中学“叶绿体中色素的提取和分离”实验的优化

根据叶绿体色素的性质和色素分离原理,改变高中《生物》实验教学中“叶绿体中色素的提取和分离”实验的材料、试剂和操作方法,并与原实验进行比较.结果表明:材料选女贞叶,提取液选95％乙醇,操作方法为直接蘸取滤液印到滤纸条上.方法更方便,效果更理想.     

叶绿体色素分离的两种方法

用硅胶薄板层析和聚酰胺薄膜薄层层析进行叶绿体色素分离,通常可分离出7条色素带。硅胶薄板层析展层剂为苯;冰醋酸(9:1v/v),聚酰胺薄膜薄层层析展层剂为汽油。     

红麻花甲醇可溶性色素TLC分离与成分鉴定

以红麻花为原料,通过对红麻花甲醇可溶性色素的薄板层析(TLC)分离研究,得到其TLC最佳展层剂是:V(乙酸乙酯)∶V(水)∶V(甲酸)∶V(乙酸)=70∶30∶3∶2。以最佳展层剂展开花中的色素,得到4条颜色深浅不一的色带,反映该花色素至少含4种色素单体成分。对色素母液及第一单体成分样液进行290～700 nm扫描测定表明,色素母液在253.9 nm及372.6 nm各有一特征吸收峰;色素第一单体样液的特征吸收峰在252.7 nm及369.0 nm。初步鉴定结果揭示:红麻花甲醇可溶性色素成分主要为黄酮醇类。     

不同彩叶植物叶片中叶绿体色素含量研究

对金叶女贞、紫叶桃、紫叶李和紫叶小檗等不同彩叶植物叶片中的叶绿体色素含量进行了测定．结果表明，金叶女贞单位重量叶片中各种色素含量均低于小叶女贞，叶绿素含量(a b)与类胡萝卜素含量的质量比值仅1.90:1，远小于小叶女贞的质量比值5.17:1；金叶女贞叶绿素a/b的比值显著大于其他植物，但叶绿素a，b和花青素含量却很低；紫叶桃叶片中各类色素含量均高于绿叶桃．紫叶桃、紫叶李和紫叶小檗3种紫叶植物中，紫叶桃含有的叶绿体色素最多，但花青素含量最少；紫叶小檗与紫叶桃正好相反，叶绿体色素含量较少，而花青素含量最高．紫叶李居于二者之间．最后讨论了彩叶植物叶片中色素含量与叶色变化的关系．     

PRRSV的分离与鉴定

从猪场疑似猪繁殖和呼吸综合症的病死仔猪肺脏和脾脏中分离到一株致Marc-145细胞病变的病毒,RT-PCR检测确诊为猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV),按Reed-muench法计算TCID50结果显示该分离病毒株在Marc-145细胞上的增殖毒价为106.75TCID50/ml。     

鹅沙门氏菌的分离与鉴定

通过对疑似沙门氏菌病的病鹅进行细菌分离培养、革兰氏染色、镜栓;生化试验鉴定等方法,分离到一株革兰氏阴性小杆菌,生化试验鉴定表明该菌为沙门氏菌,选择药敏试验中筛选出的敏感药物丁胺卡那霉素用于治疗,该群鹅的病情得到控制,由此表明：该群鹅为沙门氏菌病,选用药敏试验中筛选出的敏感药物用于治疗,取得较好效果。     

竹叶多糖分离纯化及抗氧化能力的研究

对超临界CO2流体萃取技术提取的竹叶粗多糖采用分级醇沉、脱蛋白质及纤维素柱层析等技术分离纯化,研究分离纯化后的竹叶多糖产物的物化指标。研究结果表明:经超临界CO2流体萃取技术提取得到的毛竹叶粗多糖,采用体积分数为70%的乙醇沉淀,得到预纯化产物,预纯化产物得率17.75%,多糖含量9.586 mgg,总抗氧化能力2.556 mgg VC;预纯化产物再经Sevag法脱蛋白质及DEAE-52纤维素层析柱层析,获得一种中性竹叶多糖,其平均分子量为5.051×104,IC50值为0.178 mgg竹叶多糖,与VC(IC50值为0.158 mgg)相比,具有较好的DPPH清除能力。      

菊芋叶绿体分离方法比较研究

以菊芋叶片为材料,通过比较提取其叶绿体DNA的5种方法(改良高盐-低pH法、Percoll密度梯度离心法、GENMED试剂盒物理法、GENMED试剂盒化学法及DNaseⅠ差速离心分离法),筛选出适合菊芋叶绿体NDA的提取方法。利用显微镜、核酸蛋白测定仪、琼脂糖凝胶电泳及菊芋基因特异引物RAPD检测。结果显示:改良高盐-低pH法分离得到的叶绿体在40×物镜下其数目多,浓度高,背景清晰,提取菊芋叶片cpDNA的OD_(260)/OD_(280)为1.926,质量浓度为295.63μg/μL。经10 g/L琼脂糖凝胶电泳检测发现,cpDNA条带清晰整齐,无核DNA污染;且提取的cpDNA通过4对引物均能扩增到片段。结果表明,改良高盐-低pH法能够快速获得菊芋高质量的叶绿体DNA。     

