DNA甲基化抑制剂DAC处理对鸡Wnt10a基因表达及其启动子甲基化的影响

Wnt10a基因在细胞增殖、分化及迁移中发挥着重要作用,参与调控机体生长发育的诸多生物学过程,但对鸡Wnt10a基因表达的表观遗传调控机制尚不清楚.为探究DNA甲基化对Wnt10a基因表达的影响,以DMSO处理为对照组,5-Aza-2'-deoxycytidine (DAC)处理为试验组,分别用0.25、0.5、1.0...     

DNA甲基化及检测方法研究进展

DNA甲基化是一种重要的遗传修饰,是表观遗传学(epigenetics)研究的重要内容.综述了目前常用的甲基化检测方法的原理及其在检测DNA甲基化中的优缺点,如MSAP检测方法、哑硫酸氢盐法、基因芯片技术等.随着对表观遗传学研究的深入,DNA甲基化检测方法也有了快速的发展,将有利于科学工作者更快更好的检测出DNA甲基化.     

亚硫酸氢盐测序法检测小鼠胚胎Oct4启动子区甲基化

应用亚硫酸氢盐测序技术,以昆明小白鼠几种不同时期体内胚为研究对象,对其单拷贝基因Oct4启动子区进行甲基化检测.基因组经低熔点琼脂糖包埋、亚硫酸氢盐修饰后,运用巢式PCR对处理后的DNA进行两轮扩增,扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测和单克隆测序进行分析.结果表明,亚硫酸氢盐测序法是一项敏感而有效的DNA甲基化检测手段.     

绵羊GDF—8内含子Ⅱ的克隆及测序

在世界上首次对绵羊GDF－8内含子Ⅱ进行了克隆及测序，结果表明，绵羊GDF－8内含子Ⅱ的全序列全长为2046bp，与猪的内含子Ⅱ比较后发现，两者之间的同源性仅为57％，两者的序列长度相差69bp，该序列已录入Genbank，检索号为AF266758。     

DNA甲基化及检测方法研究进展

DNA甲基化是一种重要的遗传修饰,是表观遗传学（epigenetics）研究的重要内容。综述了目前常用的甲基化检测方法的原理及其在检测DNA甲基化中的优缺点,如MSAP检测方法、亚硫酸氢盐法、基因芯片技术等。随着对表观遗传学研究的深入,DNA甲基化检测方法也有了快速的发展,将有利于科学工作者更快更好的检测出DNA甲基化。     

多脊椎蒙古羊Hoxc8 exon-1和exon-2的序列分析

参考牛的Hoxc8基因序列设计引物,扩增正常蒙古羊（胸椎数13）和多脊椎蒙古羊（胸椎数14）Hoxc8的exon-1和exon-2基因,对得到的序列进行生物信息学分析。结果表明,经序列比对二者的DNA序列,除两侧个别碱基有差异外,中间序列完全一致。蒙古羊Hoxc8的exon-1和exon-2序列分别与其他物种进行同源性...     

转 Hoxc13基因绵羊的羊毛氨基酸组成及含硫量和含氮量分析

为评估转Hoxc13基因绵羊的羊毛化学特性,以中国美利奴(新疆军垦型)超细毛品系为对照组,转Hoxc13基因绵羊为试验组,应用水解法测定羊毛17种氨基酸,质量法测定羊毛含硫量,凯氏定氮法测量羊毛含氮量。结果表明,转Hoxc13基因绵羊的羊毛中天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、组氨酸、苯丙氨酸和精氨酸的含量与对照组差异不显著(P>0.05),蛋氨酸的含量显著低于对照组(P<0.05),羊毛含硫量与对照组差异不显著(P>0.05),羊毛含氮量显著高于对照组(P<0.05)。以上结果说明,转Hoxc13基因绵羊的羊毛化学成分没有明显改变。     

绵羊TTF-1基因的克隆及DNA多态性分析

自行设计2对引物,采用PCR方法从绵羊基因组中扩增获得2条目的片段,将其克隆转化并进行酶切鉴定及测序分析,结果表明所得序列为绵羊甲状腺转录因子-1(TTF-1)基因第1和第2外显子片段(GenBank登录号分别为DQ010919和DQ010920).分析发现,2条序列分别由318和249个核苷酸组成,编码105和82个氨基酸组成的多肽.同源性比对显示,绵羊TTF-1基因的核酸和蛋白质序列在分子进化上相当保守.利用PCR-SSCP方法对TTF-1基因在不同繁殖力绵羊品种间的DNA多态性检测表明,2个克隆片段的核酸序列在品种间无差异.     

