粗茶多酚中的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的提取方法研究

从溶剂的选择和混合试剂提取物等方面,对茶多酚粗品中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的提取进行了研究。结果表明:采用正丁醇提取的产品中,EGCG含量最高,纯度达到41.00%,较甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等提取物相比,其含量提高了2倍以上。在此基础上进行了混合溶剂提取试验,结果显示:以正丁醇∶石油醚为1∶2时,提取物中EGCG含量最高,达到了70.30%。     

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）生物活性研究进展

综述近年来国内外有关EGCG生物活性的研究进展,着重阐述EGCG在抗氧化、保护神经系统、抗肿瘤及保护心脑血管方面的活性,综述其在免疫、内分泌和代谢酶抑制方面的研究成果,展望这一研究领域的发展前景和发展方向,期望为茶多酚类物质深入研究及产品开发提供思路。     

甲基化EGCG的合成及其在人工模拟胃肠液中的稳定性

以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为原料,用硫酸二甲酯对其进行部分甲基化.甲基化产物经乙酸乙酯萃取,再经硅胶柱、凝胶柱和反相硅胶柱分离得到EGCG的甲基化衍生物,再经ESI-MS,MS/MS和1HNMR鉴定.利用高效液相色谱技术测定分离到的甲基化EGCG和EGCG在人工模拟体胃液与肠液中的变化.结果表明,该体系合成甲基化EGCG的最佳务件是:硫酸二甲基酯与EGCG的摩尔比1∶1,在60℃水浴条件下回流反应5h.通过分离,最后得到纯度为93.86%的单甲基化产物242 mg,得率约为9%,经鉴定其结构为EGCG4"Me.在人工模拟胃液中,EGCG4"Me脱去甲基,生成EGCG,起到缓释作用;而在人工模拟肠液中,EGCG4"Me由于甲基化,稳定性提高.     

诱导提高茶树EGCG含量过程对鲜叶品质生化成分的影响

以福鼎大白茶、铁观音品种为材料,系统研究了诱导提高茶树表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量过程对鲜叶主要品质生化成分的影响.结果表明:诱导显著提高了茶树鲜叶茶多酚、可溶性糖含量,降低粗纤维含量,而对咖啡碱、氨基酸、叶绿素等生化成分含量影响不大.     

EGCG对水牛卵母细胞体外成熟的影响

[目的]探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对水牛卵母细胞体外成熟质量与早期胚胎发育能力的影响,为优化水牛体外胚胎生产体系及提高其体外胚胎生产效率提供参考.[方法]在水牛卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度的EGCG,以排出第一极体为细胞核成熟标志,观察卵母细胞核成熟情况,检测MⅡ期卵母细胞内活性氧(ROS)和谷胱甘肽(GSH)含量,并统计经孤雌激活及体外受精后早期胚胎的发育情况.[结果]在体外成熟液中添加10~20 μmol/L EGCG有利于水牛卵母细胞体外成熟过程中卵丘扩展,卵丘扩展指数(CEI)分别为2.49%和2.42%,卵母细胞成熟率(59.31%和50.98%)显著高于未添加EGCG的CK组(P<0.05,下同),MⅡ期卵母细胞的GSH含量(3.21和3.25 pmol/枚)也显著高于CK组;添加20~30 μmol/L EGCG可显著降低水牛MⅡ期卵母细胞的ROS水平.以体外成熟培养获得的水牛MⅡ期卵母细胞分别进行孤雌激活及体外受精,结果发现以在体外成熟液中添加10μmol/LEGCG的效果最佳,其对应的卵裂率和囊胚发育率均显著高于CK组.[结论]EGCG可用于优化水牛卵母细胞体外成熟体系,能有效提高卵母细胞的成熟率和体外发育潜力,且以水牛体外成熟液中添加10μmol/LEGCG的效果最佳.     

