益生菌混合培养富集锌条件优化研究

[目的]优化益生菌混合培养富集锌的条件.[方法]以青春双歧杆菌ys01、德氏乳杆菌保加利亚亚种1.148 0和嗜酸乳杆菌ysh2混合培养富锌.通过单因素试验和中心组合试验对富锌条件进行优化.[结果]最佳富锌培养条件为:低聚果糖10 g/L、Zn2+ 0.41mg/ml、蛋白胨12.2 g/L、初始pH 6.0、接种比例3∶2∶1、接种量4.6％、培养时间72 h.在该条件下,青春双歧杆菌ys01、德氏乳杆菌保加利亚亚种1.1480和嗜酸乳杆菌ysh2混合菌体锌的含量为550μg/g.[结论]以试验所得富锌混合菌体制备的富锌酸奶发酵剂具有良好的发酵性能..     

复合益生菌液态发酵黄芪的制备方法

为研究复合益生菌液态发酵黄芪的制备方法,提高发酵液在临床应用中的作用效果,利用排列组合的方法,将枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌按顺序接种至同一培养基,培养一定时间后观察各菌种的生长情况,确定菌种接种顺序;然后再用单因子试验法,以发酵液中菌体数量为指标,确定枯草芽孢杆菌的发酵时间,乳酸菌和酵母菌的接种时间、接种量以及发酵时间;最后,按优化的培养条件进行中试扩大试验,分别测定发酵液中各种菌体的数量。结果显示,利用多菌种对黄芪提取液进行混合发酵的制备方法能够实现,接种顺序为枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌;最优发酵条件为:枯草芽孢杆菌以3. 0%的接种量,于37℃培养24 h后,以2. 0%的接种量接入酵母菌,于28℃培养48 h后,再以0. 5%的接种量接入乳酸菌,于37℃静置培养24 h;中试扩大试验所得发酵液中,枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌含量分别为28. 52×10~8、5. 71×10~8、9. 34×10~8cfu/mL,终末pH值为4. 55。因此,利用复合益生菌液态发酵黄芪的制备方法具有较好的可行性。     

用两个不同种的土壤农杆菌Agrobacterium tumefaciens和A.rhizogenes对马铃薯细胞进行复合转化的研究

致癌土壤农杆菌Agrobacterium tumefaciens和致根土壤农杆菌A.rhizogenes都具有将其T—DNA整合到植物染色体上,从而对植物细胞进行遗传转化的能力,在植物遗传工程的研究中具有重要意义。本文报道了用这两个不同种的土壤农杆菌,用两种不同的复合侵染方法,对马铃薯块茎切块的细胞进行复合转化的研究结果。一步侵染法是将这两个不同种的细菌悬浮液混合以后,接种于马薯块茎切块上;两步侵染法是先用致根土壤农杆菌侵染马铃薯块茎切块,得到转化的毛根并在无激素的培养基上继代培养无菌毛根一年以后,再将毛根切段用致癌土壤农杆菌接种。对转化细胞特殊标记物质Opine进行电泳分析的结果表明,这两种侵染方法都可以得到复合转化的马铃薯细胞和组织。但是,一步法比两步法具有更多的优越性。这种复合转化现象对于在植物遗传工程的研究中,一次转移多个基因具有重要的意义。     

犬腺病毒2型的致弱和狐脑炎弱毒疫苗的研究

将犬腺病毒2型(CAV—2),用PK_(15)细胞继代53代后毒力减弱,然后用A_(72)细胞继续继代20代。经对继代毒的毒力测定和稳定性试验证明,53—73代毒对狐无致病性,而且毒力稳定,我们选用60—69代毒作制苗种毒成功地研制出狐狸脑炎弱毒苗。试验表明,该苗具有制造技术先进、使用安全、免疫原性好等优点。狐免疫10~(4.5)TCID_(50)/ml接种疫苗,保护率可达100％。该苗免疫21天后能耐受10~(-2)CAV—l强毒的攻击,免疫期为一年。现场应用26754头份均取得良好的免疫效果.     

