中国白梨S基因研究——Ⅱ9个主栽品种S基因型的确定及S29-RNase新基因的分离鉴定

以中国白梨9个品种为实验材料．在分子水平上对其基因组DNA进行了PCR—RFLP系统检测、DNA序列测定及生物信息学分析．鉴定了6个品种的S基因型和3个品种的一个S等位基因．并从天生伏和蜜梨中分离鉴定了一个新的S等位基因,命名为梨Szg-RNase基因．该基因与S13的DNA序列最接近，推导氨基酸序列与S13仅有2个氨基酸序列的差异．     

中国白梨S基因研究——I 7个品种S基因型的确定和2个新S基因的鉴定

梨S基因型的确定对授粉品种的选择具有指导作用．采用PCR—RFLP检测、DNA序列分析和田间杂交试验，鉴定了两个新S-RNase基因．分别为S17-RNase和S21-RNase．同时确定了7个白梨品种的S基因型．S17-RNase和S22—RNase基因的内含子大小分别为142bp和139bp．HV区长度分别为16个和15个氨基酸．信号肽-P2的推导氨基酸长度分别为99个和98个氨基酸．信号肽大小均为27个氨基酸．C1大小均为11个氨基酸，C2大小均为12个氨基酸．白梨品种海棠酥、六瓣、恩梨、鸭梨、大核白、香椿、青梨等品种的S基因型分别为S1S12S19、S17S19、S1S19、S1S21、S16S19、S3S19、S19S19．该研究可为梨遗传改良和丰产栽培提供重要的理论依据．     

优选野生砂梨--金珠果梨

金珠果梨是从野生砂梨中选育而成,并通过省级鉴定的一种珍贵保健水果.该品种具有四个特点:一是新,是目前我国独一无二的珍稀新品种.     

砂梨新品系——金珠果冬梨

<正> 金珠果冬梨系河南省科研单位利用在崤山和熊耳山中的野生砂梨选育而成的一种珍贵保健水果,属砂梨品系。于 1998年 11月通过省级科技成果鉴定。 该品种树势中庸,幼树生长健壮,干性强,萌芽率高,发枝力中等。97％果台可抽生1～2个副梢(其上     

金珠果梨果实营养成分及抗氧化能力

以砂梨新品种金珠果梨为材料 ,对果实的主要营养成分及抗氧化效能进行分析。结果表明 :1金珠果梨果实可食部分达 85 5 .2 g/ kg,可溶性固形物 176 g/ kg,可溶性糖 110 .6 g/ kg,总酸 5 .6 g/ kg,含有人体必需的亮氨酸、缬氨酸和赖氨酸等 8种氨基酸及丰富的 B族维生素和矿物质 ;2果实生理活性物质总酚 7.32 2 m g/ g,类黄酮 0 .2 4 5 mg/ g,绿原酸 0 .4 6 7m g/ g;3金珠果梨果汁具有较强的清除 · OH的能力和抗脂质过氧化的活性     

金珠果冬梨高产栽培技术

金珠果冬梨是一种珍贵保健水果，属砂梨系统。具有成熟特晚，外观美丽、风味独特，抗病耐贮等优良特点，现将其高产栽培技术介绍如下：     

金珠果梨生产技术规程

一、园地选择与规划园地选择地势平坦或坡度在6°~15°的山区、丘陵,且背风向阳的南坡,并修筑梯田。土壤土层深厚,活土层在80cm以上,地下水位在1.5m以下。环境符合NY5101的要求。园地规划平地和6°以下的缓坡地,栽植行南北向;6°~15°的坡地,栽植行沿等高线延长。     

6个梨属砧木的S基因型鉴定

利用梨的自交不亲和基因(S - RNase)特异引物“FTQQYQ”和“anti - IIWPNV”,对6个梨砧木品种(山梨、S2、S5、S7、PDR54、极矮化种质)的基因组DNA进行S基因特异扩增,并对扩增片段进行回收、克隆、测序,使用生物信息学软件对各序列进行分析和同源性搜索比对,最终确定各品种的S基因型.鉴定结果:山梨为S12 Sx,S2为S1S17,S5为S17S31,S7为S1S17,PDR54为S4S8S17,极矮化种质为S1S17.     

