黄瓜品种‘川绿2号’SSR指纹图谱的构建和纯度鉴定

为了快速而准确地鉴定杂交黄瓜种子的纯度和真伪,用164对全基因组覆盖的SSR引物对黄瓜品种‘川绿2号’及其亲本进行多态性筛选。结果表明,28对引物在亲本间具多态性,这些引物在1~7号染色体均有分布,其中2、6号染色体上分布有较多多态性位点。28对多态性引物中共显性引物22对,缺失多态性引物6对。共显性引物中有10对引物在杂交后代表现为清晰、稳定的父母本互补的带型,特异性强,可分辨程度高,可以用来区别其中混杂的母本、父本及其他种子,为‘川绿2号’及其亲本指纹图谱的核心引物。利用这10对引物对1批‘川绿2号’种子进行检测,分子标记鉴定纯度为96.0%,真、假杂种编号与田间鉴定结果一致。这28对引物组成指纹图谱不仅能为‘川绿2号’杂交种的真伪鉴定、纯度检测及亲本提纯等工作提供更加准确的技术指导,还可为遗传多样性分析、重要表型基因定位分析等提供信息。     

应用SSR标记鉴定甜瓜流星翡翠的种子纯度

为建立一套高效、准确、成本低的室内流星翡翠杂交种种子纯度检测技术体系,以甜瓜杂交种流星翡翠及其亲本为材料,通过124对简单重复序列标记(SSR标记)引物筛选出流星翡翠及其父母本材料间多态性引物共3对,分别为GCM90、GCM92和GCM119。利用这3对多态性标记引物进行甜瓜杂交种种子纯度的快速鉴定,鉴定结果为99.65%,表明本研究筛选的3对SSR标记可以快速鉴定甜瓜流星翡翠的种子纯度。     

4个加工番茄新品种SSR指纹图谱的构建与品种鉴定

[目的]探明加工番茄主要品种的遗传变异,建立准确高效的种子纯度鉴定方法.[方法]利用SSR引物对4个加工番茄杂交品种及其8个亲本进行PCR扩增,经4;的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,进行带型分析.[结果]从34对SSR引物中筛选出10对扩增产物具有稳定多态性的引物,这些引物分布在番茄整个基因组,每对引物可以检测到2～4个数目不等的多态性片段,共28个多态性片段,平均2.8个,片段大小介于60～150 bp,成功构建出4个加工番茄杂交种及其8个亲本的指纹图谱,并鉴定出了这4个杂交种的共显性标记.[结论]这些标记不仅可用于亲本材料和杂交品种的真伪鉴别,还可为杂交种纯度的鉴定提供可靠的方法,对亲本知识权的保护及杂交种推广具有重要意义.     

基于 SSR 分子标记的‘粤秀 3 号’黄瓜杂交种子纯度及真实性鉴定

【目的】‘粤秀 3 号’黄瓜具有生长势强、产量高、抗病及抗逆性强的特点，是华南地区推广面积较多的品种，本研究以期为其建立一套快速、准确、有效的种子纯度鉴定方法。【方法】利用 200 对 SSR 引物，根据杂种带为父母本互补带型的原则，对‘粤秀 3 号’黄瓜及其亲本进行特异性 SSR 标记物的筛选。将种子纯度鉴定结果与田间生物学鉴定结果进行比较，鉴定所筛选 SSR 引物的准确性。选取‘中农 108’‘园丰 6 号’‘津绿 5 号’‘中农 8 号’‘津研四号’5 个黄瓜品种种子及其他 49 份黄瓜种质材料，与‘粤秀 3 号’黄瓜品种同时检测，对所筛选的 SSR 引物特异性进行鉴定。【结果】从 200 对引物中筛选出符合父母带间成互补带要求的两对 SSR 引物（3B-10 和 2B-41）。3B-10 引物经 PCR 扩增后产生 160 bp 的母本特异条带（P1-A）及 190 bp 的父本特异条带（P2-B），测序比对这两条特异性条带，发现 P2-B 在 49~79 bp 处比 P1-A 多了 5 个 6 碱基的简单重复序列。2B-41 引物经 PCR 扩增后产生 218 bp 的母本特异条带（P1-C）和 206 bp 的父本特异条带（P2-D），经测序比对后发现，与 P2-D 相比，P1-C 在 120~131 bp 处有 12 个碱基的缺失。表明两对 SSR 引物均可有效区分‘粤秀 3 号’杂交种子及其父母本，可快速准确地鉴定‘粤秀 3 号’黄瓜种子纯度。此外，两对 SSR 引物的种子纯度鉴定结果均与田间生物学鉴定结果一致。两对引物均可有效区分‘粤秀 3 号’黄瓜种子与‘中农 108’‘园丰6 号’‘津绿 5 号’‘中农 8 号’‘津研四号’5 个黄瓜品种种子及其他 49 份黄瓜种质资源。但 3B-10 在 49 份种质资源中多态性较高，故 SSR 标记 2B-41 更适用于‘粤秀 3 号’的真实性鉴定。【结论】3B-10 和 2B-41 两对 SSR 引物可快速、准确、有效地对‘粤秀 3 号’杂交种子纯度进行鉴定，鉴定操作较简单、成本较低，可替代传统杂交种子纯度鉴定的方法，其商业应用价值极高。     

