寡营养菌株筛选鉴定及发酵特性的研究

对从实验室保藏的芽孢杆菌中筛选得到一株寡营养菌株K1进行鉴定及降解氨氮性质研究,以开发具有降解水体氨氮特性的寡营养菌株。通过形态特征观察、生理生化特性测定及16S rDNA序列同源性和系统发育树分析,经鉴定该菌株K1为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),它不但在稀释100倍的牛肉膏蛋白胨培养基中良好繁殖,在好氧条件下生长比在静置培养状态下更为良好,而且对氨态氮和硝态氮均有一定的降解能力。蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)K1对氨态氮和硝态氮的最大降解率分别为53.8%和42.2%,表明其在富营养水体中有很好的应用前景。     

1株净水贫营养细菌的筛选及其低营养特性的初步研究

从不同环境中分离出38株贫营养细菌。经16S rDNA序列分析,主要为不动杆菌属(Acinetobact-er)、产卟啉杆菌属(Porphyrobacter)和短杆菌属(Brevibacterium)等18个属。采用化学需氧量(CODMn)和总有机碳(TOC)2种检测指标从中筛选到1株对微污染水源有较好净化效果的菌株Y11,其对水体CODMn和TOC的降解率分别为48.01%和46.83%。该菌株经生理生化反应进一步鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。饥饿试验表明,Y11在低营养的环境下能长期存活。     

斑衣蜡蝉成虫肠道细菌的鉴定研究

斑衣蜡蝉是自然发生于臭椿树和苦楝树的一种重要害虫，也是一种重要的药用昆虫资源，分布于山东省、江苏省等地。本研究从自然种群的斑衣蜡蝉成虫肠道环境中分离、纯化、培养，获得细菌4个菌株，分别对其菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应进行了系统研究。鉴定结果表明：4个细菌菌株均为兼性厌氧芽孢杆菌，l号菌株为多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa），2号菌株为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformls），3号菌株为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium），4号菌株为枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）。在斑衣蜡蝉成虫肠道环境中存在的不同细菌之间的数量具有明显差异。     

Isolation of Bacteria and Yeasts from Daqu Samples and its Identification by Biolog Automatic Analyzer for Microbes

[目的]初步探讨Biolog微生物自动分析系统在大曲细菌、酵母菌鉴定中的应用.[方法]利用稀释平板法,采用营养琼脂培养基和麦芽汁培养基,分别对单粮型大曲样品中的细菌和酵母菌进行分离培养.对分离纯化的细菌和酵母菌,经菌落观察和镜检后,利用Biolog微生物自动分析系统对其进行鉴定.[结果]从大曲单个菌落样品中分别分离出7株纯化的细菌菌株和4株纯化的酵母菌株,经Biolog微生物自动分析系统,确定其中5株细菌分别为:M1为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、M2为青岛芽孢杆菌(Bacillus qingdaonensis)、M3为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、M4为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、M5为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium);确定其中2株酵母菌分别为:N1为产香酵母(Zygosaccharomyces cidri);N2为布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii).[结论]该研究为大曲中的微生物分析奠定了基础.     

大曲中细菌和酵母菌的分离及其Biolog微生物系统分析鉴定

[目的]初步探讨Biolog微生物自动分析系统在大曲细菌、酵母菌鉴定中的应用。[方法]利用稀释平板法,采用营养琼脂培养基和麦芽汁培养基,分别对单粮型大曲样品中的细菌和酵母菌进行分离培养。对分离纯化的细菌和酵母菌,经菌落观察和镜检后,利用Biolog微生物自动分析系统对其进行鉴定。[结果]从大曲单个菌落样品中分别分离出7株纯化的细菌菌株和4株纯化的酵母菌株,经Biolog微生物自动分析系统,确定其中5株细菌分别为:M1为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、M2为青岛芽孢杆菌(Bacillus qingdaonen-sis)、M3为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、M4为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、M5为巨大芽孢杆菌(Bacillus megateri-um);确定其中2株酵母菌分别为:N1为产香酵母(Zygosaccharomyces cidri);N2为布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)。[结论]该研究为大曲中的微生物分析奠定了基础。     

重金属Cr6+耐受细菌的筛选研究

土壤中重金属Cr6+污染日益严重,其对植物的影响也越来越大,并可通过食物链富集进入人和动物体内,从而危害人畜健康。试验在分别添加0.3和0.5 g·kg-1 Cr6+的土样中进行耐性菌株的筛选,以期为微生物修复重金属污染提供技术支持。结果表明,该研究共获得了9株具有较好Cr6+耐性的菌株。它们均可在含0.5,1.0 mmol·L-1 Cr6+的LB培养基中生长。其中,编号为J3,J5,J8的菌种耐性达到2 mmol·L-1,在含2 mmol·L-1 Cr6+的液体培养基中培养48 h后,培养基中的Cr6+含量分别降低23%,36%,7%。经测定,上述3种菌分别为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、沙福芽孢杆菌（Bacillus sonorensis）。     

