软枣猕猴桃黄酮降血糖作用研究

为探究软枣猕猴桃黄酮的降血糖作用,该研究对小鼠进行高脂高糖饲料喂养和链脲佐菌素注射,建立小鼠Ⅱ型糖尿病动物模型。将建模成功的小鼠随机分为6组,每组12只,即空白对照组、高脂高糖模型组、二甲双胍组、黄酮低剂量组、黄酮中剂量组和黄酮高剂量组。通过灌胃二甲双胍和不同剂量的软枣猕猴桃黄酮溶液,60 d后测定小鼠空腹血糖、血清胰岛素水平、肝脏葡萄糖激酶mRNA表达量以及葡萄糖激酶活性。结果表明,与高脂高糖模型组相比,黄酮中剂量组和高剂量组均可有效降低小鼠空腹血糖和胰岛素水平;3种软枣猕猴桃黄酮剂量组均可促进肝脏葡萄糖激酶mRNA表达量,并显著提高葡萄糖激酶活性。该研究为软枣猕猴桃黄酮作为调节糖代谢功能成分开发奠定理论基础。     

酸沉降和铝对马尾松菌根共生体碳代谢影响

对马尾松和马尾松彩色豆马勃菌根植株内碳水化合物及其代谢酶进行测定,研究酸沉降(pH6·0、4·0、3·0、2·0)和铝胁迫(铝理论浓度为75、150μmol·L-1)对其体内糖积累和转运的影响。结果表明:酸沉降和铝胁迫抑制了叶绿素和干质量的积累,两者呈较好的正相关(r=0·949)。叶内可溶性糖含量明显减少;轻度酸沉降促进根、茎内可溶性糖积累,强酸则抑制其积累;酸和铝胁迫抑制了糖向根系转运。低铝胁迫下酸沉降抑制菌根内海藻糖积累,而高铝胁迫促进其积累,并与海藻糖酶活性呈负相关(r=-0·857);轻度酸沉降促进根、茎、叶内葡萄糖积累,强酸沉降抑制其积累;葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和海藻糖酶活性受低铝胁迫诱导和高铝胁迫的抑制。菌根的形成能增加叶绿素和干质量的积累,并减少糖向葡萄糖形式转化。     

外源糖溶液和高浓度CO2处理对白桦叶片糖和蛋白质含量的影响

3年生白桦同时接受3种外源糖溶液(蔗糖、果糖、葡萄糖)和3种高浓度CO2(700、1400、2100μL·μL-1CO2)处理.处理1个月后,测定了叶片的总糖、蔗糖、果糖和蛋白质含量.结果表明:在700μL·L-1和1400μL·L-1 CO2下,外源糖溶液增加了叶片的可溶性糖和蛋白质含量,其中外源蔗糖的效果最好:外源糖溶液与2100μL·L-1CO2结合,会抑制叶片积累总糖和蛋白质:在700μL·L-1和1400μL·L-1CO2下,喷施葡萄糖、果糖的叶片在蛋白质含量上没有明显差别:同700、1400μL·L-1CO2相比,除喷施果糖植株外,2100μL·L-1 CO2明显增加了叶片的总糖、蔗糖、果糖和蛋白质含量:在喷施同种外源糖溶液的情况下,叶片的糖含量与CO2浓度呈正相关性.图6参7.     

外源糖溶液和高浓度CO_2处理对白桦叶片糖和蛋白质含量的影响(英文)

3年生白桦同时接受3种外源糖溶液(蔗糖、果糖、葡萄糖)和3种高浓度CO2(700、1400、2100μLL-1CO2)处理。处理1个月后,测定了叶片的总糖、蔗糖、果糖和蛋白质含量。结果表明:在700μLL-1和1400μLL-1 CO2下,外源糖溶液增加了叶片的可溶性糖和蛋白质含量,其中外源蔗糖的效果最好;外源糖溶液与2100μLL-1CO2结合,会抑制叶片积累总糖和蛋白质;在700μLL-1和1400μLL-1CO2下,喷施葡萄糖、果糖的叶片在蛋白质含量上没有明显差别;;同700、1400μLL-1CO2相比,除喷施果糖植株外,2100μLL-1CO2明显增加了叶片的总糖、蔗糖、果糖和蛋白质含量;;在喷施同种外源糖溶液的情况下,叶片的糖含量与CO2浓度呈正相关性。图6参7。     