中国梨品种自交不亲和新基因的分离鉴定

采用分子生物学技术、田间杂交试验和生物信息学方法研究了中国梨自交不亲和基因和品种的S基因型．从中国白梨和沙梨品种中分离鉴定了15个梨自交不亲和新基因；分析了新S基因的序列特征；确定了中国白梨中至少存在17个S等位基因，中国沙梨中至少存在10个S等位基因；鉴别了34个梨品种的S基因型．这些新S基因的发现和品种S基因型的确定为中国梨品种的优化配置、丰产栽培和遗传改良提供了科学依据。     

苹果自交不亲和基因型(S基因)研究进展

 苹果是蔷薇科一个典型的配子体自交不亲和果树树种。本文详细介绍了苹果S等位基因研究现状,系统介绍了基于PCR技术的苹果S 基因型鉴定的理论基础和主要方法,列出了迄今国内外应用这些方法鉴定出的500多个苹果品种的S 基因型。本文对于苹果品种授粉树的合理配置和杂交育种亲和性亲本选择具有重要的指导意义。     

自花结实鸭梨品种自交亲和分子机理研究

对鸭梨及其自花结实变异品种-金坠梨和魏县阎庄自花结实鸭梨的S基因进行了研究。通过对3个品种基因组DNA进行S基因特异性PCR扩增,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测发现,在370 bp左右均扩增出了1条带,但不能区分2个S等位基因;经8%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测发现,鸭梨和金坠梨在370 bp左右有2条带,而魏县阎庄自花结实鸭梨只有1条带,表明魏县阎庄自花结实鸭梨系鸭梨的1个S基因发生了变异,从而导致自交亲和;进一步研究表明,魏县阎庄自花结实鸭梨S1基因正常,系S21基因发生了变异,导致自交亲和;金坠梨和鸭梨谱带无差别,自交亲和机理可能是调控S基因表达的修饰基因发生了变异,导致自交亲和。     

鸭梨自交不亲和性与花柱内源激素关系的研究

以自交不亲和梨品种鸭梨及其亲和变异品种金坠梨为材料,测定了鸭梨和金坠梨自花授粉、鸭梨异花授粉后花柱激素含量的变化,以期阐明内源激素与自交不亲和性的关系。结果表明:金坠梨大气球期花柱中促进生长的激素IAA、GA3、ZR含量均极显著高于鸭梨,而ABA含量极显著低于鸭梨。2个品种自花授粉后72 h内,花柱内IAA、ZR含量呈下降趋势;在授粉后24 h时内GA3含量下降,随后上升;金坠梨花柱ABA含量授粉后24h内上升,然后下降;鸭梨花柱ABA含量变化在自花授粉24 h内处于下降趋势,然后上升;鸭梨异花授粉的花柱内激素变化与自花授粉的不同,授粉24 h后花柱内IAA、GA3、ZR含量与金坠梨自花授粉的相近。     

自花结实鸭梨授粉受精过程中生理代谢变化规律研究

对鸭梨及其自花结实变异品种--"金坠梨"和"魏县阎庄自花结实鸭梨"的自花授粉表现、花柱抗氧化酶活性、MDA含量、内源激素含量及比值进行了研究.结果表明:"金坠梨"和"魏县阎庄自花结实鸭梨"自花授粉后,花粉管能进入花柱,在沿花柱向子房伸长途中未被抑制,花粉管能顺利通过花柱进入胚囊,并能完成受精作用.鸭梨的自花结实变异品种...     

中国砂梨7个自交不亲和新基因的分离与测序

S-RNase是配子体自交不亲和植物雌蕊的基因产物，它降解具有相同基因型的花粉mRNA或rRNA．导致植物的自交不亲和．借鉴日本梨S—RNase基因的分析方法．对中国砂梨5个品种的基因组DNA进行PCR—RFLP系统检测和DNA序列分析，从中发现了7个新的S—RNase等位基因，分别命名为S11-RNase、S12-RNase、S13-RNase、S14-RNase、S-15RNase、S16-RNase和S25-RNase基因，其部分序列已登录到GenBank．     

雪花梨S16-RNase基因全长cDNA克隆及序列分析（英文）

    通过逆转录PCR(RT-PCR及快速扩增cDNA末端(RACE)技术从中国白梨品种'雪花'梨中克隆到S16-RNase基因的全长cDNA序列(GenBank接受号为DQ991388)该cDNA克隆总长1101 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码228个氨基酸S16-RNase表现出梨S-RNase基因的基本结构特征,即其具有5个保守区(C1,C2,C3,RC4及C5)和1个高变区在推导氨基酸水平上,S16-RNase与梨其他S-RNase基因的相似性为63%至74%,但与苹果S9-RNase的相似性高达95%通过多序列比对构建进化树,分析梨S16-RNase与蔷薇科植物其他S-RNase基因的遗传进化关系结果表明,S16-RNase与苹果亚科S-RNase基因形成一个亚科特异而非种特异的S-RNase基因类群;且不同S-RNase基因间存在属内种间遗传距离远于属间种问遗传距离现象     