绵羊外周血中游离DNA提取及SRY基因检测

[目的]外周血中游离的DNA主要是指存在于血浆/血清等循环系统里的一些小片段DNA,应用在一些疾病的诊断以及非创伤性产前诊断方面.研究三种方法从绵羊外周血浆/血清中分离提取游离DNA,建立高效的外周血游离DNA提取方法,并对SRY基因进行PCR扩增.[方法]利用加热法、酚氯仿法以及试剂盒法对500 μL血浆/血清中游离的DNA进行提取.根据游离DNA片段大小的特点分别设计扩增产物大小为168 bp的检测引物和178 bp的SRY基因引物进行普通PCR检测.[结果]利用加热法、酚氯仿法、试剂盒法都提取到了游离的DNA,PCR后通过琼脂糖凝胶电泳检测到了168 bp的目的片段.同时利用PCR扩增到了178 bp的SRY基因目的片段.[结论]不同的提取方法均可有效提取分离绵羊外周血血清和血浆中游离的DNA片段,能够用于SRY基因的检测.     

藏系绵羊MSTN基因在不同年龄不同组织的表达定量研究

[目的]研究MSTN基因在藏系绵羊不同年龄、不同组织的表达差异。[方法]根据GenBank已发表序列（NM_001009428．1）设计l对引物,以藏系绵羊组织总RNA为模板,采用实时荧光定量PCR技术（QRT—PCR）分析了MSTN基因在不同年龄阶段的真胃、瘤胃、腿肌和心肌中的基因表达量。[结果]经过内参基因校正后,综合4个组织分析,MSTN基因在6月龄藏系绵羊的相对表达量最高,是12月龄藏系绵羊的2．52倍,是羔羊的2．24倍,是9月龄的1．30倍（尸〈O．05）。且MSTN基因在腿肌中的表达量最高,在其他组织几乎未表达,在腿肌中的表达量是其瘤胃的3984．78倍,是心肌的602．69倍（P〈0．01）。[结论]为MSTN蛋白抗体的正确利用奠定了基础。     

不同纤维水平日粮对绵羊瘤胃内环境的影响

试验选用体况良好、体重50kg左右的苏尼特绵羊9只,随机分为3组,每组3只,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组日粮NDF含量分别为64.38%、54.59%、42.71%。研究日粮纤维水平的变化对绵羊瘤胃内环境的影响,试验结果表明:随纤维水平的增加瘤胃pH显著增加(p(0.01);氨氮、和总挥发性脂肪酸浓度与之相反,Ⅲ组显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(p(0.01);乙酸摩尔浓度百分比随纤维水平降低而显著降低(p(0.05),丙酸和丁酸摩尔浓度显著升高(p(0.05);高纤维日粮组的乙酸:丙酸比例显著高于其它两日粮组(p(0.01),日粮纤维水平的变化,改变了瘤胃发酵的模式。     

不同日粮条件下绵羊皱胃食糜氨基酸的研究

利用四头装有瘤胃和皱胃瘘管的阉公羊以及四头未装瘘管的阉公羊进行两系列实验,测定通过瘤胃蛋白、皱胃氨基酸通过量以及瘤胃消化代谢和氮的利用。分别给试验绵羊(湖羊)饲喂未处理大豆粉日粮(Ⅰ),甲醛处理大豆粉日粮(Ⅱ),稻草 精料日粮(Ⅲ)和稻草 精料 异丁叉二脲日粮(Ⅳ),皱胃食糜中各种氨基酸含量未见有明显改变。饲喂甲醛大豆粉日粮时,流经皱胃的各种氨基酸增加,饲喂含异丁叉二脲日粮时则明显减少。皱胃总氨基酸(TAA)通过量与通过瘤胃蛋白氮量,呈强正相关。日粮对流经皱胃总必需氨基酸(TEAA)中各种氨基酸比例以及总非必需氨基酸(TNEAA)中各种氨基酸比例没有明显影响。饲喂日粮Ⅰ时流经皱胃的TEAA/TAA和TNEAA/TAA分别为48.62％,51.38％;日粮Ⅱ时为48.42％,51.58％;日粮Ⅲ时为48.18％,51.82％;日粮Ⅳ时为48.26％和51.74％。各日粮间差异不显著。     