生活垃圾处理机生物降解生活垃圾的微生物研究

[目的]采用生活垃圾处理机生物降解生活垃圾中的微生物。[方法]收集厨余垃圾,对降解混合垃圾、分类垃圾的优势菌群中的菌株和复合菌剂中的菌株进行培养和鉴定。[结果]鉴定出原菌剂中微生物11株;降解淀粉类垃圾的优势菌群微生物3株,分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtili,s BDh9）、杂菌（sta1）和淀粉液化芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens B,BDh1）;降解蛋白质类生活垃圾优势菌群微生物3株,分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtili,s BDh9）、杂菌（sta1）和肉食杆菌属（Carnobacterium divergens,BD5）;降解纤维素类垃圾的优势菌群微生物5株,分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis,BDh9）、杂菌（sta1）、伯克霍尔德菌（Burkholderia multivoran,s BDh6）、环状芽孢杆菌（Bacillus circulans,BD1）和杂菌（sta2）。[结论]该研究可为建立生物降解生活垃圾自主技术打下基础。     

盐生植物根际耐盐碱微生物的筛选及其降解特性

为获得具有耐盐碱特性的优良菌株用于盐碱土壤的生物改良剂,利用选择性培养基对盐生植物碱蓬和柽柳根际土壤中的耐盐微生物进行了筛选,并对优良菌株的耐盐碱特性进行了研究。结果表明：共计筛选出耐盐碱微生物26株,其中有耐盐力较高的菌株13株,耐碱力较高的菌株18株,耐盐碱力较强的菌株 3株（X2、X7和 X12）;X7菌株的降盐效果优于 X2和 X12,降盐率达45．42％,X2、X7和 X12菌株的降碱效果无差异,均为16％左右。经鉴定,X7菌株为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus ）,X2和 X12菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ）。     

北苍术根腐病病原菌分离鉴定及其生防菌筛选

为明确导致北苍术根腐病的病原菌,本实验从承德市感病北苍术块茎中分离病原微生物,并对病原微生物致病性进行回接验证。研究分离获得的具有致病性的病原菌鉴定为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）。从健康药用植物根际土壤中分离获得94株根际微生物,通过平板拮抗筛选获得2株生防菌,分别为菌株SFJ-27和菌株SFJ-41,平板对峙实验结果表明2株生防菌抑菌率均在50%以上。通过分子生物学和形态学鉴定2株菌分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillusvelezensis）。盆栽实验结果表明,菌株SFJ-27与菌株SFJ-41对北苍术根腐病具有明显的生防效果,防治效果分别为52.27%和68.19%。研究表明,尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）可以导致北苍术根腐病的发生,枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）对北苍术根腐病具有防治作用。     

兼性贫营养净水菌株微胶囊的制备及其性能研究

以前期筛选的3种兼性贫营养细菌作为菌种，采用外源乳化法制备了微胶囊生物制剂。结果表明，净水贫营养微胶囊生物制剂外观呈圆球形，粒径集中分布在105～240μm。微胶囊化后，生物制剂相较于菌悬液在抗酸碱性及稳定性方面均明显提高，7 d总有机碳（TOC）的降解率达61.21%，可安全有效地用于给水系统的深度处理领域。     

培养基变化和接种不同生长期细菌对印度芽孢杆菌L15生长的影响

为了解培养基前后变化和接种不同生长期细菌对印度芽孢杆菌Bacillus indicus L15菌株生长的影响,测定了经2216E(Z)、海水发酵(S)、淡水发酵(F)培养基培养的L15菌株营养细胞和芽孢的生长情况。结果表明:接种由同种培养基培养的L15菌株营养细胞和芽孢后的细菌增长量,并非总是接种营养细胞的增长量高于接种芽孢的增长量,细菌增长量与菌株前期培养用培养基及后期转接培养基有关;接种由淡水发酵培养基培养的L15菌株营养细胞后的细菌增长量显著低于接种芽孢后的增长量(P0.05),而接种由海水发酵培养基培养的L15菌株营养细胞后的细菌增长量却显著高于接种芽孢后的增长量(P0.05);当菌株从能被直接吸收的小分子物质组成的培养基转移到不能被直接吸收的大分子物质组成的培养基后,L15菌株增长量显著降低(P0.05),反之增长量显著升高(P0.05)。研究表明,在养殖池塘中使用益生菌时需做预试验,以便确定使用营养细胞还是芽孢,且培养益生菌的培养基的碳、氮源组成与使用目标环境和营养分子的组成越接近越好。     