马传染性子宫炎疫苗预防效果的研究

用静脉、皮下、子宫内接种法(或三种方法结合)给小型母马接种由马传染性子宫炎杆菌制成的灭活苗。接种后血清抗体凝集滴度为1:64至1:1024。小型母马用马传染性子宫炎杆菌96小时培养物于子宫内攻毒,出现马传染性子宫炎症状,但接种疫苗母马的症状比未接种疫苗的轻微。从攻毒母马渗出物和子宫病料中分离到马传染性子宫炎杆菌。 用凝集试验(平板法、试管法和抗球蛋白法)和酶联免疫吸收试验测定被感染母马子宫内抗马传染性子宫炎杆菌抗体滴度较低,而用被动血凝试验法测定其抗体滴度较高。 马传染性子宫炎,是马类动物的一种性病,在欧洲、澳大利亚和美国均有发生。其病原菌是一种革兰氏阴性球杆菌,临床症状消失后,还能在母马阴蒂窝和阴蒂窦中存在一个很长的时期。 为防制马传染性子宫炎,已采用各种不同的治疗方法(如抗菌素疗法、抗菌溶液疗法、磺胺类药物软膏疗法等)和人工授精措施。虽然抗菌素疗法对种公马似乎有一定疗效,但对母马疗效并不显著。本文旨在探讨疫苗接种对小型母马传染性子宫炎的预防效果。     

马鼻疽的临床症状与诊断防治

马鼻疽又被称为"串槽"或"吊鼻子",是一种由鼻疽杆菌引起的急性、流行性暴发的人畜共患细菌性传染病.相比于其他动物,马属类动物对于此病较为敏感.此病主要侵袭成年马匹的呼吸道系统、淋巴系统及皮肤,在其气管黏膜、鼻腔、喉头或皮肤上生成特异性瘢痕、鼻疽结节或者溃疡,在其淋巴结、肺部及其他实质气管形成鼻疽性的结节.此病没有明显发...     

芽孢杆菌对感染蔓割病甘薯活性氧代谢的效应

以芽孢杆菌菌株25-6、25-9为材料,研究了通过接种芽孢杆菌提高甘薯对蔓割病保护酶系统的启动机制.结果表明:接种芽孢杆菌菌株后,甘薯蔓割病病原菌含量下降,同时甘薯叶片的MDA含量也降低,植株的活性氧保护酶系统代谢水平提高;但处理组的甘薯叶片活性氧保护酶系统代谢水平下降.说明接种芽孢杆菌可有效增强甘薯抵御蔓割病菌的能力.     

应用对流免疫电泳快速诊断马鼻疽

鼻疽是由鼻疽杆菌引起马、骡、驴等多发性的一种传染病。马多取慢性经过,驴、骡多为急性。人也可感染。对此病通常采用鼻疽菌素点眼、眼睑皮内注射、皮下注射(热反应)、补反方法进行检疫,并在控制或扑灭马鼻疽上起了很重要的作用,但也存有不足之处。如有的方法操作麻烦,有的检出率偏低等。为了摸索出个快速检疫马鼻疽的新方法,我们结合流行病学调查、临床检查、鼻疽菌素点眼及琼脂双扩散,进行了对流免疫电泳试验。现将试验情况报告如下:     

猪喘气病弱毒疫苗的研究 猪肺炎霉形体兔化弱毒株的培育

 用5株猪肺炎霉形体分别人工感染乳兔，仅济南株适应于乳兔。经过长期继代，培育出1株毒力显著减弱并保持良好免疫原性的兔化弱毒株。该株对乳兔的最佳接种部位是胸腔，最小感染量为0.5×10#+（-5）克，在乳兔体内存活14天左右。在成兔体内可产生血凝抗体，其最小感染量为2×10#+（-5）至2×10#+（-6）克。扫描电镜观察表明，兔化弱毒株在乳兔支气管内繁殖，纤毛未见明显损伤。该株对猪的潜伏期的几何平均值为27.9天，对支气管纤毛损伤轻微，不发生同居感染，不影响增重，保护率为70-80%，免疫期6个月以上，最小免疫剂量为5×10#+（-2）克，气管、胸腔、滴鼻、气溶胶接种均可产生免疫力。用兔化弱毒株作种子制造大兔冻干苗15批，先后在北京、广东、福建、浙江、江西、湖南、宁夏、河北等8个省（市）自治区的30个猪场，接种20个不同品种、不同年龄的10363头猪，证明安全有效。兔化弱毒株的培养成功，为今后开展猪喘气病的预防工作创造了有利条件。     