长瓣短柱茶种子油等在2BS细胞培养中的延缓衰老效应

将长瓣短柱茶种子油及其它木本食油经酶解处理后,以适当比例加入ＭＥＭ２培养液和培养人胚肺成纤维细胞。测定各油组细胞膜过氧化脂质水平,细胞培养传代数,细胞生长速度变化,细胞贴壁能力和细胞外观形态变化,结果表明长瓣短柱茶种子油具与橄榄油相当的延缓细胞衰老效果,其第４６代细胞的细胞膜过氧化脂质的积累显著低于普通油茶油,长瓣短柱茶油非皂化成分,三油酸甘油脂组。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导试验

以5年生曼地亚红豆杉当年生枝条的茎段、芽苞、叶片和幼嫩根为外植体,以MS添加不同质量浓度的2,4-D,NAA,KT为培养基进行愈伤组织诱导试验。结果表明:曼地亚红豆杉愈伤组织诱导培养基中生长素与细胞分裂素的比例应在10∶1左右;2,4-D与NAA的比例应在2∶1左右。当年生茎段是进行曼地亚红豆杉愈伤组织诱导的较好外植体,诱导率高,愈伤组织生长也较好。暗培养条件更有利于愈伤组织的诱导,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。35℃温水浸泡30 min的处理对抑制褐化有理想的效果,外植体褐化现象得到了极大抑制。     

阿魏酸钠对人大肠癌Moser细胞和乳腺癌MCT7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究大肠癌 Moser 细胞和乳腺癌 MCF7细胞对市售4种中药制剂(斑蟊酸钠、苦参素、华蟾素和阿魏酸钠)的敏感性,以及阿魏酸钠影响大肠癌细胞增殖的可能机理。方法:采用 MTT 法测定药物对细胞增殖的抑制率和药物间的协同抑制作用;酶联免疫法检测 CEA 表达水平;流式细胞法测定细胞周期。结果:4种中药对乳腺癌 MCF7细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,但只有阿魏酸钠可明显抑制大肠癌Moser 细胞的增殖;阿魏酸钠与5种化疗药物联合对 Moser 细胞有协同作用;阿魏酸钠对 Moser 细胞表达CEA 没有影响;阿魏酸钠可诱导 Moser 细胞凋亡。结论:斑蟊酸钠、苦参素和华蟾素对不同肿瘤细胞的抑制效果差异很大;阿魏酸钠不仅有抑制肿瘤细胞增殖的作用,还与化疗药物有协同效果;阿魏酸钠抑制 Moser 细胞增殖的机理似与转化生长因子信号传导途径无关。     

植物生长延缓剂对米老排幼苗生理特性的影响

为深入了解植物生长延缓剂对速生用材树种苗木生理特性的影响,以半年生米老排幼苗为试验材料,采用田间栽培法,测定速生树种米老排幼苗在烯效唑(S3307)、多效唑(PP333)和矮壮素(CCC)3种植物生长延缓剂处理下可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、抗氧化物质活性及内源激素含量等生理指标。结果表明:3种植物生长延缓剂对米老排可溶性蛋白和可溶性糖积累均有显著影响(P<0.05),并且随着植物生长延缓剂浓度的升高,可溶性蛋白和可溶性糖含量呈现先升高后降低的变化趋势,其中,P3[浓度为1 200 mg·L^-1的PP333]处理的米老排幼苗可溶性蛋白和可溶性糖含量最高;除S1和S4[浓度为50和200 mg·L^-1的S3307]处理外,植物生长延缓剂处理后,米老排的丙二醛(MDA)含量均显著小于对照组;植物生长延缓剂还有利于提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶的活性;植物生长延缓剂会抑制米老排赤霉素(GA3)和吲哚乙酸(IAA)积累,其中,浓度为1 200 mg·L^-1的PP333抑制...     

二仙汤及其拆方对GT_(1-7)细胞株GnRH基因转录和表达的影响

目的:运用血清药理学方法,观察补肾方二仙汤及其温肾、滋阴两个拆方对 GT_(1-7)细胞 GnRH基因转录和表达的影响。方法:SD 大鼠连续4天灌服中药二仙汤及两个拆方,末次给药1 h 后取其血清作体外细胞培养实验;用放免法测定 GT_(1-7)细胞 GnRH 的分泌;用 Northern bolt 方法观察二仙汤及其拆方对 GT_(1-7)细胞 GnRH mRNA 的影响。结果:(1)二仙汤全方及其两个拆方均能促进 GnRH 释放,以全方效果最好。(2)孵育24 h 后全方组和温肾组 GnRH mRNA 水平有下降趋势。(3)孵育48 h 后滋阴组 GnRH mRNA 的表达明显增加。结论:中医“肾主生殖”的功能似涉及下丘脑 GnRH 神经元及其调控性腺轴的机能,二仙汤及其拆方能够直接调节 GT_(1-7)细胞 GnRH 的释放及基因表达。     