番茄酱中好氧细菌分离方法的研究

新疆番茄制品出口量占全国的90;,近年来外商对其安全卫生提出了许多技术要求,国内番茄制品生产企业也陷入番茄制品胖听、平听的技术障碍,至今国内尚无相应的微生物检测技术和标准.采用锰营养、甘露醇卵黄多粘菌素、嗜热耐酸杆菌、脂耐热嗜酸杆菌、溴甲酚紫葡萄糖肉汤、平酸菌增菌和液体硫乙醇酸盐7种液体培养基对供试番茄酱在37和55℃下培养.通过不同培养时间培养液的O.D值、pH值、菌体形态和菌落特征的研究,确定出锰营养和平酸菌增菌培养基为该类菌的最适液体培养基,嗜热耐酸杆菌和平酸菌增菌琼脂培养基为最佳固体培养基.分离出的菌株经VITEK-32生化鉴定,主要细菌分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和矮小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),均为产酸不产气可导致平酸腐败的好氧芽孢菌.     

陈化烟叶表面可培养寡营养菌多样性分析

通过低浓度营养培养基分离4种不同陈化烟叶表面的微生物,经过连续2～4周的培养,共获得55株不同的菌株,通过16S rDNA扩增和测序进行初步的分子鉴定后,进行BLAST比对分析,挑选每个菌株最大一致性的同源菌株16S rDNA序列一起进行系统聚类分析.结果表明,陈化烟叶中微生物存在着广泛的多样性,每种烟草中都拥有自己独特的微生物菌群,存在大量的兼性寡营养茵,专性寡营养菌较少,而且烟叶的品种和等级直接影响到微生物的种群和数量.     

灰葡萄孢拮抗细菌营养与发酵配方的研究

对新筛选的灰葡萄孢生防细菌即地衣芽孢杆菌（B acillus licheniformis)W10和多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa)W3、Y2-11-1的营养要求及发酵培养基配方进行了研究。结果表明：3株拮抗细菌的最佳发酵配方,菌株W10为1%麦芽糖、4%黄豆饼粉、0.2%NaNO3、0.02%K2HPO4和0.05%酵母膏,菌株W3为2%蔗糖、4%黄豆饼粉和0.4%酵母膏,菌株Y2-11-1为1%麦芽糖、2%黄豆饼粉、0.2%NaNO3、0.02%K2HPO4以及0.2%酵母膏。     

生物有机肥中微生物的分离鉴定及液体菌剂的构建

【目的】了解生物有机肥中微生物的种类及各种微生物之间的关系,并借此构建一种高效便捷的 液体菌剂。【方法】采用平板划线法从肥料中分离出菌种,并通过菌落观察、革兰氏染色法及 16SrDNA 基因同 源序列比对方法对其中的微生物进行鉴定,同时运用菌饼法和平板涂布法对各菌种之间的拮抗作用及培养条件 进行研究。【结果】分离得到 4 种菌落,分别为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）和巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）,这 4 种菌之间均无拮 抗作用。地衣芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：巨大芽孢杆菌：植物乳杆菌按 1∶1∶1∶1 添加到不同 pH 的牛肉膏蛋 白胨培养基液体培养基中进行培养,并用稀释涂布平板法测定有效活菌数,最终得到最适 pH 为 7.0。【结论】 从生物有机肥中分离得到 4 种菌种,它们之间均无拮抗作用,采用等比例的菌种配比,在 pH 为 7.0 的牛肉膏蛋 白胨液体培养基进行培养,各菌种都能很好地生长,从而得到一种高效的液体菌剂。     

不同营养类型培养基番茄内生细菌群落结构研究

通过采用Biolog EcoPlate培养、16S r RNA基因高通量测序技术等方法研究不同培养基上植物内生细菌群落结构的组成差异，探究不同培养基等营养条件对番茄内生细菌群落结构的影响。结果表明：(1)4种培养基上生长的内生菌群在Biolog EcoPlate微平板培养96 h后，菌群生长达到稳定期，且在牛肉膏蛋白胨(NA)培养基下菌群代谢活性较高。R₂A培养基下菌群代谢活性较低。(2)番茄内生微生物组包括柠檬酸杆菌属(Citroebacteria)、芽孢杆菌属(Bacillus)、鞘脂单胞菌(Sphingbacterium)、布克氏菌属(Burkholderia)。(3)LB、TSA培养基分离到的内生菌多为芽孢杆菌属；在NA、R₂A培养基中番茄内生菌组成多为柠檬酸杆菌、芽孢杆菌、鞘脂单胞菌、布克氏菌，为优势菌种。(4)NA培养基中番茄内生微生物组香农指数高于其他处理(P<0.05)差异；PCoA分析显示4种培养基中番茄内生细菌群落结构具有差异(P<0.05)。(5)网络分析发现NA、R₂A培养基中番茄内生...     