绿茶910 EGCG的提取工艺

以绿茶910为原料,采用咖啡碱沉淀—溶剂萃取法对茶叶表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)进行提取,运用二次回归正交旋转组合设计方法分析各影响因子对EGCG提取纯度的影响.结果表明,各因子对EGCG提取纯度影响程度的大小为:氯仿萃取次数>乙酸丙酯萃取次数>水浸提温度>咖啡碱浓度>己酸乙酯萃取次数.EGCG提取的最佳条件为:水浸提温度80℃,咖啡碱浓度30 mmol.L-1,氯仿萃取次数为5,己酸乙酯、乙酸丙酯萃取次数均为3.根据最佳条件提取EGCG,得到纯度为80.3%的EGCG产品.     

分离制备儿茶素及EGCG的研究进展

综述分离制备儿茶素和儿茶素单体表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的研究进展,探讨各种纯化、分离方法的机理和优缺点,并展望了儿茶素和EGCG分离制备的前景。     

茶叶中EGCG泡腾片制备工艺研究

[目的]研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)泡腾片的制备工艺.[方法]将各种原料在50℃条件下干燥不同时间,考察压片粘冲程度;采用正交试验确定茶叶中EGCG泡腾片最优配方.[结果]干燥150 min后,压片无粘冲,出片顺利.EGCG泡腾片的最佳配方为:EGCG 4％、柠檬酸和碳酸钠总量45％、柠檬酸:碳酸钠为1.6:1、乳糖20％、L-亮氨酸4％、甜蜜素4％、橙粉23％.[结论]用该配方制作的泡腾片,压片无粘冲,泡腾效果好,口感好.     

Cu2+与EGCG络合作用的研究

铜离子容易接受配体,成为中心离子,茶儿茶素EGCG是茶多酚中活性最强的天然活性物质,可作为多基配体与Cu2+发生络合反应.本试验在化学体系中研究了EGCG与Cu2+形成络合物的条件,其形成条件主要受pH值和Cu2+/EGCG比率的影响:在pH≤4.0时,即在强酸性条件下,EGCG与Cu2+很难形成络合物;pH＞4.0时,EGCG与Cu2+可以形成络合物;pH＞9.0时,酚羟基与碱作用生成酚钠,有铜离子存在时,Cu2+可充当催化剂,促进EGCG自氧化,Cu 2+被还原为Cu+.在pH=6.0的乙酸缓冲液中,Cu2+与EGCG以2:1结合的;在pH=7.4的硼酸缓冲液中,Cu2+与EGCG以1:1络合,当两者比例≥4:1时,两者发生的是氧化还原反应,Cu2+会促进EGCG的氧化.     

HPLC-DAD 测定不同时期安吉白茶中EGCG 的含量

文章采用HPLC-DAD 对不同时期安吉白茶叶中的表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的含量 变化进行分析。采用AgilentC18 色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相：甲醇︰水（2% 乙酸）15︰85; 流速：1.0 ml/min;检测波长：276 nm;柱温：35℃。结果是EGCG 线性范围为0.304～3.040μg,相关系数 R2=0.999 9,平均回收率100.21%,RSD 为1.04%。该方法精密度、准确度好,稳定性高,能简便、快速。     

茶叶提取物EGCG和GCG及ECG对B16细胞内黑色素生成的抑制作用

为研究茶叶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechingallate,GCG)和表儿茶素没食子酸酯(epicatechingallate,ECG)对体外培养B16小鼠黑色素瘤细胞黑色素生成及酪氨酸酶活性的影响,分别用不同浓度的EGCG、GCG、ECG和熊果苷(Arbutin,AR)处理细胞,观察效应物对细胞形态的影响,用溴化二苯四偶氮法(MTT法)测定茶叶提取物对细胞增殖率的影响,以左旋多巴(L–DOPA)为底物,测定细胞内酪氨酸酶的活性,采用氢氧化钠裂解法测定细胞内黑色素的含量。结果显示,EGCG、ECG、GCG能显著抑制B16细胞的黑色素生成和酪氨酸酶的活性,且呈剂量依赖关系;当浓度为60μg/mL时,细胞增殖率均低于50%,酪氨酸酶活性与对照组相比分别降低了26.67%、27.27%和32.71%,黑色素生成抑制率均在30%以上。结果表明,茶叶提取物能通过多种途径抑制黑色素生成,且GCG的作用效果最优,ECG的作用效果次之,三者的作用效果均优于熊果苷的作用效果。     