桃果实着色期糖组分与果皮花青苷含量的相关性分析

为探究桃果实着色期中糖组分与果皮花青苷之间的相关性,以菁香桃、衡阳水蜜桃、大久保及炎陵黄桃为试材,采用高效液相色谱(HPLC)测定桃果中皮花青苷含量变化、果实可溶性糖的种类及含量变化。结果表明:桃果实成熟时,菁香桃果糖占总糖含量的45.76%,葡萄糖16.58%,蔗糖35.14%,山梨醇3.60%;衡阳水蜜桃果糖占总糖含量的48.45%,葡萄糖23.77%,蔗糖38.82%,山梨醇3.31%;大久保果糖占总糖含量的41.12%,葡萄糖24.11%,蔗糖26.20%,山梨醇3.71%;炎陵黄桃果糖占总糖含量的44.61%,葡萄糖26.58%,蔗糖27.98%,山梨醇3.72%。结果表明:果实成熟时,菁香桃果实中的蔗糖含量最高,为22.338 mg·g^-1,葡萄糖含量为30.419 mg·g^-1,果糖含量在各品种中最高,为54.182 mg·g^-1,山梨醇含量为6.91 mg·g^-1。花后70 d左右,果皮中花青苷含量到达最大值,为7.22μg·g^-1。成熟时,其果皮叶绿素、类胡萝...     

真菌诱导子促进白桦悬浮细胞三萜的积累

将促进白桦三萜积累的拟茎点霉属的内生真菌诱导子添加到白桦悬浮培养体系中,研究40,100,400μg·mL-1的真菌诱导子对生长初期、指数生长期和生长末期的悬浮细胞干质量和三萜积累的影响。结果表明:真菌诱导子的不同诱导方案均促进白桦悬浮细胞中三萜的积累,而细胞干质量积累却被抑制;其中最佳诱导条件为在指数生长期的白桦细胞中添加40μg·mL-1的真菌诱导子诱导1天,诱导后细胞中的三萜含量达29.47mg·g-1,比对照增长78%。在优化诱导条件下,考察培养液pH和电导率、细胞苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)活性,发现真菌诱导后6～10h内,引发培养液的碱化和电导率的升高,特别是白桦细胞中PAL和POD酶活性均显著高于对照,分别是对照的5.70倍和5.74倍。研究结果初步说明真菌引发白桦悬浮细胞的防御反应,苯丙烷类代谢途径和氧迸发可能参与真菌诱导三萜的合成。     

唐古特白刺悬浮细胞对盐胁迫的生长与生理响应

以唐古特白刺悬浮细胞为研究对象,对比分析了不同盐(Na Cl)浓度(0、100、150、200、250 mmol·L-1)胁迫下细胞生长状态和可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等生理生化指标随培养时间的动态变化及其相关性。结果表明:(1)盐胁迫对白刺悬浮细胞生长状态影响明显,细胞生长符合Logistic生长曲线模型,其中,盐浓度100 mmol·L-1胁迫下白刺悬浮细胞生长速度最快,之后随着盐浓度的增加细胞生长逐渐受抑。(2)盐胁迫对白刺细胞生理生化指标影响明显,在培养初期,各指标随盐浓度的增加而增加,但随着培养时间的延长这种趋势逐渐减弱,其中,脯氨酸、SOD、MDA含量在培养过程中逐渐表现为随盐浓度的增加呈先增高后降低的趋势;在相同盐浓度胁迫下,渗透调节指标中,可溶性糖含量随培养时间的延长最先达到最大值,抗氧化酶中的SOD较POD更早达到最大值,分别是渗透调节和抗氧化酶调节的第一道防线。(3)白刺细胞鲜质量分别与可溶性糖、丙二醛含量呈极显著和显著负相关,各生理指标之间的相关性均达极显著正相关,表明盐胁迫下白刺细胞内生理生化的平衡是通过多种物质的协同作用来调节的。     

四川桤木上胚轴的离体培养与植株再生

通过直接诱导四川桤木(AlnuscremastogyneBurkill)幼芽上胚轴分化不定芽的途径获得了再生植株,比较了不同植物生长调节物质、糖类及其浓度在离体培养中的效应。认为四川桤木不定芽的分化需经过附加6-BA的WPM培养基的预培养和移植培养2个阶段;经45d的预培养和20d的移植培养,每个外殖体平均可以获得3 4～9 8个不定芽。培养基中糖的种类及浓度对不定芽的诱导有显著的影响,认为3%的蔗糖和葡萄糖适宜于增殖培养基的碳源;生根受生根培养基、增殖培养基中糖的种类和浓度的影响,以3%的葡萄糖为碳源适宜于不定芽及其根系的分化和生长,生根率可达到93 3%～100%;在蛭石基质中炼苗成活率可达100%。     

