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通过对CaMVCABB-BJI和Bari-1株系基因Ⅵ的克隆和转化,在根癌农杆菌菌种GV3101的介导下,利用真空渗入法获得了转化CABB-BJI和Bari-1基因Ⅵ的拟南芥转基因植株。分子检测表明,基因Ⅵ已整合进拟南芥基因组并有不同程度的表达。在转基因植株中,出现了类似病毒感染症状、多生长点及花粉生活力较低等个体的变异株。而多数转基因植株(占转基因植株70.4%)为无症状的正常植株。对转化CaMVBari-1株系基因Ⅵ的9个无症状转基因株系接种CaMVCABB-BJI病毒抗性表明,9个转基因株系表现出了不同的抗性 相似文献
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油菜基因转移适宜苗态建成方法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
油菜种子经2-5℃低温下处理及冬,春两季10个播期试验,研究了采用真空渗入法对油菜进行CaMV CABB-BJI和Bari-I株系基因Ⅶ转移时适宜植株形态的建成方法,结果表明,芥菜型油菜低温处理10,20,30d均可明显促进抽薹,春季3月18日播种或冬季10月11日播种最适于形成理想的转化态植侏。 相似文献
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油菜种子经2~5℃低温处理及冬、春两季10个播期试验,研究了采用真空渗入法对油菜进行CaMVCABB-BJI和Bari-Ⅰ株系基因Ⅵ转移时适宜植株形态的建成方法。结果表明,芥菜型油菜低温处理10,20,30d,均可明显促进抽薹,春季3月18日播种或冬季10月11日播种最适于形成理想的转化态植株。甘蓝型及白菜型油菜种子经低温处理不能通过春化。甘蓝型油菜冬季10月26日播种,白菜型油菜冬季10月11日播种或春季3月12日播种,易形成适于转移的植株形态。 相似文献
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传染性囊病病毒CJ801 VP2基因cDNA的序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
用RT-PCR从传染性囊病病毒CJ801的第14代囊毒中扩增编码VP2蛋白的cDNA基因片断,长度为1500bp,并对该片断进行了DNA序列分析。结果表明,CJ801与IBDV标准Ⅰ型毒株52/70、STC和Cul的同源性最高,分别为974%、976%和969%,与变异株A、E、GLS的同源性稍低,分别为965%、963%和967%。而与Ⅱ型毒株的同源性只有81%左右。从遗传进化树上看,CJ801处于标准Ⅰ型毒株和变异株之间。根据cDNA序列推导出蛋白质序列,比较蛋白质序列发现,CJ801与Ⅰ型IBDV毒株的同源性均在96%以上,其中与52/70的同源性最高,为982%。CJ801VP2高可变区的七肽区(S-W-S-A-S-G-S)未发生变化。以上结果说明CJ801为IBDVⅠ型强毒株。另外,CJ801和所有IBDV强毒株在VP2的253、279和284位上的氨基酸均相同,分别为Q、D和A;而CJ801的细胞适应株CJ801BKF和所有弱毒株一样,其相应位置的氨基酸分别为H、N和T。这3个氨基酸可能和IBDV的毒力有关。 相似文献
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含有IBV S1基因的昆虫杆状病毒表达载体的构建 总被引:4,自引:0,他引:4
以含有鸡传染性支气管炎病毒Holte株S1基因的重组质粒pUC18-S1.Holte和pUC18-S‘1.Holte为材料,分别构建了可表达IBV S1基因的昆虫杆状病毒转移载体质粒pSXIVVI^+X3-S1.Holte(含IBV先导序列),pSXIVVI^+X3/4-S1.Holte(IBV先导序列为融合短肽),pAcGHL-C-S1,Holte。 相似文献
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将马铃薯Y病毒中国分离株(PVY-C)的6kD和NIa基因拼接和改造,分别构建了其正向表述和反向转录的植物表达载体。借助土壤农杆菌LBA4404将在此双元载体上的6kD和NIa基因及新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)转入到烟草品种NC89的染色体上,从而获得了抗卡那霉素的转化再生烟草植株。用PVY-C对这些转化烟草进行抗性接种试验,结果表明部分转基因植株能够抵制PVY-C的侵染,对抗病植株的子一代(R1)进行进一步的抗性分析发现,其R1代通过遗传也获得了这种抗病性。 相似文献
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大白菜和油菜真空渗入遗传转化法初报 总被引:32,自引:2,他引:32
在携带CaMV Cabb B-JI株系基因Ⅵ的根癌农杆菌菌种GV3101的介导下,对大白菜、油菜幼苗生理状态,真空渗入时间及不同处理部位和叶面造伤等的处理与遗传转化效果的关系进行了比较研究。结果表明,经自然春化后,大白菜、白菜型油菜植株长至4 ̄5片叶,甘蓝型油菜、芥菜型油菜植株长至7 ̄9片叶,花薹已抽出时,为真空渗入最适苗态。大白菜自然春化植株移栽缓苗(3d),或黑暗处理(8h)均可显提高其转 相似文献
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高产绿豆品种——苏绿1号 总被引:1,自引:1,他引:0
高产绿豆品种──苏绿1号陈新,顾和平,沈克琴(江苏省农科院经作所南京210014)一、来源和类型苏绿1号原名VC2768A,系亚洲蔬菜研究发展中心(AVRDC)用品种EIJ-MD-BD/ML-3//Pag-asa-1/PHLV-18杂交育成。1985... 相似文献
