Preliminary Report of Callus Culture on Prunus mume

该试验以腋芽和胚为外植体,进行了梅花愈伤组织的长期培养及其细胞学的初步观测．结果表明成年母株腋芽外植体启动培养的愈伤率和发芽率在不同品种和不同培养基之间稍有差异,３＃梅花品种和ＭＳ＋ＮＡＡ２．０＋ＢＡ１．０＋ＺＴ２．０ｍｇ·Ｌ－１培养基较高．胚在ＭＳ＋ＧＡ１０．０培养基上发芽率高,并形成正常无根苗．暗培养有利于愈伤组织的生长,光培养有利于愈伤组织的分化．水解酪蛋白（ＣＨ）既有利于愈伤组织的生长、增殖,也延长了愈伤组织的寿命．梅花愈伤组织在第四代达到生长高峰,附加ＣＨ之后在第七代又出现一次生长高峰;一代之内第四周生长最快．多次继代培养的结果还表明,ＭＳ＋ＮＡＡ５．０＋ＫＴ１．０＋ＣＨ１０００有利于梅花愈伤组织的长期培养．细胞学观测的结果表明,多次继代培养的梅花愈伤组织的细胞形状不规则,核物质相对稀少,并且分化出了很多导管．     

甘蔗愈伤组织培养及其细胞学特性

为培养适合转基因的甘蔗胚性愈伤组织,我们在不同外植体浸泡时间、不同培养基、不同培养环境以及不同的采样时间等对甘蔗愈伤组织培养的影响进行研究.结果表明,使用MS培养液浸泡外植体20 min能减轻培养过程中褐变的影响;MS+3.0 mg/L 2.4-D的培养基有利于胚性愈伤组织的诱导和增殖;在暗环境中培养有利于愈伤组织的整齐生长;在8月份的采样,培养材料褐变程度较小,胚性愈伤的诱导率及生长率均较高.在培养过程中会出现表型各异的愈伤组织,经染色后制成玻片在显微镜下观察,从细胞学角度为甘蔗转基因寻找合适的受体.结果表明,乳白色颗粒状的胚性愈伤组织,细胞排列紧密,细胞核大,分生能力强,是甘蔗转基因愈伤组织受体材料中的最佳选择.     

银杉成熟胚离体培养及愈伤组织诱导的研究

将银杉种子的成熟胚剥离出来，在ＬＰ＋ＮＡＡ１．５×１０￣（－６）培养基中离休培养，成苗率为８７％。以无菌幼苗的子叶、下胚轴、顶芽作为外植体，在ＬＰ附加ＫＴ０．５，ＢＡ０．５，ＮＡＡｌｘ１０￣（－６）的培养基中诱导出愈伤组织。这一研究为银杉离体胚培养进行快速繁殖，作了有益的尝试。     

不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响

以观赏茄‘金蛋＇为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响.结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS＋2,4-D 0.5 mg/L＋KT0.25 mg/L＋LH 1000 mg/L＋Gln 500mg/L＋蔗糖50g/L;低温预处理和短期热激处理都能显著提高花药愈伤组织的诱导率,但2者效应没有叠加作用.     

石竹愈伤组织诱导及植株再生

通过诱导愈伤组织再分化和直接诱导不定芽这两种途径获得了石竹的再生植株，比较了不同植物生长调节剂配比在离体培养中的效应。认为6-BA是诱导长期培养的愈伤组织再分化最有效的外源激素，适宜的质量浓度范围在0.5-2.0mg/L之间，当6-BA为1.0mg/L，NAA为0.3mg/L时，愈伤组织不定芽分化频率最高，小苗生长状况也最好；将6-BA与NAA，IBA，Ad等生长调节剂混合使用可提高诱导效果，增殖继代培养基中6-BA的质量浓度在0.1-0.3mg/L之间为宜，浓度过大，虽然芽增殖数量增多，但苗的畸形化和愈伤化现象严重。     

大白菜变异株嫩茎、幼叶愈伤组织培养和花、子房离体培养的研究

通过对一株大白菜变异株(图1)的嫩茎、幼叶进行愈伤组织培养和对变异花(图2,下文中简称为花)、膨大的子房(图3,花蕾展开后20 d,下文中简称为子房)进行离体培养,以期得到再生植株。试验结果表明,嫩茎、幼叶未能成功诱导出不定芽,花及子房较易诱导产生不定芽。     

不同种系梅花品种组织培养繁殖研究

梅花组培离体繁殖生根非常困难,为了解决不同梅花种系离体组织培养生根困难的问题,为生产梅花脱毒苗和进行转基因操作,该文以‘铁骨红’梅（真梅系）、‘美人’梅（樱李梅系）和‘燕杏’梅（杏梅系）为试验材料,建立了梅花的外植体生长、扩繁、生根的基本培养程序。其中适合‘铁骨红’生长的最佳培养基是改良QL培养基,即QL大量元素＋P培养基微量元素＋MS有机成分＋2倍MS铁盐+30 g/L葡萄糖,该培养基解决了黄化、顶端死亡等组织培养中比较严重的问题;最佳的增殖培养基是改良QL＋1.0 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L NAA＋0.5 mg/L GA-3;最佳的生根培养基是1/2改良QL＋0.3 mg/L NAA＋0.1 mg/L IBA。‘美人’梅和‘燕杏’的增殖培养基分别是WPM＋1.0 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA和MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.05 mg/L IBA;生根培养基分别是1/2WPM＋0.5 mg/L NAA和1/2MS＋0.5 mg/L IBA。      