利用交错式热不对称PCR法获取多脊椎蒙古羊Hoxc8启动子序列的研究(英文)

[目的]探索获得蒙古羊Hoxc8基因启动子序列的方法。[方法]尝试利用交错式热不对称PCR法,获得蒙古羊Hoxc8启动子序列。[结果]通过PCR获得的序列不理想,测序结果无法与已知序列相匹配。虽然利用交错式热不对称PCR法未获得蒙古羊的Hoxc8的启动子序列,但可为今后的相关研究提供借鉴。[结论]该研究为进一步分析蒙古羊Hoxc8的启动子区域的甲基化状态奠定了基础。     

利用交错式热不对称PCR法获取多脊椎蒙古羊Hoxc8启动子序列的研究

[目的]探索获得蒙古羊Hoxc8基因启动子序列的方法。[方法]尝试利用交错式热不对称PCR法,获得蒙古羊Hoxc8启动子序列。[结果]通过PCR获得的序列不理想,测序结果无法与已知序列相匹配。虽然利用交错式热不对称PCR法未获得蒙古羊的Hoxc8的启动子序列,但可为今后的相关研究提供借鉴。[结论]该研究为进一步分析蒙古羊Hoxc8的启动子区域的甲基化状态奠定了基础。     

乌冉克羊及其生产性能的研究

乌冉克羊是草原放牧型蒙古羊的1种类型群。本论文阐述了乌冉克羊的形成，种质特性、体尺、体重、生长发育、产肉力、繁殖力及适应性等，并在产肉力指标上与我区乌珠穆沁羊、苏尼特羊作了对比，最后还提出了一些建议。     

成年绵羊皮肤成纤维细胞系的建立

本文研究了成年绵羊皮肤成纤维细胞的分离、培养、纯化、冷冻和生长特征。对比了组织块培养和消化培养两种培养方法。根据上皮细胞与成纤维细胞对酶消化敏感性不同及二者贴壁速度的差异,将成纤维细胞分离纯化,建立成年绵羊皮肤成纤维细胞系。     

天山北坡放牧绵羊的限制性矿物元素调查

研究结果表明,天然草场牧草中13种矿物元素含量呈明显的季节性变化,牧草含P量从夏草场的0.12μg/g降至早春草场的0.04μg/g;含Fe量则从夏草场的811μg/g上升到早春草场的4557μg/g;牧草中元素Mn与Fe之间有明显的拮抗作用,Fe过高则影响Mn的吸收;Mo、Cu比的失调。同样影响绵羊对Cu的吸收。通过全面分析对比,初步确定在新疆天山北坡乌鲁木齐地区天然草场上放牧的羊群,存在着P、S、Se、Zn、Mn和Cu6种限制性矿物元素的季节性亚临床症状的营养紊乱现象。     

绵羊膀胱瘘与皱胃瘘手术

绵羊膀胱瘘与皱胃瘘可以方便地取材,研究尿液与胃液的分泌及理化分析,在疾病诊疗,尤其在膀胱修补及真胃手术中具有临床意义。     

绵羊8—16细胞胚胎的超微结构

利用透射电镜技术研究了绵羊８－１６细胞胚胎的超微结构，并与２细胞胚胎作了比较．结果表明，８－１６细胞胚胎卵裂球间以间隙连接联系，胞质主要成分是一种带有界膜的囊泡，线粒体丰富，以带帽线粒体为主，也有少量横嵴线粒体，１６细胞胚胎中，后者的比例高于８细胞胚胎．与２细胞胚胎相比，８─１６细胞胚胎的高尔基体发达．但滑面内质网数量减少、８细胞胚胎卵裂球具有数个致密的球形或环形核仁前体，１６细胞胚胎的核仁中出现次级小泡腔，标志着ｒＲＮＡ开始合成．