高山红景天不同继代愈伤组织中红景天甙含量研究

[目的]研究在离体培养条件下红景天甙合成的特征。[方法]以高山红景天的种子和试管苗的茎、叶为外植体诱导愈伤组织,继代培养6次,测定每代愈伤组织中红景天甙的含量。[结果]以不同部位作为外植体诱导的愈伤组织中所含红景天甙的含量不同,茎诱导的愈伤组织中红景天甙含量最高,达6．2100mg／g,其次为种子诱导的愈伤组织,以叶为外植体诱导的愈伤组织中红景天甙含量最小。仅0．9968mg／g;红景天甙的含量在各继代培养的愈伤组织中的含量不同,在1～2代较低,3～5代最高,第6代明显下降。[结论]高山红景天中红景天甙含量与外植体和继代次数有关。     

高速逆流色谱分离纯化雪白睡莲花中的酚类成分

[目的]采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化雪白睡莲花中的酚类成分。[方法]HSCCC分离过程分为两步,分别采用乙酸乙酯∶甲醇∶水(4∶1∶5)和乙酸乙酯∶正丁醇∶水(4∶1∶5)两个体系,固定相均采用上相,流动相均采用下相,流速为2.0 m L/min,主机转速设定为850 r/min,紫外检测波长为254 nm。高效液相色谱(HPLC)检测纯度。[结果]第一步从200 mg的睡莲花提取物中分离得到异槲皮苷(I,41.4 mg)、紫云英苷(II,40 mg)和一混合物85 mg;第二步从混合物中分离纯化得到isostrictiniin(III,50.1 mg)和烟花苷(IV,26.3 mg),上述4种物质的纯度分别为73.53%、92.42%、82.36%和85.65%。[结论]HSCCC可快速的分离纯化雪白睡莲花中的酚类成分。     

利用高速逆流色谱从川赤芍中制备芍药甙单体

以正丁醇-乙酸乙酯-水(体积比为1:4:5)为两相溶剂系统,采用高速逆流色谱(HSCCC)从中药川赤芍中分离纯化芍药甙,197.4 mg纯度59.21%的芍药甙精品经过一次HSCCC分离,得到纯度94.6%以上的芍药甙纯品68.92 mg,回收率为58.97%,其中纯度99.9%以上的芍药甙单体23 mg,回收率19.68%.     

大花红景天挥发油化学成分的研究

[目的]研究大花红景天挥发油的化学成分。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取大花红景天挥发油,并通过气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术,对其中的化学成分进行分析鉴定。[结果]通过计算机检索,鉴定了其中的45个化合物,占挥发油色谱峰总面积的96．61％。主要成分为正辛醇（20．31％）,牛儿醇（12．86％）,2-甲基-3-丁烯-2-醇（12．07％）,3-甲基-2-丁烯醇（6．69％）,十六酸（6．43％）,亚油酸（5．73％）和环癸烷（4．05％）等。检出成分占挥发油总量的96．56％。[结论]该研究结果为大花红景天的合理利用提供科学依据。     

超声波提取红景天鞣质工艺的优化

[目的]对红景天[Rhodiola crenulata（Hook.f.etThoms.）H.Ohba]鞣质超声波提取工艺进行优化。[方法]在单因素试验的基础上,采用正交试验优化红景天鞣质提取的工艺;采用干酪素法测定鞣质含量。[结果]红景天鞣质的提取最佳工艺条件为：70%丙酮溶剂,料液比为1∶10,超声功率为450 W,提取时间15 min。在最佳工艺条件下,红景天鞣质提取率为5.17 mg/m。l[结论]该研究为红景天鞣质的进一步开发利用提供了理论依据。     

碱提红景天中的多糖及抗氧化性研究

[目的]进一步开发利用大花红景天中的多糖。[方法]大花红景天经乙醇脱脂、水提、碱提后,用盐酸中和,乙醇沉淀得粗多糖,经柱色谱纯化得白色红景天多糖,对其进行抗氧化性试验和羟自由基、超氧阴离子自由基的清除试验。[结果]经验证,提取到的多糖不含单糖,为均一多糖。该多糖对猪油有一定的抗氧化作用,对其他油脂也应有一定的抗氧化性作用。羟自由基清除率为50%时,多糖、苯甲酸、甘露醇的浓度分别为208、1751、48μg/ml。超氧阴离子自由基清除率为50%时,多糖和抗坏血酸的浓度分别为1801、18μg/ml。[结论]碱提大花红景天获得的多糖具有较好的抗氧化能力,对超氧阴离子自由基和羟自由基均具有一定的消除作用。     