刺山柑腋芽的组织培养快繁技术研究

以从意大利西西里岛引进的刺山柑带腋芽茎段为外植体,进行了预处理、丛芽诱导、丛芽增殖和生根、再生植株炼苗等研究,采用正交设计筛选出各阶段的适宜培养基.结果表明:在诱导阶段,较低的激素水平能促进幼芽萌发,其适宜的培养基为DKW+0.3 mg·L-16-BA+0.05 nag·L-1NAA+20 g·L-1庶糖;继代增殖阶段,丛芽增殖系数与6-BA用量成正比,但随着6-BA用量加大或长期在高浓度6-BA上培养,芽苗多且细弱,不适合做生根诱导,其适宜的培养基为DKW+0.3 mg·L-16-BA+0.025 mg·L-1NAA+30 g·L-1庶糖;生根培养阶段,其适宜的培养基为1/2MS+0.2 nag·L-1 IBA+100～200 mg·L-1 VB1+20 g·L-1庶糖,生根率87%.生根组培苗移植至草炭灰:珍珠岩(3:1)基质中成活率为92.31%.     

油松毛虫取食和剪叶刺激胁迫下油松的蛋白质表达差异分析

【目的】研究自然环境条件下剪叶和油松毛虫不同取食刺激程度双重诱导对油松体内蛋白质表达的影响,揭示油松诱导防御反应的蛋白质基础。【方法】在河北省平泉县的油松-山杏混交林中,选取15年生左右生长势一致的油松,进行树上套笼饲养10头、30头油松毛虫和剪叶处理,以未处理油松为对照,采用双向电泳法测定油松体内蛋白质表达差异。【结果】通过蛋白质点表达量的计算,与对照相比,油松毛虫取食及剪叶刺激后,均有特异表达蛋白点、消失蛋白点、上调蛋白点及下调蛋白点,但不同处理间蛋白点的表达差异不同。对差异蛋白点进行质谱鉴定,数据库检索结果表明,油松毛虫取食后特异表达的蛋白点是叶绿体ATP合酶CF0β亚基、抗坏血酸过氧化物酶、噻唑生物合成酶、Lhcb5蛋白、ATP合酶β亚基以及蛋白类谷胱甘肽S-转移酶,下调表达的蛋白点是蛋白酶亚基和假定蛋白CL304Contig1_01;剪叶刺激后特异表达的蛋白点是tau蛋白类谷胱甘肽S-转移酶和Rubisco加氧酶,下调表达的蛋白点是磷酸甘油酸激酶Ⅰ和核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基。进一步分析表明,取食刺激处理后,胁迫和防御相关蛋白高度表达,并且30头松毛虫取食后,与蛋白合成相关的蛋白质也特异表达;剪叶处理后,胁迫和防御相关蛋白也有特异表达,而且能量代谢相关蛋白下调。说明取食和创伤刺激可明显诱导油松防御有关蛋白的表达、光合作用的增强、蛋白质的合成和能量代谢的降低等防御反应。【结论】取食和剪叶刺激可明显诱导油松防御有关蛋白的高表达、促进光合作用的增强和蛋白质的合成,降低能量代谢等,这些变化应是构成油松防御反应的蛋白质基础。     

杞柳的化学成分及其木质素微区分布的研究

采用传统的化学成分测试方法和激光扫描共聚焦显微镜技术(CLSM)研究了杞柳的化学成分以及木质素在各细胞及纤维细胞各微区的分布,分析了株高不同部位化学成分的变异规律。结果表明:杞柳的1%Na OH抽提物、热水抽提物、冷水抽提物、苯醇抽提物、综纤维素、α-纤维素、酸不溶木质素、酸溶木质素、多戊糖和灰分分别为32.11%、10.85%、7.11%、3.27%、70.46%、35.50%、20.18%、4.50%、15.51%、0.90%;在不同部位,除了α-纤维素和多戊糖含量差异不显著,其余各指标均差异显著;木质素在各细胞及纤维细胞各微区分布不均一,导管细胞壁木质素浓度高于木纤维和射线,纤维细胞角隅处木质素浓度高于次生壁和复合胞间层。     

