非洲菊组培快繁及雌核离体诱导技术研究进展

介绍了非洲菊组织培养快繁和雌核离体诱导技术的研究进展,着重综述了离体雌核诱导的主要影响因素及取得的研究进展,并对其在品种选育中的应用前景进行了展望。     

杜鹃红山茶离体快速繁殖

以杜鹃红山茶实生小苗为试验材料,探讨离体快速繁殖的方法。结果表明:茎段外植体在MS+BA 1 mg/L+IBA 0.01 mg/L+GA3 10 mg/L的培养基上培养60 d,侧芽萌发率高达68%;将这些萌发的侧芽连同原来的茎段外植体移至添加BA 0.2～0.4 mg/L的培养基培养1个月,74%的侧芽能够继续生长并形成丛生芽;再将丛生芽移至1/2 MS+IBA 4 mg/L+0.1%活性炭的培养基上培养1个月,得到大量伸长的芽条;将芽条切离母体后插植于1/2 MS+IBA 8 mg/L的培养基,60 d后生根率达到90%。通过以上过程繁殖得到的小苗质量良好,移栽1个月后的成活率可达90%。     

闽西宁化2个铁皮石斛品系离体培养条件的优化

[目的]优化闽西宁化2个铁皮石斛品系的离体培养条件。[方法]以闽西宁化红杆和青杆2个铁皮石斛试管苗为材料,设计了8组培养基对2个铁皮石斛品系离体培养条件进行优化。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛和青杆铁皮石斛丛生芽增殖;MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛、青杆铁皮石斛壮苗生长,壮苗培养基适当添加香蕉泥有利于植株增高。[结论]2个铁皮石斛品系间的丛生芽增殖和根系生长能力存在较大差异,红杆铁皮石斛的丛生芽增殖能力弱于青杆铁皮石斛;红杆铁皮石斛的根系长度和分蘖数都低于青杆铁皮石斛,一级根系数高于青杆铁皮石斛。     

鼓槌石斛组培快繁技术体系研究

以鼓槌石斛八成熟蒴果为外植体,通过对其种子无菌萌发培养、原球茎继代增殖及生根壮苗培养基的筛选,建立鼓槌石斛的组培快繁技术体系。结果表明：1/2 MS＋1.0 mg/L NAA＋8.0%土豆泥＋0.10%活性炭培养基效果较理想,种子萌发率较高,发芽快;最适增殖培养基为3/4 MS+3.0 mg/L 6-BA＋8%香蕉泥,增殖系数可达7.23;最佳生根培养基为3/4 MS＋1.0 mg/L NAA＋0.5 mg/L CA＋8%香蕉泥,平均根数量达7.49条。炼苗移栽到松树皮作为栽培基质的苗床上,1个月以后,成活率均达80%。     

野生黄精离体快繁技术体系的优化

以野生黄精不定芽为材料,以MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长调节剂6-BA、2,4-D、NAA、KT进行3因素4水平的正交设计试验,筛选黄精增殖的最佳培养条件;探讨不同培养温度对黄精组培苗继代增殖的影响;以1/2 MS为基本培养基,探讨不同生长素及其浓度和不同培养容器对组培苗生根的影响.结果表明,黄精组培苗最佳继...     

彩椒的离体快繁研究

以红盾彩椒为试材,进行组培快繁,研究不同激素类型与配比组合对愈伤组织诱导、不定芽分化及芽的伸长的影响,并初步建立彩椒的组培快繁体系。 结果表明：子叶愈伤诱导最适培养基为：MS＋0.3 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA;不定芽诱导最适培养基为：MS＋3.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L IAA＋4.0 mg/L AgNO3;芽伸长最适培养基为：MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IAA＋2.0 mg/L ZT＋2.0 mg/L GA3;最后在1/2MS＋0.5 mg/L IBA(或 0.5 mg/L NAA)培养基上进行生根培养。     

蝴蝶兰‘红天鹅’组织培养及快繁技术

[目的]探索‘红天鹅’花梗的不定芽诱导、丛生芽继代增殖和生根诱导技术。[方法]以蝴蝶兰新品种‘红天鹅’的花梗作为外植体,开展组织培养技术研究。[结果]用0.1%的HgCl2消毒外植体20 min,污染率可降低至27.2%,萌芽率达91.0%;不定芽继代增殖培养的最适培养基为MS+6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AD 5.0 mg/L+香蕉50 g/L+土豆50g/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5 g/L,增殖系数达3.80;最适合的生根诱导培养基为1/2MS+NAA0.4 mg/L+香蕉50 g/L+土豆50g/L+C 1.0 g/L+蔗糖15 g/L+卡拉胶7.0 g/L,生根时间为15 d,生根率达100%。[结论]发现了适宜‘红天鹅’的从消毒到增殖,再到生根中各试剂和激素的合理用量,为蝴蝶兰快繁技术发展提供了参考。     