发酵鸭的优化工艺研究

研究用复合发酵剂生产发酵鸭的工艺条件,通过正交试验确定了鸭胚腌制的最佳条件为食盐用量5.0％、蔗糖用量3.0％、复合香辛料用量4.0％、腌制时间16 h;通过单因素试验与正交试验确定了最佳发酵条件:植物乳杆菌、戊糖乳杆菌、变异微球菌与汉逊德巴利氏酵母菌之间的比例为1∶2∶1∶2(菌群数量比)、接种量3.0％、发酵温度32℃、发酵时间23 h.采用低盐控温发酵新工艺,在优化的工艺条件下制作的发酵鸭产品pH值为5.12,氨基酸态氮含量为0.72％,感官特性良好,理化指标及微生物指标均符合成品质量要求.     

饲用枯草芽孢杆菌发酵工艺的优化及菌剂制备

[目的]为饲用枯草芽孢杆菌的大规模生产奠定基础.[方法]通过单因素试验和正交试验,对发酵培养基配方及其发酵条件进行优化.[结果]饲用枯草芽孢杆菌的最佳培养基为:葡萄糖3％、酵母浸膏1.5％、磷酸氢二钠0.2％、磷酸二氢钠0.1％、硫酸镁0.1％、酵母浸粉0.5％.饲用枯草芽孢杆菌的的最适发酵条件为:温度38℃,初始pH7.0 ～7.2,摇床转速180 r/min,接种量7％.选择木屑质量与发酵液体积(m/V)的混合比为3∶5,继续高温发酵16 h,芽饱产量可达到5.18×1010CFU/g.[结论]该研究可为饲用枯草芽孢杆菌的工业化生产提供了数据支持.     

烟草花叶病毒弱毒株的筛选及其交互保护作用

采用高温、亚硝酸及两者的复合处理对烟草花叶病毒 (TMV)强毒株进行诱变 ,均可有效提高突变频率 ,而且复合处理还有较好的协同效应 .经生物学接种鉴定及血清学方法筛选 ,从中获得了 TMV- 0 17和TMV- 15 2 2个弱毒株 .用正交设计法考察病毒接种浓度、接种间隔时间、接种部位以及普通烟生育期等因素对弱毒株交互保护作用的影响 ,发现以烟株生育期和接种间隔时间两因素影响最大 .本试验结果表明 ,在烟草团棵期 ,弱毒株和强毒株接种间隔时间为 17d时 ,交互保护作用效果最好     

利用抑制差减杂交筛选稻瘟菌继代接种菌株差异表达基因

稻瘟菌是重要的水稻病原微生物,通过各种变异机制提高自身对水稻的致病力.通过继代接种可使稻瘟菌发生适应性变异,从而增强致病力.为了解相关适应性变异的分子机制,利用稻瘟菌原始菌株与在水稻上继代接种的第四代菌株构建了抑制消减杂交文库.经过PCR验证及测序分析,共计获得168条EST非冗余序列.拼接后,Unigene的数量为110个.利用不同数据库,进行BLASTX分析,获得了与这些序列推测蛋白相似的功能蛋白,分析蛋白功能注释表明这些蛋白主要与合成和信号传导相关.GO分析表明相关蛋白涉及生命活动的多个方面,但主要集中于细胞生长发育、核酸结合及外界刺激的感知及传导.     

家禽疫苗的接种方法及注意事项

1.注射法 1.1皮下注射法皮下注射的部位在家禽的颈背中部或稍低处.局部消毒后.用食指和拇指将颈背部皮肤捏起呈三角形,使之形成一个囊,在囊下部注人针头,方向白头部插向体内,按量注入即可.本办法适用于接种弱毒活疫苗及灭活疫苗.如鸡马立克氏病疫苗、鸡新城疫、油乳剂灭活疫苗等.     