银腺杨PagWOX11/12a基因对茎生长发育的影响

[目的]分析PagWOX11/12a基因对杨树生长发育的影响，为进一步研究该基因在木本植物中的调控机制奠定基础。[方法]利用生物信息学方法及相关软件进行系统发育进化树构建、序列比对及生化特征分析。利用qRT-PCR分析其组织特异性表达模式。利用转基因植株35S::PagWOX11/12a-SRDX(DR)，分析显性抑制PagWOX11/12a后杨树的表型。[结果] PagWOX11/12a基因可编码含255个氨基酸的蛋白质，该基因在84K的不同组织中均有表达。对DR转基因植株的表型分析表明，与非转基因植株相比，显性抑制该基因可导致茎中韧皮部细胞、髓心细胞及木质部纤维细胞长度变小，节间伸长受到抑制，株高明显降低。[结论]PagWOX11/12a基因通过影响节间伸长参与调控了杨树的高生长，该研究为进一步揭示PagWOX11/12a基因参与杨树生长发育的调控机制提供了参考。     

杨树热激转录因子HsfA1d的克隆、表达及单核苷酸多态性分析

利用RT-PCR方法,首次由小叶杨受热激胁迫后构建的cDNA文库中扩增获得一热激转录因子HsfA1d cDNA克隆,测序结果表明克隆的PsHsfA1d cDNA片段总长为2036bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,大小为1449bp,可编码长度为482个氨基酸残基的蛋白质,所推导的蛋白质氨基酸序列在HSF DBD结构功能域与拟南芥AtHsfA1d和水稻OsHsfA1蛋白的相似性分别为86.3%和87.4%。组织特异性Realtime-PCR结果显示,PsHsfA1d主要在杨树叶片和根部组织中高丰度表达。非生物胁迫、激素及糖诱导表达表明,PsHsfA1d不仅受高温、干旱与盐诱导表达,还受到激素中GA_3与ABA,及葡萄糖与蔗糖信号的上调表达。组合利用MEGA4.0和DnaSP4.50.7软件对小叶杨36株基因型个体的PsHsfA1d序列进行比对和分析,共检测到207个单核苷酸多态性(SNP)位点,SNP频率为1/16bp,多样性指数π为0.00772。在编码区域,共检测到69个SNP位点,其中37个为同义突变,31个为错义突变,1个为无义突变;非同义突变与同义突变的比率0.132<1,推测在小叶杨物种演化过程...     

长松萝中非核糖体肽合成酶NRPS基因克隆与鉴定

非核糖体肽具抗生素、抗病毒、抗癌及免疫抑制剂等重要的药用价值。以长松萝的地衣型真菌为研究材料,通过同源克隆和Gene walking的方法获取长松萝地衣型真菌全长非核糖体肽合成酶基因(Us NRPS),并对得到的Us NRPS进行生物信息学分析、分子系统进化分析及基因表达分析。结果表明:在地衣型真菌中,非核糖体肽在长松萝中为首次发现,BLAST比对表明其为NRPS基因的A结构域,生物信息学分析显示Us NRPS蛋白是一种非分泌蛋白,位于细胞质基质中;分子进化分析显示Us NRPS与埃默森蓝状菌(Rasamsonia emersonii)的NRPS基因的A结构域蛋白聚为一类;RT-PCR分析表明:2%肌醇、10%甘露醇、2%山梨醇、2%葡萄糖、10%葡萄糖、0.2%谷氨酰胺、1%甘氨酸、0.2%丙氨酸能够诱导NRPS基因的轻微表达,2%、10%蔗糖和果糖均能诱导NRPS基因的强烈表达;0.2%、1%的天冬氨酸均抑制NRPS基因的诱导表达。     

毛竹微管蛋白基因PeTua3的原核表达及其 功能初步研究

作为细胞骨架的重要组成部分,微管蛋白在细胞壁发育过程中起着重要的调控作用。采用RT-PCR技术从毛竹叶片中克隆到一个微管蛋白(Tua3)同源基因的cDNA序列,长1 356 bp,编码451个氨基酸,命名为PeTua3。构建原核表达载体pET-32b-PeTua3,并将其转入大肠杆菌中诱导表达。蛋白电泳检测结果表明:温度和诱导时间对PeTua3基因蛋白的表达影响差异显著,其中,在37℃用0.4 mmol.L-1IPTG诱导2 h的表达效果最好。用PeTua3基因体外表达的重组蛋白处理拟南芥种子,其幼苗上胚轴明显增粗,侧根增多;超薄切片显微观察显示,重组蛋白处理的拟南芥上胚轴和主根的薄壁细胞数量均增多,细胞体积变大,维管束增粗。