西瓜杂交组合T-1种子纯度鉴定的SSR标记研究

【目的】研究有效的西瓜杂交组合种子纯度的SSR标记鉴定方法,为室内鉴定的实际应用提供理论依据。【方法】以西瓜杂交组合T-1及其亲本自交系P-1、M-13为材料,在子叶展平期采用CTAB法提取DNA,利用优化的西瓜SSR标记方法进行杂交种子的纯度鉴定,并与田间表型鉴定进行比较。【结果】从36对SSR引物中筛选出3对(MCPI-5、MCPI-16、MCPI-17)稳定性强、可重复性好、在杂交种及其母本之间具有多态性的引物。将这3对引物中的MCPI-5和MCPI-16用于267株T-1杂交种群体纯度鉴定,显示种子纯度为97.75%,与田间种植鉴定结果一致。【结论】3对SSR引物MCPI-5、MCPI-16和MCPI-17可用于西瓜杂交组合T-1种子纯度的室内鉴定。     

黄瓜新品种‘科润99’种子纯度SSR鉴定

‘科润99’是天津科润农业科技股份有限公司黄瓜研究所近年育成的黄瓜新品种,种子质量事关黄瓜安全生产。种子的纯度是衡量种子质量的一项重要指标,直接关系着黄瓜产量及其品质。因此,对黄瓜新品种‘科润99’及其父、母本间进行了特异性SSR标记筛选。本试验共选用了 SSR引物165对,根据杂交种父母本互补带型原则,试验结果中有10对引物在亲本间表现为共显性分离。将SSR标记鉴定结果与田间生物学性状鉴定结果进行比较,其中引物N216和N221不纯种子的检出率分别为2.27%和1.82%,田间鉴定不纯率为2.73%,二者中纯合种子的符合率在99.0%以上,并且该两对引物特带型整齐、异性强,所以其非常适合黄瓜品种‘科润99’,可为其杂交种纯度进行分子标记检测,成为其特异性标记。     

SSR标记鉴定玉米品种真实性及纯度的研究

[目的]探讨杂交玉米及其亲本种子真实性和纯度的分子检测判读标准。[方法]以16个玉米杂交种及其双亲和202个骨干自交系为引物筛选材料,分别构建3个杂交种和3个自交系人工群体的验证试验材料,用CTAB法提取幼苗叶片DNA,选137对SSR引物进行SSR扩增及产物检测,用于玉米品种的真实性鉴定和纯度检测,并与同批移栽至大田的种植鉴定结果相比较。[结果]从137对SSR引物中筛选出了多态性信息含量（PIC值）高、扩增条带清晰和重复性好的20对一级和20对二级核心引物,用一级核心引物对杂交种人工群体进行真实性鉴定,根据一级核心引物的扩增结果,从中选取3对（phi080、umc1196、umc2084）表现较好的引物用于杂交种人工群体的纯度检测。ssR分子检测结果与田间种植鉴定结果具有高度一致性。[结论]利用SSR标记技术鉴定玉米品种真实性和纯度的方法是可行的。     

10个甜、糯玉米品种SSR指纹库的建立及应用

利用40对SSR引物对5个甜玉米品种和5个糯玉米品种及其亲本进行检测,将检测结果整理为品种SSR指纹库,并初步评价各品种及亲本的纯合度,筛选出2组适合这10个品种种子纯度检测的SSR特异引物,为品种遗传分析,纯度检测,真伪鉴别提供帮助.     

番茄品种浙粉702 DNA指纹图谱构建

用CTAB法提取番茄品种浙粉702及其亲本的基因组DNA,通过CAPS和SSR方法,构建DNA指纹图谱,并用于种子纯度的鉴定。以浙粉702及亲本的基因组DNA为模板进行筛选,结果表明,13对SSR引物扩增产物表现为多态性;CAPS引物扩增得到PCR产物经酶切分析,有17对引物的扩增产物表现出酶切多态性。经种子真伪鉴定、纯度鉴定、定向验证,表明构建的浙粉702指纹图谱有效。     

秦优10号油菜杂交种纯度的SSR标记鉴定

SSR分子标记技术是近年来发展起来的一种新型杂交品种鉴定技术,已经在玉米、黄瓜等多种作物杂种鉴定中得到了很好的应用。然而,目前尚未见SSR标记在秦优10号杂交油菜品种鉴定方面的报导。研究首先利用SSR引物在秦优10号的亲本之间进行扩增,从中筛选到2对扩增效果好、条带清晰且差异片断在亲本间能够重复出现的引物,然后利用其对秦优10号杂种进行了分子鉴定。实验和统计学结果表明,真正的杂种F1同时表现出父母本的特征条带,而假杂种只表现出母本的带型,SSR分子标记鉴定的结果与田间种植鉴定的结果有很好的一致性和相关性,说明采用SSR标记可以对秦优10号进行快速准确的鉴定。