家禽疫苗的接种方法及注意事项

1.注射法 1.1皮下注射法皮下注射的部位在家禽的颈背中部或稍低处.局部消毒后.用食指和拇指将颈背部皮肤捏起呈三角形,使之形成一个囊,在囊下部注人针头,方向白头部插向体内,按量注入即可.本办法适用于接种弱毒活疫苗及灭活疫苗.如鸡马立克氏病疫苗、鸡新城疫、油乳剂灭活疫苗等.     

142种中药对鼻疽杆菌的体外抗菌作用

国内外的许多研究者曾对鼻疽的治疗作过不少工作,但至今尚未找到一种十分有效的药物。而关于中药对鼻疽的治疗效果,也没有见过正式的报道。鉴于中药是我国劳动人民数千年来与疾病作斗争的结晶,近年来的许多试验亦已证明它具有广泛的抗菌作用,本教研组乃以寻求有效治疗鼻疽的药物为目的,首先进行了142种中药在试管内对鼻疽杆菌的抗菌试验,兹将所得结果报道于后。     

猪链球菌C_(135)弱毒株的培育

本试验用强迫猪链球菌反复通过不易感的鸡体继代的生物学方法,选育出一株弱毒猪链球菌。测定结果表明,其培养、生长、染色、形态和生化反应等基本上保持了原型菌的特性,免疫原性强,安全性与稳定性好。     

草莓叶柄托叶外植体快速繁殖的研究

为提高脱毒草莓试管种质材料的利用率,提高脱毒草莓试管苗的继代增殖倍数,缩短生产周期,降低脱毒草莓试管苗的成本,在草莓试管苗继代培养时进行了单个叶柄托叶接种培养试验。在"MS+6-BA 1.0 mg.L-1~2.0 mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1"培养基上不经过愈伤组织阶段,直接从叶柄基部的托叶部位再生了试管植株,植株再生率达100%,最高再生试管苗数达12.5株.托叶-1;将单叶柄托叶接种培养法应用于脱毒草莓的继代快繁,草莓试管苗的最高增殖倍数达传统方式的9倍;利用单叶柄托叶接种法继代繁殖草莓脱毒苗可大幅度提高草莓试管苗的继代增殖倍数,缩短生产周期,降低成本。     

人工发酵生产臭冬瓜的工艺

进行了人工发酵生产臭冬瓜的工艺研究,通过对20种菌种组合方式的试验,最终得到两种可以产生理想气味且气味能够保持的组合,分别为:(1)短小芽孢杆菌、腐败希瓦菌、异常汉逊酵母分别按2%(V/V)的接种量接种;(2)短小芽孢杆菌、腐败希瓦菌、极小棒杆菌分别按2%的接种量接种并发酵3 d后,再分别接入2%(V/V)的异常汉逊酵母、酿酒酵母和植物乳杆菌.通过正交试验选取的最佳发酵工艺条件为:短小芽孢杆菌、腐败希瓦菌、异常汉逊酵母各自按照2%(V/V)的接种量接种于含2%(V/V)豆豉汁和1%(W/V)氯化钠的液体冬瓜发酵基中,30℃发酵10 d后,在发酵体系中投入能够被发酵液覆盖量以下的冬瓜块,继续30℃发酵10～15 d.     

黄波罗的愈伤组织培养

通过组织培养技术研究了NAA、NAA与6-BA组合、培养基类型、培养基pH值、蔗糖质量浓度、接种量、培养时间及继代次数对黄波罗愈伤组织生长的影响。结果表明:单独使用NAA时,以1.0mg.L-1愈伤组织生长率最高;NAA与6-BA组合,以0.3mg.L-16-BA 1.0mg.L-1NAA最好,其生长量明显大于单独使用NAA的处理。黄波罗愈伤组织最佳的培养体系为:NT 0.3mg.L-16-BA 1.0mg.L-1NAA,培养基pH值为6.3左右,蔗糖质量浓度为20g.L-1,接种量0.4g,继代时间为20d,愈伤组织生长量在培养4代后达到最大,达2.14g左右。