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采用固相亚磷酸三酯法人工化学合成了人胰岛素样生长因子-Ⅰ(huIGF-I)基因的4条寡核苷酸 片段,再通过片段1、2与3、4末端互补配对和Klenow酶促补平及酶切连接成为完整的huIGF-IDNA片段,用 EcoR I/PstI酶切后克隆于 pGEM T-Easy Vector,经测序证明所得 DNA序列与设计的序列完全一致;选用植物 偏爱密码子校正了启始密码子ATG下游的6个密码子,并在ATG处增加Kozak序列后,插入pBI121的BamHI/ SacI位点,构建了以 35S为启动子的植物表达载体;以 Hind II/EcoRI切下“35S-Kozak-IGF-I-NOS(ter.)”插入 pCAMBIA2300之Hind II/EcoR I位点,构建成huIGF-I植物表达载体;通过CaCl2直接转化法将表达载体导入农 杆菌EHA105(Rif.r),并以菌落原位杂交技术和 DNA dot blot对重组农杆菌进行了筛选,所获得的重组农杆菌菌株为培育huIGF-I豆药用植物奠定了基础。 相似文献
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表达黄瓜花叶病毒外壳蛋白的转基因番茄及其对CMV的抗性 总被引:16,自引:0,他引:16
利用根瘤土壤杆菌Ti粒转化系统,采用叶盘法将CMV-cp基因转入番茄细胞中,获得42株转基因植株,经Southern blot和Western blot检测,证明CMV-cp基因已进入番茄核染色体中,并能正常表达。通过对转基因植株R1和R2代苗期人工接种CMV鉴定,发现CMV-cp基因产物对CMV有一定抗性,其抗性遗传符合孟德尔-对基因控制性状的遗传规律并能稳定遗传。 相似文献
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用携带植物抗病毒基因表达栽体pBTU的农杆菌转化油菜双低品种H090.H166,最大量转基因植株。栽体质粒PBTU上有卡那霉素抗性标记基因和CaM35S启动子控制的芜菁花叶病毒TuMV-cp外壳蛋白基因,用品种H090和166的带柄子叶与携带载体质粒的农杆菌共培养后,将其转移到含有6-BA1-10mg/l的MS培养其中,7-15天后又将其转移到含有6-BA1-10mg/l的MS加卡那霉素10mg的 相似文献
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在携带CaMVCabbB-JI株系基因Ⅵ的根癌农杆菌菌种GV3101的介导下,对大白菜、油菜幼苗生理状态、真空渗入时间及不同处理部位和叶面造伤等的处理与遗传转化效果的关系进行了比较研究。结果表明,经自然春化后,大白菜、白菜型油菜植株长至4~5片叶,甘蓝型油菜、芥菜型油菜植株长至7~9片叶,花薹已抽出时,为真空渗入最适苗态。大白菜自然春化植株移栽缓苗(3d),或者黑暗处理(8h)均可显著提高其转化率。在吸力为14.4m3/h的真空泵下处理1min后,迅速打开真空泵气阀升压变常压,再关闭阀门抽真空30s的转化效果较好。仅处理叶片转化率可高达11.20%,叶面造伤处理对转化率没有明显影响。 相似文献
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甜瓜抗CMV转基因植株的分子生物学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究建立了转目的基因植物基因整台及表达的分子生物学鉴定系统,并用报告基因检测、SDS-PAGE、Dot-ELISA、PCR特异扩增、Western-Blot等方法,研究了用叶盘法经Ti质粒转化的甜瓜再生植株CMV-CP基因的整合与表达。结果表明:再生植株基因组中整合了CMV-CP基因,长度为1kb,并能有效表达。表达产物分子量为24Kd,确为CMV的外壳蛋白,其表达量占细胞总蛋白约5%。 相似文献
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基因探针技术检测血清1型马立克氏病病毒的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
选用马立克氏病病毒(MDV)GA株BamHI基因文库中LDNA片段,制成DIG-标记的MDV核酸探针,分别对I型MDV强毒株(BJ-1株)和弱毒株(Md11/75c株)感染材料的核酸进行dot blot杂交检测,结果显示均有阳性呈色反应;而对MDV血清2型(SB-1株)、3型(Fc126株)及禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)和淋巴细胞性白血病病毒(LLV)感染细胞的核酸,作上述同样检测,则均未见 相似文献
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内生菌防治棉花黄萎病机理 总被引:11,自引:0,他引:11
将从棉株体内分离获得的内生菌Ala、73a接入棉花黄萎病菌菌株JC1B、BP2、的Czapek培养液中,培养不同时间后提取粗毒素,用考马氏亮兰G-250法测定浓度,结果表明:对BP2产毒素抑制最强的为Ala菌体,抑制率达51.97%;对JC1B产毒素能力抑制最强的是73a菌体,抑制率为72.60%。 相似文献
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将MDVGA株BamHI基因文库中含I3片段的质粒pACYC184和K3片段的质粒pHC79扩增,用碱裂解法抽提质粒后,利用相应的限制性内切酶切出目的基因片段,连接到合适的载体上,构建了完整的MDVB抗原基因克隆载体。通过内切酶分析,地高辛(DIG)-探针原位杂交,DNA序列预测,确认克隆的B抗原基因正确。 相似文献