南京地区肉鸽大肠杆菌分离与鉴定

为了分析南京地区肉鸽场乳鸽死亡的原因,对7份死亡乳鸽病料进行细菌分离培养,获得了7株细菌。对这7株菌株进行了分离培养、染色镜检、生化特性鉴定、血清型鉴定以及药敏试验,结果表明：1）7株细菌均为大肠杆菌;2）7株细菌对14种药物中头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、多粘菌素B敏感,对氨苄西林、链霉素、丁胺卡那耐药率分别高达85.7%、71.4%和85.7%。此外,从这7株细菌中随机选取1株细菌进行16SrDNA基因片段测序,发现该细菌407bp核苷片段与GenBank中已知8株大肠杆菌对应核苷酸片段同源性均高达99%以上。     

锰叶面喷施对大豆光合特性及叶绿体色素的影响

以“垦农4号”为材料,在大田小区试验的条件下,研究在初花期叶面喷施EDTA-Mn对大豆叶片光合特性及叶绿体色素的影响。结果表明:适宜浓度的锰叶面喷施能提高大豆叶片的光合速率、蒸腾速率及水分利用效率;增大叶片的气孔导度和气孔相对开度;增加了叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总量,类胡萝卜素含量有所降低。较高浓度锰叶面喷施可对上述指标起到显著的抑制作用。     

鳗肺炎克雷伯菌的分离与鉴定

从6尾患肠道胀气的病鳗腹水和肝脏病灶中分离、筛选出一株致病菌EP4,通过细菌形态学、生理生化测定及ATB Expression半自动细菌鉴定仪鉴定均符合肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)特性.以细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,得到EP4的部分16S rRNA基因序列,长约1 502 bp.将所测序列与GenBank中序列进行BLAST比对并构建系统进化树,结果表明其与肺炎克雷伯氏菌[DQ444287]的同源性最高(98.9%).人工感染证明该菌株具有较强的致病力(致死率达70%),30种药物筛选结果显示,EP4对菌必治(头孢三嗪)、先锋V、头孢克洛、氧氟沙星、氟罗沙星、依诺沙星、萘啶酸等高度敏感,而对苯唑青霉素、氨苄青霉素、青霉素G、阿莫西林等不敏感.     

电子鼻在竹笋种类识别中的应用

通过电子鼻技术检测不同竹笋间气味的差异性,以便初步建立一种可以快速区分竹笋种类的科学方法。以壮绿竹Dendrocalamopsis valida,绿竹Dendrocalamopsis oldhami,梁山慈竹Sinocalmus affinis,马来甜龙竹Dendrocalamus aspera,芦竹Arundo donax,撑绿竹Bambusa pervariabilis × Dendrocalamopsis grandis,硬头黄竹Bambusa rigida和毛竹Phyllostachys edulis等8种竹笋为实验对象,采用电子鼻对它们具有特殊气味的挥发性气体进行分析检测,通过主成分分析法（PCA）,线性判别法（LDA）和分层聚类分析（HCA）对8种竹笋样品进行了分析。结果表明:通过电子鼻技术,8种竹笋能准确地被区分,且各种竹笋气味间存在差异性。通过Loading分析表明传感器贡献率较大的是传感器W5S和传感器W1S。电子鼻技术可以应用于不同竹笋种类的区分和鉴别。图5表3参15     

大孔树脂吸附法分离纯化竹叶黄酮研究

采用大孔树脂吸附分离的方法对粉单竹竹叶黄酮提取物进行纯化,探讨D101大孔吸附树脂的静态及动态吸附解吸动力学特性,并对树脂动态柱层析的工艺条件进行优化。结果表明,D101大孔树脂较适宜于竹叶黄酮提取物的纯化;动态柱层析的工艺条件为:上样溶液的p H为8.0,上样流速1.0 m L/min,分别用2倍柱床体积的20%、40%、60%及80%乙醇以1.5 m L/min的洗脱速率进行阶梯梯度洗脱。在优化工艺条件下,可以收集得到纯度分别为50.9%、38.0%、35.8%等3个竹叶黄酮产品,黄酮总回收率可达63%左右。该工艺既可满足产品高纯度的要求,又保证了竹叶黄酮的高回收利用率,具有可行性。     

小鹅瘟病毒的分离与初步鉴定

从死亡的具有典型小鹅瘟症状的7日龄雏鹅肝中分离到1株病毒．选用未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产的12日龄鹅胚，进行鹅胚接种试验，雏鹅表现出典型鹅瘟临床症状和剖检特征；鸡胚致死率达到25％；不能凝集多种动物红细胞；能凝集黄牛精子，经琼脂扩散试验，用此株病毒感染的鹅胚液能与小鹅瘟病毒阳性血清发生特异性反应．综上所述，这株病毒初步鉴定为小鹅瘟病毒．     

