外源DNA导入玉米自交系获得变异新品系

本文报道了同种内ＤＮＡ导入获得变异后代的试验结果,其变异率和变异性状与没种间的导入结果相似,所不同的是后代稳定的比较快,Ｄ３代即稳定;从细胞结构观察;变异新品系的结构既有供体的结构特征,又有受体的结构特征,但多数为供体的特征,这与田间性六表现相吻合。     

利用醇溶蛋白APAGE技术划分玉米自交系类群

利用改进的酸性聚丙烯酰胺凝胶技术,对15个白粒玉米自交系籽粒进行分析,结果共分离出22条谱带,其中公共谱带2条,多态性谱带20条,单态性谱带(某一自交系特有的带)是4条,平均每个自交系共分离出1.3条多态性谱带,通过对电泳谱带聚类,可将15个自交系分为5类,第一类为(49×木4)BC2、白3、D411;第二类为P98-1D-3-13和P98-1D白一号;第三类为唐B;第四类为P98-4-5-2-1、P98-4-5-1-3、P98-4-21-2、P98-4-4-3-21、92选16-2-1、六-2-1和9237 2000-1;第五类为20114和(白3×Di)BC2.聚类结果与已知系谱基本吻合,表明改进的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术在玉米自交系类群划分上基本可行.     

玉米杂交种,自交系鉴定技术的研究进展（综述）

系统阐述了玉米品种鉴定技术的产生,发展及研究现状。由于种子科学技术的发展衣相关学科的渗透,玉米品种鉴定技术在近期内已由传统的形态学和化学方法发展到了现代的各种电泳技术,包括醇溶蛋白的等电聚焦电泳、同工酶电泳、     

低温对不同玉米自交系幼苗生长的影响

以4个玉米自交系为试材,在玉米发芽期间,分别用-4,0,4,8℃处理0,4,8,12 h,研究其对玉米幼苗生长的影响。结果表明,4℃以下低温都会显著或极显著地破坏膜系统;4个玉米品种的幼苗忍耐低温的极限是0℃持续8 h以内;玉米出苗后致死低温为-4℃;4个自交系中综3和355的抗寒性较好。     

不同阶段玉米自交系的配合力分析

不同阶段玉米自交系的配合力分析姜明月，王金君，张丽颖（辽宁省农业科学院玉米研究所）玉米杂交种的更新，实质上是玉米自交系的更新。而玉米自交系的优劣，在相当程度上取决于配合力的高低，因此，配合力的改进一直是玉米育种工作者所努力的方向。关于配合力研究方面的...     

爆裂玉米自交系与不同优势类群普通玉米自交系的配合力及聚类分析

以6个自选爆裂玉米自交系与10个分属于不同优势类群的普通玉米自交系按NCⅡ遗传设计组配而成的60个普×爆F1组合为材料.分析了9个性状的配合力,并对爆裂玉米自交系进行了聚类分析.结果表明,爆裂玉米自交系的GCA存在显著差异,N09具有较高的组配利用价值.膨化倍数的SCA仅濮阳点的374×N09为极显著正值,穗粒重仅长葛点的改3×N04、豫87-1×N14和濮阳点的昌7-2×N14为极显著正值;普×爆F1组合的穗粒重均有很大提高,但膨化倍数较差,无直接利用价值.6个爆裂自交系划分为4类:N08,N10和N09为一类,N04,N05,N14各成一类.聚类结果与育种实际完全相符.     

采用AU-PAGE技术聚类分析法对玉米自交系类群的划分

玉米自交系的类群划分，是合理选配亲本，构建玉米杂种优势群，及预测杂种优势的依据。本研究利用醋酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳（AU-PAGE）技术分析玉米自交系亲缘关系、划分自交系类群，为育种家选配亲本提供参考。     