IPPO催化氧化EGCG的催化特性研究

[目的]研究IPPO催化氧化EGCG的催化特性。[方法]以表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）为原料,对固定化多酚氧化酶催化氧化形成儿茶素低聚物进行了探讨,并且研究以EGCG作底物时固定化多酚氧化酶的催化特性。[结果]固定化多酚氧化酶酶促氧化EGCG能够生成一种非茶黄素类的聚合物,此聚合物在pH值6.5、温度50℃、底物浓度1.5%、反应时间10min时生成量最大。[结论]在此条件下,其反应动力学符合米式方程,测得Vmax值为0.108OD/min,Km值为2.565mg/ml。     

茶提取物EGCG抗肿瘤活性及机理研究进展

没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有显著的抗肿瘤、抗氧化、清除体内自由基、抗突变、抗衰老等作用。该文就EGCG诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期、抑制细胞增殖、调控致癌物代谢酶类、诱导细胞分化、抑制肿瘤细胞的侵袭和转移、增强机体免疫功能方面研究的一些新进展作一综述。     

HPLC-DAD测定大茶树和小茶树的西湖龙井茶中EGCG的含量

[目的]采用HPLC-DAD对西湖龙井茶中的表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的含量变化进行分析.[方法]采用AgilentC18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相：甲醇：水（2％乙酸）15∶85;流速：1.0 ml/min;检测波长：276 nm;柱温：35℃.[结果]EGCG线性范围为0.152～3.040 μg,相关系数r为1,平均回收率97.61％,RSD为6.61％.[结论]该方法精密度、准确度良好,稳定性高,能简便、快速地测定大小茶树的西湖龙井茶中的EGCG含量.     

EGCG对急性热应激肉鸡抗氧化能力的影响

为研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对急性热应激肉鸡血清及器官抗氧化能力的影响,选取144羽10日龄淮南麻黄公鸡,随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、急性热应激组(Ⅱ组)和急性热应激+EGCG组(Ⅲ组),每组6个重复,每个重复8羽。Ⅰ组和Ⅱ组饲喂基础饲粮,Ⅲ组饲喂在基础饲粮中添加400mg/kg EGCG的试验饲粮。至94日龄时,Ⅰ组环境温度维持为(22±1)℃,Ⅱ组和Ⅲ组升温至(33±1)℃,持续12h后,采集血清、脾脏、肝脏及空肠,用比色法检测抗氧化指标,并用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路相关基因表达水平。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅱ组肉鸡脾脏指数,血清和脾脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,肝脏中T-SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及Nrf2、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)、CAT、GSH-Px mRNA表达量显著降低(P0.05),而空肠中丙二醛(MDA)含量,肝脏中MDA和蛋白羰基(PC)含量及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)mRNA表达量显著升高(P0.05);2)与Ⅱ组相比,Ⅲ组肉鸡脾脏中CAT活性,肝脏中GSH-Px活性及CAT mRNA表达量显著升高(P0.05),而空肠和肝脏中MDA含量显著降低(P0.05)。综上,饲粮中添加EGCG可提高急性热应激肉鸡的抗氧化能力,进而缓解急性热应激导致的氧化损伤,其机制可能与EGCG激活Nrf2信号通路关键抗氧化基因表达有关,为EGCG应用于肉鸡生产奠定了理论基础。     