梨树腐烂病的病原菌鉴定和化学药剂筛选

为明确梨树腐烂病的病菌种类,对采自中国河北、山西和安徽3省症状疑似梨腐烂病的树皮与病枝进行病菌培养和分离纯化,根据病原菌的形态特征和致病性,结合rDNA-ITS序列分析,鉴定病原菌种类,并选用22种常用杀菌剂,通过离体抑菌试验,筛选出抑菌效果较好的药剂进行田间药效试验。结果表明:在分离纯化的6个菌株中有5个菌株形态特征相同,且与已报道的腐烂病病菌(Valsa mali var.pyri)形态特征相似;以这5个菌株菌丝接种梨树健康枝条后出现与田间相同的病症;病原菌rDNA-ITS克隆测序、BLASTn比对发现,这5个菌株为同一致病菌(登录号JQ618018),且与意大利梨腐烂病菌株(登录号DQ241769)、陕西梨腐烂病菌株(登录号GU174590)、新疆梨腐烂病菌株(登录号HM013819)的rDNAITS序列的同源性达到100%;另外1菌株与内生菌巴西拟隐盘孢菌Paraconiothyrium brasiliense的同源性达到99%;丙环唑等8种药剂对梨树腐烂病菌丝生长抑制力强,丁香菌酯等11种药剂对分生孢子抑制效果好,25%咪鲜胺乳油1 500倍液、20%丁香菌酯悬浮液165倍液与97%嘧菌酯原药15 000倍液对田间病斑治疗效果较好。根据试验结果,可以确定3省采样地区引起梨腐烂病的病原菌为Valsa mali var.pyri;咪鲜胺、嘧菌酯和丁香菌酯等3种杀菌剂可作为梨树腐烂病田间防治药剂。     

Identification and functional analysis of arabinogalactan protein expressed in pear pollen tubes

Arabinogalactan proteins (AGPs) are widely distributed in the plant kingdom and play a vital role during the process of plant sexual reproduction.  In this study, we performed a comprehensive identification of the PbrAGPs expressed in pear pollen and further explored their influences on pollen tube growth.  Among the 187 PbrAGPs that were found to be expressed in pear pollen tubes, 38 PbrAGPs were specifically expressed in pollen according to the RNA-seq data.  The PbrAGPs were divided into two groups of highly expressed and specifically expressed in pear pollen.  We further tested their expression patterns using RT-PCR and RT-qPCR.  Most of the PbrAGPs were expressed in multiple tissues and their expression levels were consistent with reads per kilobase per million map reads (RPKM) values during pollen tube growth, implying that PbrAGPs might be involved in the regulation of pear pollen tube growth.  We also constructed phylogenetic trees to identify the functional genes in pear pollen tube growth.  Therefore, 19 PbrAGPs (PbrAGP1 to PbrAGP19) were selected to test their influences on pollen tube growth.  Recombinant proteins of the 19 PbrAGP-His were purified and used to treat pear pollen, and 11 of the PbrAGP-His recombinant proteins could promote pear pollen tube growth.  Additionally, pollen tube growth was inhibited when the expression levels of PbrAGP1 and PbrAGP5 were knocked down using an antisense oligonucleotide assay.  PbrAGP1 and PbrAGP5 were localized in the plasma membrane and might not alter the distribution of pectin in the pollen tube.  In summary, this study identified the PbrAGPs expressed in pear pollen and lays the foundation for further exploring their functions in pollen tube growth.     

Identification and expression analysis of the Pbr MLO gene family in pear,and functional verification of PbrMLO23

Mildew resistance locus O(MLO) is a plant-specific gene family that plays an important role in the growth and development of plants and their interactions with the environment. However, the available information on this gene family in pear is limited. Here, 24 PbrMLO genes were identified and divided into five subfamilies(I, II, III, IV and V). Wholegenome duplication(WGD) and dispersed duplication contributed to the expansion of the PbrMLO family. In addition, gene expression analysis revealed that PbrMLO genes were distributed in various pear tissues, suggesting their diverse functions. We selected PbrMLO23 for further functional analysis. Expression profile analysis by qRT-PCR showed that PbrMLO23 was highly expressed in pollen. Subcellular localization analysis showed that PbrMLO23 was located on the plasma membrane. When the expression level of PbrMLO23 was knocked down by using antisense oligonucleotides, pollen tube lengths increased, indicating that PbrMLO23 plays a functional role in inhibiting pollen tube growth. In summary, these results provide evolutionary insight into PbrMLO and its functional characteristics and lay a foundation for further analysis of the functions of PbrMLO members in pear.     

梨树腐烂病研究进展

梨树腐烂病（pear Valsa canker）是梨树的主要病害之一。综述了国内外在梨树腐烂病的发病症状、病原鉴定、致病力、病原菌侵染机理、病害发生流行规律及其防治技术等方面的研究进展,并探讨了该病害未来的研究方向与防治策略。     

梨园土壤研究进展

我国是世界第一产梨大国,但不同产区的梨品质差异较大.文章从梨园土壤营养、土壤对梨产量和品质的影响、梨园土壤管理等3个方面综述了梨园土壤研究进展,重点介绍了梨园土壤pH值、有机质及钙含量与梨品质的关系,指出土壤覆盖和施肥是改善梨园土壤理化性状、提高梨产量和品质的重要措施.今后应加强对梨园土壤的系统研究,建立梨园生态平衡施肥技术体系,为促进我国梨产业可持续发展提供技术支撑.