玉米不同亲缘类型自交系抗旱性研究

通过田间正常水分和干旱胁迫2种水分处理,对25份不同亲缘玉米自交系进行田间抗旱性鉴定。结果表明,在玉米的5个亲缘类型中,株高抗旱指数方面,瑞德类型的5个自交系平均值最低,为8.04,黄改类型的5个自交系平均值最高,为17.94;产量抗旱指数方面,兰卡斯特类型的5个自交系平均值最高,为1.15,旅大红骨类型的5个自交系平均值最低,为0.755。在25个自交系中,综合株高和产量抗旱指数的评估结果得出,PH6JM,PHB1M和P319抗旱性较强,可作为优良的抗旱种质资源进行利用。     

不同玉米自交系对卡那霉素敏感性的鉴定

利用 8个玉米自交系 ,设置 13个卡那霉素浓度 ,研究卡那霉素对玉米种子发芽及生长的影响。结果表明 :卡那霉素对玉米种子发芽率有一定的影响 ,同时能够引起幼苗的白化现象 ,随着卡那霉素浓度的增大 ,幼苗的生长受到明显的抑制 ,白化率也明显增大。     

不同丝黑穗病抗性玉米自交系ISSR多态性分析

采用ISSR标记技术,从82条ISSR引物中筛选出19条,分别对10个不同丝黑穗病抗性玉米自交系的多态性进行比较分析,同时根据多态性结果对供试材料进行抗性聚类分析。研究表明,ISSR标记在不同丝黑穗病抗性背景自交系中具有较高的多态性;根据多态性聚类结果,供试材料分为3类,5个抗病或中抗丝黑穗病的玉米自交系分布在聚类图中Ⅰ,Ⅱ组中。研究分析在不同感病背景下的多态性差异,以深入认识玉米抗丝黑穗病的遗传机制,为抗病资源的合理运用、抗病自交系和杂交种的选育提供一定理论依据。     

一种高效·快速回收DNA片断的方法

[目的]介绍一种高效、快速回收DNA片段的方法。[方法]在0.5 ml的EP管的管底用大头针扎孔,将一小块玻璃棉纸放入管中,把含有DNA片段的凝胶放在纸上,速冻后离心,收集从管底流出的液体,用乙醇沉淀回收,并且与TaKaRa回收试剂盒的结果做对比。[结果]该方法与试剂盒产量相当。[结论]该方法是一种经济、快速、高效回收DNA片段的方法。     

断裂剂加入顺序对DNA交联检测的影响

[目的]探讨单细胞凝胶电泳技术在检测DNA交联时断裂剂加入顺序及剂量对检测结果的影响。[方法]采用抗肿瘤药物卡莫司汀(BCNU)作为DNA交联剂,对DNA断裂剂过氧化叔丁醇(tBHP)的加入顺序和最佳使用剂量进行分析。将DNA拖尾长度作为检测指标,并采用t检验分析。[结果]BCNU染毒前加入tBHP组与BCNU染毒后加入tBHP组相比,统计学上均无显著差异。此外,随着tB-HP浓度的增加,DNA断裂程度随之增加,且在400μmol/L时断裂效果非常显著。[结论]断裂剂tBHP的加入顺序不会对DNA交联检测的试验结果产生影响;tBHP在浓度为400μmol/L时断裂效果非常显著。     

铬胁迫对小麦幼苗叶片DNA含量的影响

[目的]研究Cr6＋对小麦幼苗叶片DNA含量的影响。[方法]用5~100 mg/LCr6＋分别处理3和10 d龄小麦幼苗,紫外分光光度法和电泳法测定DNA含量变化。[结果]Cr6＋处理的小麦幼苗叶片DNA含量显著降低,3 d龄幼苗叶片DNA含量的下降幅度大于10 d龄幼苗。电泳图谱表明,对照叶片DNA带基本完整,而Cr6＋处理的DNA则发生了降解,出现拖尾现象。[结论]Cr6＋处理减少了小麦幼苗叶片DNA含量,进而影响其正常生长。6＋     

利用外源DNA导入玉米自交系创造变异的研究

采用玉米开苞导入技术通过花粉管通道将玉米自交系13A的总DNA导入玉米自交系沈109中,结果表明,D1和D2代的生育期、株高、穗位、株型等性状都发生了变异,总变异率为17.98%,并用原位杂交技术进行验证.讨论了后代变异、变异率和该项技术的特点.     