竹材木质素选择性降解菌株的分子鉴定

鉴定1株从腐竹中筛选的高效选择性降解竹材木质素的优良菌株ZNLD-18,为生物法提取可纺性竹原纤维奠定基础。利用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增并测定菌株的rDNA ITS区序列,序列总长541bp。把所得序列在GenBank中进行B1ast搜索得到同源性较高的同属不同种菌株序列。比较这些序列的遗传距离,显示菌株ZNL D～18与Trametes versicolor的ITS区序列同源性为99％以上。利用PAUP软件构建分子系统发育树,通过对该树的分析并综合菌株的形态特征,鉴定菌株ZNLD-18为白腐菌Trametes versicolor。     

烤烟烟叶腺毛发育细胞学研究

利用常规石蜡切片技术研究烤烟烟叶长柄腺毛和短柄腺毛的形态发育过程.结果表明,烤烟烟叶长柄腺毛和短柄腺毛原始细胞均来源于原表皮,都经过两次平周分裂形成1个基细胞、1个柄细胞和1个顶细胞,两者的发生和早期发育相同,在以后的发育中,由于柄细胞和分泌细胞的不同分裂方式分别形成长柄单细胞腺头腺毛、长柄多细胞腺头腺毛和短柄多细胞腺头腺毛.     

光盐交互胁迫下台湾沟叶结缕草叶绿体色素、抗氧化酶动态变化

台湾沟叶结缕草接受全日照、遮荫处理后,表现出适阳型、适阴型的两种生态适应型,在接受以上两种处理后继续将台湾沟叶结缕草处于弱光和弱光 0.5 mol·L-1 NaCl盐浓度的两种逆境下,培养24 d后,发现两种逆境胁迫的总叶绿素、类胡萝卜素都表现持续上升的趋势.与弱光胁迫相比,弱光 盐胁迫后上升幅度更大,而Car/Chl、叶绿体SOD表现持续下降,且弱光 盐胁迫降幅更大;同时,Ca/Cb、叶绿体CAT出现先升后降的趋势,叶绿体CAT变化较为敏感, 表现出阴生S﹥阴生CK﹥阳生S的趋势.这与植物的受害表现程度相一致,也是台湾沟叶结缕草在不同逆境下的适应性变化的表现.     

莴苣超氧化物歧化酶分离与鉴定

抑制剂敏感性试验表明 ,莴苣超氧化物歧化酶 (SOD)属于Cu·Zn -SOD。莴苣SOD对KCN和H2 O2 都很敏感 ,1mmol L的KCN抑制其活力达 92 % ,1mmol L的H2 O2 抑制其活力达 6 8%。莴苣不同组织SOD活力不同 ,以整株莴苣为原料提取的SOD活力为 1.6 5 1U ml,明显大于以莴苣茎为原料提取的SOD活力 ( 1.375U ml)。同时以酶活力最大为最优分离目标 ,确定了莴苣SOD最佳分离操作条件     

干旱条件下增加UV-B辐射对大豆叶片光合色素的影响

试验以大豆东农47和东农48为材料,采用盆栽的方式,研究干旱条件下增加UV-B辐射对大豆叶片光合色素的影响。结果表明,干旱胁迫使两个大豆品种的光合色素含量都显著降低;增加UV-B辐射也使两个大豆品种的光合色素含量降低,但差异显著性不同;干旱条件下增加UV-B辐射对东农47光合色素含量的影响表现拮抗作用,但对东农48叶绿素a和类胡萝卜素产生不利影响。     

毛竹叶片衰老特性及衰老相关基因的筛选和鉴定

收集野外定植3年的毛竹秆上具有明显衰老渐进特征的叶片簇,测量这些叶片的光合代谢效率(Fv/Fm)及叶绿素含量,建立毛竹不同衰老阶段叶片形态与其光合效率之间的关系.在此基础上,通过生物信息学方法(BLASTn)筛选出113个毛竹基因组中与水稻叶片衰老调控相关的同源基因,并检测这些基因在毛竹叶片发育和衰老过程中的表达趋势,鉴定一些与毛竹叶片衰老相关的标志基因.结果显示,毛竹叶片在衰老过程中其叶片的光合效率和叶绿素含量均出现显著下降;在筛选的113个基因中有86个基因在叶片中表达,其中32个基因在叶片衰老过程中没有变化,41个基因随着叶片衰老出现显著下调,13个基因出现明显上调.这些表达变化的基因与水稻中鉴定的同源基因在旗叶衰老过程中的表达模式基本一致,因此这些基因很可能在毛竹叶片衰老过程中也发挥同样的功能.