外源EGCG对采后龙眼果肉品质的影响

为探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对采后龙眼的保鲜效果,用浓度为1 mmol/L的EGCG溶液浸泡采后龙眼果实5 min,于25 ℃条件下贮藏,分别在贮藏的第2、4、6、8天取样测定果肉自溶指数、抗氧化物质含量、抗氧化酶活性等。结果表明：外源EGCG处理采后龙眼果实的第6和第8天时,果肉自溶指数分别较对照下降22.56%、11.70%;第8天时果肉可溶性固形物和可滴定酸的含量分别是对照的1.16、1.17倍; EGCG处理显著提高脱氢抗坏血酸还原酶和谷胱甘肽还原酶活性,且上调DlDHAR和DlGR等酶基因的相对表达。     

不同加工方式对EGCG抑制金黄色葡萄球菌活性作用的影响

[目的]研究经不同加工处理后表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对金黄色葡萄球菌抑菌活性的影响,从而为EGCG在食品生产加工中的抑菌应用提供依据。[方法]利用3种不同加工方式对EGCG进行处理,采用最低抑菌浓度测定法(MIC法)与纸片琼脂扩散法(KB法)检测EGCG的抑菌效果,利用Baird-Parker平板计数法检测EGCG对牛奶中金黄色葡萄球菌的抑制效果。[结果]EGCG抑菌能力随着浓度的增高而提升。相同浓度下,EGCG经过不同加工方式后抑菌能力大小依次为巴氏杀菌法(72℃,20 s)高压蒸汽灭菌法(121℃,15 min)薄膜过滤法(0.22μm),最低杀菌浓度(MBC)依次为0.062 5、0.125 0和1.000 0 mg/m L,经巴氏杀菌法处理的EGCG抑菌效果最强。而EGCG在牛奶中的抑菌作用不显著。[结论]在多种食品加工条件下,EGCG对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌活性。     

HPLC法评价储存温度对茶叶中3种儿茶素含量的影响

利用高效液相色谱(HPLC)法研究不同储存温度对茶叶中儿茶素(C)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)以及表儿茶素(EC)含量的影响。以V_(甲醇)∶V_水=15∶85为流动相等度洗脱,进样体积为10μL,柱温为30℃,检测波长为278 nm。结果表明,儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯以及表儿茶素3种单体质量浓度分别在0.1～3.2 mg/mL(r=1)、0.1～3.2 mg/mL(r=0.999 9)、0.1～3.2 mg/mL(r=0.999 6)范围内与峰面积呈良好的线性关系。儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素在5℃储存温度下含量最高,分别为0.012 4、0.805 0、0.154 7 mg/g;95℃下含量最低,分别为0.001 8、0.147 1、0.026 6 mg/g。表明5℃是茶叶的最适储存温度。     

没食子儿茶素没食子酸酯制备新工艺的研究

为得到富含没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)茶多酚,以分离EGCG单体,在传统的有机溶剂提取茶多酚的基础上,采用等体积的柠檬酸水溶液酸洗,使所获茶多酚产品中EGCG的含量由40%～50%上升到80%左右.再以该茶多酚为原料,应用HSCCC分离纯化儿茶素单体,所得EGCG产品的纯度达到98%以上.笔者还分别以常规有机溶剂提取方法和新方法所得茶多酚为原料,进行HSCCC分离,结果表明,在相同进样量的情况下,以新方法提取所得的茶多酚为原料在同等条件下进行HSCCC分离, EGCG的得率提高了169%.     

茶儿茶素对不饱和脂肪酸单体的抗氧化活性

比较研究了添加表没食子儿茶素没食子酸酯（ＥＧＣＧ）和维生素Ｅ对不饱和脂肪酸：油酸（一个双键）、亚油酸（二个双键）、花生四烯酸（四个双键）、二十二碳六烯酸（六个双键）在５０℃下氧化分解的抑制率及脂肪酸氧化速率对ＥＧＣＧ氧化速率的影响．结果表明：在有意义的时期内，ＥＧＣＧ对不同不饱和脂肪酸的抗氧化活性比维生素Ｅ强，ＥＧＣＧ在不饱和度高的不饱和脂肪酸中的氧化速率比不饱和度低的不饱和脂肪酸中要快得多．