快速提取玉米DNA方法的研究

[目的]为了探索一种快速、简便,能够用于SSR分析的玉米DNA提取法。[方法]采用改进的常规DNA提取法和DNA快速提取法提取玉米种子胚和黄化苗叶片中的DNA,进行SSR分析,通过琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对SSR产物进行检测。[结果]用常规法提取时,用氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提1次就可获得质量好和浓度高的DNA;无须抽提,直接吸取上清液,可得到高浓度的DNA,也能满足SSR分析的需要;同样的提取法,SDS的提取效果比CTAB好。对快速提取法进行分析表明,相同的提取液和提取方法,采用种子胚提取的DNA浓度和质量明显高于叶片DNA。[结论]该研究为SSR在玉米种质及纯度鉴定上的应用提供了技术上的保证,有利于该项技术的普及和推广。     

单细胞电泳技术检测低温保存猪精子的DNA损伤

应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE),对冷冻解冻后猪精子DNA的损伤情况进行研究.结果表明,冷冻解冻会对猪精子DNA造成损伤,其彗星率与鲜精相比差异显著(P＜0.05);各组冻精之间,甘油添加量为2%～3%(v/v)时,冷冻对猪精子DNA造成的损伤最低,彗星率均低于其余各组(P＜0.05).     

肠炎沙门氏菌SDA-琼脂糖凝胶电泳检测技术研究

[目的]建立肠炎沙门氏菌的SDA快速检测方法。[方法]根据肠炎沙门氏菌invA基因片段设计链置换扩增(SDA)引物,建立肠炎沙门氏菌的SDA快速检测方法,并对设计的引物的灵敏度和特异性进行研究。[结果]成功建立了肠炎沙门氏菌的SDA快速检测方法,SDA反应成功扩增了目标序列。建立的SDA检测技术对肠炎沙门氏菌的检测灵敏度达到7.0×103cfu/ml,且特异性良好。[结论]试验选取的序列和引物具有较高的特异性,可用于肠炎沙门氏菌的特异性检测。     

不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响

[目的]研究不同DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响。[方法]选用3种不同的DNA聚合酶对单一的7株菌进行PCR扩增,通过DGGE图谱分析探讨不同的DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响。[结果]用相同的DNA聚合酶1时,上游引物使用357F1比357F2的效果要好。当357F1作为上游引物时,DNA聚合酶2明显好于DNA聚合酶1,但仍有干扰结果出现;当357F2作为上游引物时,使用DNA聚合酶1和DNA聚合酶2都不能使各菌株分离开来。使用高质量的DNA聚合酶3时,上游引物所加入的无论是40 bp还是只有18 bp的＂GC＂夹,都能够使不同的DNA片段分离开来。[结论]不同的DNA聚合酶对PCR-DGGE技术的影响是很大的,选择合适的DNA聚合酶是至关重要的。     

5个群体微卫星DNA多态性的研究

选用草原红牛30头、蒙古牛10头、夏洛来牛10头、利木赞牛6头和西门塔尔牛10头组成的试验牛群体共计66头,经过牛血液或肝脏基因组DNA的提取、8对微卫星引物的PCR扩增、扩增产物的聚丙烯酰胺电泳分型、分析各位点等位基因及全部个体的标记基因型、PPAP3.0和SPSS10.0软件计算基因频率、多态信息含量(PIC)和杂合度、遗传距离等步骤从分子水平上分析了在8个位点的遗传多态性。结果表明,微卫星位点IDVGA2、IDVGA46、TGLA44、BM1824、ETH225、BM2113、IDVGA44、IDVGA55扩增出的条带数分别为6、6、6、5、4、2、6、4条,平均条带数分别为4.4、4、4.2、3.6、3.4、2、4.8、3.2条,平均PIC/H分别为0.683 1/0.733 7、0.596 3/0.660 2、0.646 2/0.700 1、0.558 1/0.630 2、0.552 9/0.615 8、0.371 1/0.417 4、0.683 1/0.728 4、0.5431/0.615 3,均属于高度多态性位点。用于群体遗传标记的研究是较理想的。