高速逆流色谱法分离白木香叶片中的洋芹素-7,4-二甲醚及其体外清除亚硝酸盐作用研究

[目的]分离白木香的叶片、树干、果实和花等部位中的洋芹素-7,4’-二甲醚(7,4’-二甲氧基-5-羟基黄酮),并检测该化合物对亚硝酸盐的清除作用。[方法]以经济林木白木香的叶片为原料,用高速逆流色谱技术分离目标化合物,并在pH3.0和7.0条件下检测该化合物对亚硝酸盐的清除作用。[结果]适合分离洋芹素-7,4’-二甲醚的溶剂体系是正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶1.5∶1.5∶1,V/V/V/V),用该溶剂体系成功分离得到纯度为98.31%的洋芹素-7,4’-二甲醚。pH3.0条件下洋芹素-7,4’-二甲醚对亚硝酸盐的清除率为12.40%;pH 7.0条件下对亚硝酸盐的清除率为8.72%。[结论]用高速逆流色谱技术成功从白木香叶片中分离到洋芹素-7,4’-二甲醚;洋芹素-7,4’-二甲醚是白木香叶提取物清除亚硝酸盐作用的活性成分之一。     

卢氏藻活性化合物的分离及抑菌活性研究

[目的]探索应用高速逆流色谱技术从卢氏藻中分离抑菌活性化合物。[方法]采用正己烷-乙酸甲酯-乙腈-水（体积比为4∶4∶3∶4）的液-液-液3相溶剂体系为高速逆流色谱的最优分离体系,以上相和中相为固定相,依次以下相和中相对样品进行洗脱,并收集分离液经高效液相色谱检测纯度。[结果]洗脱共得到RS1、RS2、RS3 3个组分物质,经HPLC纯度检测,RS1为极性较强的单一化合物;体外抑菌试验结果表明,RS1对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及真菌都有很好的抑菌效果,RS2对细菌有抑菌效果,对真菌无抑菌作用,RS3没有抑菌活性。[结论]液-液-液3相高速逆流色谱法能够一步从卢氏藻混合物中分离获得具有良好抑菌活性的单体化合物。     

高压提取红景天根中红景天苷工艺研究

[目的]优化红景天中红景天苷的提取工艺。[方法]用密闭升温产生的高压提取红景天根中的红景天苷,高压液相色谱法测定红景天苷的含量,单因素试验选择提取溶剂,正交试验确定最佳提取工艺,并与超声波法进行比较。[结果]提取溶剂为水时,红景天苷的得率最高。提取时间对红景天苷得率的影响最大,其次是提取温度,两者为决定性因素,然后是料液比、浸泡时间。高压法最佳提取工艺条件下红景天苷的得率高于超声波法,避免了超声波及微波对人体的危害,成本低,更适用于工业化生产。[结论]水作提取溶剂时,高压法提取红景天苷的最佳工艺为:料液比1∶16(g/ml),浸泡时间1.0 h,提取温度140℃,提取时间30 min。     

响应面法优化热回流提取红景天苷工艺

[目的]建立一种快速准确、操作简便、生产经济的红景天苷的提取方法。[方法]以大花红景天的根为原料,以蒸馏水为溶媒,采用水浴回流浸提的方法提取红景天苷,研究了提取温度,提取时间,料液比,浸提次数和样品粒径5个因素对提取红景天中红景天苷的影响。在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验设计对红景天苷的提取工艺进行优化,以红景天苷提取率为响应值做响应面和等高线,分析各个因素的显著性和交互作用。[结果]得出水浴回流浸提法提取红景天苷最佳提取工艺条件为:提取温度60.3℃,提取时间101 min,料液比1∶21 g/ml,提取1次,在此条件下红景天苷提取率为4.21%。[结论]研究为热回流提取红景天中红景天苷的工业化生产提供了理论依据。     

超声辅助提取红景天中的原花青素

[目的]研究红景天中原花青素的超声提取工艺条件。[方法]通过单因素试验分析超声提取过程中料液比、乙醇浓度、提取时间和温度等因素对原花青素提取率的影响,并在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验优选红景天中原花青素的最佳提取条件。[结果]各因素对原花青素提取效果的影响大小顺序为:乙醇浓度(B)料液比(A)温度(C)时间(D);最佳工艺条件为:料液比1∶40(g/ml),乙醇浓度60%,提取温度50℃,提取时间30 min;在此提取条件下,红景天中原花青素的提取率为11.26%。[结论]该方法优选出了红景天中原花青素的最佳超声提取工艺条件,为红景天的开发利用提供了依据。     

西藏长鞭红景天炼苗及移栽技术研究

[目的]研究西藏长鞭红景天的炼苗及移栽技术。[方法]在长鞭红景天组培苗的炼苗及移栽过程中,采取不同的处理方法,进行对比试验。[结果]使用高浓度青霉素钠处理组培苗,抑菌能力强,无严重污染现象,未污染苗株数最多;在4种对比基质中,腐殖土-珍珠岩(5∶5,W/W)的栽培基质最有利于长鞭红景天的生长,成活率可达65%;移栽预处理过程中对组培苗洗根后的成活率高于未洗根的;对栽培基质消毒后,移栽苗的成活率高于未消毒的。[结论]长鞭红景天组培苗需要2个月左右才生根,且苗长势较弱,部分苗为徒长苗。     