高效降解厨余垃圾复合菌剂的构建及应用

选取10种微生物菌株，分析其产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的能力，根据厨余垃圾中有机质成分及酶活功能信息构建一种高效降解厨余垃圾复合菌剂，并进行厨余垃圾堆肥的应用研究。结果表明：酿酒酵母产淀粉酶的能力最高，地衣芽孢杆菌产蛋白酶的能力最高，米曲霉产纤维素酶的能力最高，枯草芽孢杆菌产脂肪酶能力最高。拮抗性试验发现只有短芽孢杆菌属与地衣芽孢杆菌存在拮抗性关系。分别选取5株高酶活微生物构建4组复合菌剂，酶活测定结果表明，由盐居固氮菌（Azotobacter salinestris）、绿色木霉（Trichoderma viride）、地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）和米曲霉（Aspergillus oryzae）组配的F2微生物复合菌剂的产酶能力较好，其中淀粉酶为25.0 U/mL，蛋白酶为0.13U/mL，纤维素酶为1 244 U/mL，脂肪酶为4.09 U/mL。堆肥结果表明：添加复合菌剂F2组最高温达到67℃，高温期持续14 d,C/N为18.31,pH值为9.08，种子发芽指数为103.17%，相较于CK组堆...     

腐乳中产生物胺菌株的筛选鉴定及产生物胺能力评价

为筛选腐乳样品中产生物胺的菌株,以24种市售腐乳样品为研究对象,通过生物胺初筛培养基显色反应进行初筛,再采用高效液相色谱(HPLC)定量分析其产胺能力,获得61株具有氨基酸脱羧酶活性的菌株。选取产生物胺总量较高的20株菌,经16S rDNA分析,这20株菌均为芽孢杆菌属,其中包括6株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、5株巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、3株长形赖氨酸芽胞杆菌(Lysinibacillus macrolides)、2株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和4株热带芽孢杆菌(Bacillus tropicus)。还分析了温度、氨基酸浓度、NaCl浓度、乙醇浓度、pH值对产胺量较高的枯草芽孢杆菌和热带芽孢杆菌产胺能力的影响。结果表明:NaCl浓度8%和乙醇浓度10%对生物胺的合成有显著的抑制作用,可应用于腐乳生产中,能有效控制腐乳中生物胺的含量。     

一株高效转化硝态氮细菌的分离鉴定和特性研究

为寻找可有效改良土壤次生盐渍化的微生物材料,从次生盐渍化严重的设施栽培土壤中分离出一株可高效转化硝态氮的细菌,命名为NCT-2。菌株经革兰氏染色为阳性,无荚膜、有芽孢、长杆状。根据形态、生理特征和分子生物学特性将该菌株鉴定为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterum）。在马铃薯培养基中的最佳培养条件为：pH7.0、温度35℃,培养4 h后进入对数生长期,18 h后达到稳定生长期。经研究表明,当培养基中硝态氮含量为500 mg/L时,该菌株3 d后能使硝态氮含量降低83.25%。     

巨龙竹组培苗污染优势内生菌的分离与鉴定

【目的】对引起巨龙竹组培苗污染的优势内生菌进行分离与鉴定,为后期巨龙竹组织培养基的优化及预防巨龙竹组织培养过程中内生菌污染提供科学依据。【方法】采用NA培养基分离纯化菌株, 然后通过菌体的形态结构观察、生理生化试验及16S rDNA序列同源性分析,对引起巨龙竹组培苗污染的优势内生菌进行鉴定。【结果】引起巨龙竹组培苗污染的优势内生菌为SWFU03菌株,其形态特征及生理生化试验结果与芽孢杆菌属（Bacillus）坚强芽孢杆菌（Bacillus firmus）的生理生化特征基本相同;16S rDNA序列分析结果表明,菌株SWFU03与坚强芽孢杆菌（GQ903389.1）在同一系统发育分支,其同源性为99.11%。【结论】引起巨龙竹组培苗污染的优势内生菌菌株SWFU03为坚强芽孢杆菌。