肠中IL-8mRNA表达水平显著降低了35.06%和44.16%(P0.05)。对于IL-12βmRNA的表达水平,在空肠和回肠中Gln组中的表达水平较LPS组高,但在十二指肠中有所降低(P0.05)。在十二指肠与空肠中,IL-17αmRNA的表达丰度在三组间存在差异(P0.05),特别是在十二指肠和回肠中,Gln组的表达丰度达到最高;LPS组和Gln组空肠中IL-17αmRNA相对表达量显著降低58.16%和56.07%(P0.05)。结果提示,日粮中添加1%的谷氨酰胺能够在一定程度上改善LPS诱导肠道损伤后断奶仔猪的免疫力,减轻应激反应造成的机体损伤。     

壳寡糖通过抑制白细胞介素-1β的生物学活性减缓由脂多糖诱导的奶牛外周血单个核细胞氧化应激损伤

本试验以脂多糖(LPS)为刺激源,利用白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)阻断白细胞介素-1β(IL-1β)的生物学活性,探讨壳寡糖(COS)对LPS诱导的奶牛外周血单个核细胞(PBMC)氧化应激损伤的减缓作用。采用单因素完全随机试验设计,将PBMC随机分为8个组,分别为对照组(在不含COS、LPS和IL-1ra的基础培养基中培养72 h)、COS组(在仅含COS的培养基中培养72 h)、LPS组(在基础培养基中先培养48 h,再加入LPS培养24 h)、IL-1ra组(在基础培养基中先培养42 h,再加入IL-1ra培养30 h)、COS+IL-1ra组(在含有COS的培养基中先培养42 h,再加入IL-1ra培养30 h)、COS+LPS组(在含有COS的培养基中先培养48 h,再加入LPS培养24 h)、IL-1ra+LPS组(在基础培养基中先培养42 h,然后加入IL-1ra再培养6 h,最后加入LPS再培养24 h)和COS+IL-1ra+LPS组(在含有COS的培养基中先培养42 h,然后加入IL-1ra再培养6 h,最后加入LPS再培养24 h),每组6个重复。结果显示:与对照组相比,LPS组抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和硫氧化蛋白还原酶(TrxR)的活性与总抗氧化能力(T-AOC)以及GPx1和TrxR的mRNA相对表达量显著下降(P≤0.05),而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,炎症因子IL-1β、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量及其mRNA相对表达量,核因子-κB(NF-κB)p65的mRNA相对表达量、一氧化氮(NO)与丙二醛(MDA)含量、活性氧簇(ROS)活性均显著升高(P≤0.05),说明LPS诱导的奶牛PBMC氧化应激损伤是由于其激活了NF-κB信号通路,导致炎症因子IL-1β的释放以及iNOS活性和NO含量的增加造成的。与LPS组相比,LPS+IL-1ra组和LPS+COS组的上述抗氧化酶活性及GPx1和TrxR的mRNA相对表达量显著升高(P≤0.05),而上述炎症因子的含量及其mRNA相对表达量以及NF-κB p65的mRNA相对表达量显著降低(P≤0.05),说明IL-1ra和COS对LPS诱导的奶牛PBMC氧化应激损伤具有相似的预防作用。综上可知,COS通过抑制IL-1β的生物学活性减缓LPS诱导的奶牛PBMC氧化应激损伤,这可能与COS抑制NF-κB信号通路的活性,进而降低IL-1β的释放及NO的生成有关。     

高精料日粮对奶山羊乳腺组织NOD1炎性信号通路的影响

本试验旨在研究高精料日粮对奶山羊乳腺组织NOD1炎性信号通路的影响与调控。选取18头泌乳中期的健康萨能奶山羊,试验前分别安装瘤胃瘘管和乳静脉血管插管,随机分成3组:饲喂精粗比为4∶6的低精料日粮作为对照组(LC);饲喂精粗比为6∶4的高精料日粮作为处理组(HC);饲喂高精料日粮并添加丁酸钠作为调控组(BHC),试验时间为20周。试验结束后采集瘤胃液、乳静脉血和乳腺组织样品用于后续的瘤胃pH值、乳静脉血中炎性因子浓度、乳腺组织中炎症相关基因m RNA和蛋白水平的检测。结果显示:一天内HC组的瘤胃pH值小于5.8持续4 h且显著低于LC组,表明亚急性瘤胃酸中毒(SARA)诱导成功;饲喂4 h后BHC组瘤胃pH值显著高于HC组而与LC组差异不显著,表明丁酸钠能够缓解瘤胃pH的持续降低。HC组乳静脉血中炎性细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度显著高于LC组,而BHC组的炎性细胞因子溶度显著低于HC组并与LC组无显著差异;与LC组和BHC组相比,HC组奶山羊乳腺组织炎症相关基因NOD1、RIP2、NF-κB、IL-1β、IL-6的表达量显著上调;NOD1、NF-κBp65、NF-κBpp65的蛋白表达水平和m RNA水平变化一致。结果表明,长期饲喂高精料日粮能够激活奶山羊乳腺组织的NOD1-NF-κB炎性信号通路,诱导乳腺炎症应答,日粮中添加丁酸钠可以一定程度地缓解乳腺组织的炎症反应。     

α-倒捻子素通过抑制TLR4/NF-κB信号通路缓解LPS诱导IEC-6细胞的炎症

旨在证明α-倒捻子素可以缓解脂多糖(LPS)诱导的IEC-6细胞的炎症并揭示其机制。笔者在体外培养的IEC-6细胞中构建LPS诱导的炎症模型,并通过流式细胞术、酶联免疫吸附测定(ELISA)、定量PCR(Q-PCR)、蛋白印迹(Western blot)的方法检测α-倒捻子素对LPS诱导的炎症是否有缓解作用。结果表明,5μmol·L-1的α-倒捻子素预处理可以显著降低LPS诱导的前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在IEC-6细胞中的分泌,以及环氧合酶2(COX-2)、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA的表达(P<0.05)。通过对炎症相关信号通路NF-κB的探究可见,α-倒捻子素能显著抑制Toll样受体4(TLR4)mRNA和NF-κB相关蛋白磷酸化IκBα(pIκBα)和磷酸化p65(pp65)的激活(P<0.05)。综上所述,α-倒捻子素可以通过TLR4/NF-κB信号通路来抑制LPS诱导的IEC-6细胞的炎症,并且可能是治疗炎症疾病的潜在选择。