梅品种胚培养研究

培养了花后53、61、68、74、83、91天的“大叶青”胚。对“大叶青”、 “白毛”胚形成正常苗需要的低温时间作了探讨,结果表明,花后53、61、68天的胚不能产生正常苗;花后63～74天是胚形成正常苗的转折期;花后74～83天是适宜的培养期。适宜的培养基为1/10MS和1/MS(大量+微量)。果实黄熟对,部分胚败育。“大叶青”、“白毛”胚形成正常苗的适宜低温(2～4℃)均为60天。     

离体诱导‘美人’梅多倍体初报

为了获得抗逆性强、观赏性好的梅花多倍体,该文以秋水仙素和氨磺乐灵为诱变剂,利用浸泡和培养基两种方法对二倍体‘美人’梅的丛生芽进行离体诱变,并采用流式细胞分析仪鉴定了形态变化植株细胞的染色体倍性。结果表明,秋水仙素和氨磺乐灵对丛生芽的生长有不同程度的抑制作用,但氨磺乐灵毒性比秋水仙素小。秋水仙素诱变丛生芽的半致死剂量为4000mg/L、72h或8000mg/L、60h,在浓度为8000mg/L溶液中浸泡48h后,继代3~5次,植株形态发生明显变化,为混倍体;氨磺乐灵诱变丛生芽的半致死剂量是28mg/L、36h或56mg/L、24h,在浓度为28mg/L溶液中浸泡96h后,继代3~5次,植株形态发生变化,为二倍体与四倍体的嵌合体。     

梅花杂交种茎段培养影响因素的研究

对两个梅花杂交种优良单株‘X-9’、‘X-55’进行茎段培养的试验研究。通过对采枝时期、培养基种类、消毒方法的对比试验,探索影响梅杂交种茎段腋芽萌发及生长的因素。结果表明:5月上旬到6月中旬是茎段培养的最佳时期;污染率会因品种不同而有差异;消毒方法以0.1%升汞5min最好;两个杂交种最适启动培养基为WPM+0.5mgL6-BA+0.1mgLNAA。     

梅花品种‘淡丰后’茎段开放式启动培养的初步研究

开放式组织培养在植物组织培养的研究发展中,受到了重视。该文作者对梅花品种‘淡丰后’进行了启动培养的初步研究。通过不同基本培养基、激素种类及浓度的对比实验,得出‘淡丰后’以当年生嫩枝作外植体,MS培养基优于WPM培养基;IBA较NAA更能促进芽的萌发;6-BA浓度为2·0mg/L较4·0mg/L更能促进芽的萌发,最终筛选出‘淡丰后’带腋芽嫩茎段的最佳启动培养基为MS+6-BA2·0mg/L+IBA0·5mg/L,并对外植体消毒时间和叶片去留对污染的影响作了初步研究。     

梅花盆景的产业化分析

盆景具有很高的艺术欣赏价值,同时具有重要的商品价值。梅花作为我国传统的名花,种植广泛。简述了我国梅花盆景的栽培历史、分布,提出了发展建议。     

梅花基因组DNA提取的方法学研究

设计 4种方法 :“简易CTAB法”、“预先去杂 CTAB法”、“简易SDS法”和“预先去杂 SDS法” ,提取梅花‘南京红须’、‘南京红’和‘粉皮宫粉’叶片的基因组DNA。分光光度法、琼脂糖凝胶电泳和限制酶酶切反应鉴定表明 :“预先去杂 SDS法”尽管提取DNA得率最低 ,却是唯一能够从梅花叶片提取到高质量基因组DNA的方法 ;嫩叶的提取效果好于成熟叶。A2 6 0 A2 80 比值偏高和降解是所获低质量DNA表现的两个主要现象。RNaseA的再次消化无法降低A2 6 0 A2 80 。     

不同激素对‘美人’梅叶片离体培养的影响及其细胞学观察

该试验以‘美人’梅离体培养的无菌苗叶片为材料 ,研究了不同种类激素配比对叶片脱分化及再分化的影响 ,并对不同条件下产生的愈伤组织进行了细胞学观察。结果表明 :BA对‘美人’梅叶片的愈伤组织诱导起到抑制作用 ;NAA可使叶片直接生根 ;2 ,4 D的加入可以诱发叶片形成球形愈伤。但只有配合适当浓度的BA ,才能形成胚状体。诱导胚状体合适的培养基为 :WPM +BA 1mg L +NAA 0 1mg L +2 ,4 D 1mg L +L 谷氨酰胺 10 0mg L +水解乳蛋白 10 0 0mg L。     

梅花品种资源叶绿体基因组SSR研究

该研究利用筛选出的一对来自烟草的叶绿体DNA(cpDNA)SSR引物(NTCP9)扩增48份梅花材料的基因组DNA,进行叶绿体DNASSR标记试验。以这48个梅花品种的cpSSR指纹数据为基础,采用NTSYSpc2·11软件计算Nei’s(1972)遗传距离系数、简单匹配系数(SM)、Jaccard匹配系数和Dice匹配系数,并分别进行聚类、排序分析。从新的角度分析讨论基于cpDNA分化揭示的梅花品种间的系统演化关系。