蔷薇红景天总黄酮的提取及分析

[目的]为红景天的综合利用提供参考。[方法]以红景天干药材为材料,用不同浓度(50%、70%、85%)的乙醇提取总黄酮,确定总黄酮的最佳提取条件。以枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、短小杆菌、大肠杆菌为供试菌种,对红景天乙醇提取物的抑菌效力进行测定。[结果]用50%乙醇提取红景天24 h左右时,其总黄酮提取率最高,为1.309%;红景天中的总黄酮仅对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有抑制作用,抑菌圈直径分别为21.25、6.33 mm;红景天乙醇粗提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌都有抑制作用,抑菌圈直径分别为10.41、10.48、12.07 mm。[结论]红景天中可能存在对枯草芽孢杆菌、短小杆菌起抑制作用的成分。     

采收前短期红膜遮阴处理对高山红景天根的生长及红景天苷产量的影响

[目的]为提高栽培高山红景天的经济价值,研究了采收前短期红膜遮阴处理对高山红景天根生物量、红景天苷含量及产量的影响。[方法]对高山红景天分别进行了10、20、30和40 d的红膜遮阴处理,测定了雌株和雄株高山红景天根中红景天苷的含量和产量。[结果]红膜遮阴处理显著提高了高山红景天根中红景天苷的含量和产量,并且无论是雌株还是雄株,高山红景天根中红景天苷的产量均表现为在红膜遮阴处理20 d时最高,增幅分别达到21.21%和32.91%。[结论]从生产实际出发,在收获前20 d对高山红景天进行遮红膜处理,有利于提高红景天苷的产量。     

微波消解-ICP-MS法测定野生及种植红景天中的微量元素含量

[目的]建立红景天提取物中微量元素含量的测定方法。[方法]利用电感耦合等离子体质谱法对野生和种植红景天中的多种微量元素进行测定和分析。[结果]在选定的试验条件下,方法的检出限为0.002~0.092 ng/ml;相对标准偏差在1.87%~4.96%之间;标准样加入回收率在94.0%~104.5%之间。[结论]野生红景天中微量元素总量明显高于种植的,但野生红景天中有害元素铅、砷和镉的含量高于种植红景天。     

凝胶渗透色谱-气相色谱/质谱法测定瓜子中的石蜡含量

[目的]探索瓜子中石蜡含量的高效检测方法。[方法]样品经索氏萃取后,利用凝胶渗透色谱(GPC)技术去除样品中的油脂,净化液浓缩干后用乙酸乙酯∶环己烷(1∶1,V/V)溶解,通过DB-5ms石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)分离,采用电子轰击离子源选择离子检测模式进行质谱测定。[结果]该方法的相对标准偏差(RSD)为6.4%～9.2%,检测回收率为74.2%～90.3%。[结论]该方法操作简单,测定结果准确、可靠。     

利用大孔吸附树脂与高速逆流色谱联用技术大量制备脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法

脱氧雪腐镰刀菌烯醇是一类危害严重的真菌毒素,针对其毒理学的研究与脱毒研究需要大量毒素纯品。采用大孔吸附树脂与高速逆流色谱联用技术,从禾谷镰刀菌PH-1的大米培养物中提取并纯化脱氧雪腐镰刀菌烯醇。首先采用85%甲醇溶液提取毒素,之后以XAD-4大孔吸附树脂柱初步纯化,用30%甲醇溶液洗脱;初步纯化产物以高速逆流色谱进行精制,采用乙酸乙酯-水(1∶1)溶剂系统进行分离,脱氧雪腐镰刀菌烯醇在150 min被洗脱,最终产物纯度为96. 78%,回收率为76. 20%。采用该方法可以从1 000 g大米发酵物中一次提取出500 mg以上毒素纯品。     

红景天甙浸提工艺研究

应用五元二次旋转正交设计进行红景天甙浸提工艺试验。结果表明 ,最佳工艺参数组合为 1 0 0℃ ,p H值 8.0 ,加水 2 0倍 ,粒度 60～ 80目 ,浸提 80 min。最高浸提率为 89.3 3 %。多酚类物质与红景天甙的浸出率呈正相关 ,R =0 .80 89。在50℃时 ,红景天甙浸提率随乙醇比例的增加而增加 ,但 1 0 0 %乙醇在 50℃时的浸提率为 86.1 2 % ,1 0 0 %水在 80℃的浸提率为 88.97%。     

玉米须黄酮的模拟移动床色谱纯化工艺

[目的]探讨和寻找克服以往玉米须黄酮及其单体纯化工艺不足的技术,分离玉米须黄酮及其单体。[方法]以玉米须浸膏为原料,采用萃取和模拟移动床色谱相结合的办法分离高纯度玉米须黄酮,并优化其纯化工艺。[结果]所得产品和检测结果符合要求,明确了玉米须黄酮的纯化工艺路线。[结论]规模化精细分离技术和模拟移动床色谱分离技术可用于高纯度玉米须黄酮的分离纯化。     

高速逆流色谱在天然产物分离纯化中的应用

对高速逆流色谱的优点及其在分离和纯化天然产物过程中溶剂体系的选择方法、具体应用实例等进行了介绍。