兜兰离体快繁技术研究进展

由于生境破坏和人工过度采挖及繁殖的障碍,兜兰已是世界上最濒危的植物物种之一,所有野生种均被列入《濒危野生动植物种国际贸易公约》附录I而被禁止交易。突破其种苗繁殖技术瓶颈有利于兜兰种质资源的保护和可持续利用。本文对兜兰属植物无菌播种、共生萌发和组织培养技术等离体快繁技术的进展进行综述,并提出了目前存在的问题和解决方法,以期为兜兰属植物离体繁殖技术的深入研究和优质种苗的规模化生产提供参考。     

木薯单芽扦插快繁技术研究

通过对比试验，研究不同茎段部位，不同药剂类型、处理浓度和浸泡时间等25种处理组合对木薯单芽扦插生根的影响。结果表明，0.05 g/L GGR处理1.5 h、0.5 g/L TDZ处理30 min、0.1 g/L ABT处理 30 min等3种药剂处理组合，采用茎段中部材料获得了较好的效果。     

茶树组培快繁技术的优化研究

本文试验分析了激素对茶树组培快繁中芽增殖和生长的影响,优化得到适宜的茶树组培苗增殖条件是:MS+BA2.0+NAA0.1+GA33.0mg/L。该条件下培养30d,茶树组培苗的增殖率可达2.75倍左右,高度大于5cm的小苗成苗率在20%以上。     

基于转录组的非洲菊PLC基因家族鉴定与进化分析

磷脂酶C(phospholipase C,PLC)广泛参与植物的生命活动和代谢过程,在抵御真菌感染的过程中发挥重要作用。本研究基于非洲菊转录组测序数据,鉴定出13个非洲菊PLC基因家族成员,其中NPC有3个,PI-PLC有10个。非洲菊PLC的蛋白序列长度在98～594 aa之间,蛋白理论分子量为11 410.25～67 998.85 kDa,等电点为4.74～9.59,均为不稳定亲水蛋白。亚细胞定位预测结果显示,13个成员分别定位于细胞壁、细胞膜、细胞质、叶绿体和细胞核中,表明不同成员功能上可能存在多样性。进化树分析表明,13个非洲菊PLC蛋白可分为2个亚组,进化关系较近的蛋白结构组成相似。非洲菊PLC家族成员在拟南芥中的同源蛋白PLC2、PLC4、AT2G40116可相互作用。非洲菊转录组的FPKM值分析表明,GjPLC2、GjPLC3、GjPLC8、GjPLC10在非洲菊中表达量高,感病植株中变化大,可能在抵御真菌感染过程中发挥重要作用。研究结果可为进一步研究非洲菊PLC基因的生物学功能提供依据。     

非洲菊头状花序发育时期的划分与最佳采切期

对非洲菊(Gerbera jamesonii)3个品种‘Red-Tube’(红色单瓣),‘Cora’(红色复瓣),‘Delphi’(白色复瓣)花序发育过程、维管束结构进行研究,同时结合切花保鲜试验,确定3个品种的最佳采摘期。结果表明:3个品种非洲菊花序的发育过程可分为9个时期;品种‘Red-Tube’最佳采切期为开花期的一轮露药开花期(即Ⅵ期),品种‘Cora’与‘Delphi’最佳采切期均为开花期的隐药开花期(即Ⅴ期)。这2个时期切花外观上具有较好的观赏价值,单个维管束平均面积大,韧皮纤维厚,导管数目多,具有较强的输导功能与机械支持作用。     

澳洲鸽子石斛兰花梗芽组织培养技术研究

以澳洲鸽子石斛兰（Dendrobium kingianum Bidwill）的花梗为外植体,研究花梗芽的诱导、增殖和生根情况。结果表明：在1号诱导培养基[MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%椰子汁（CM）]和2号诱导培养基（MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AC 1.0 g/L+10% CM）中均能诱导出芽,尽管在诱导过程中70.6%带节间的花梗茎段因不能诱导出侧芽或侧芽弱小而死亡,但为种苗生产和种质资源的保护提供了一种有效途径。在增殖培养过程中,2号增殖培养基（MS+6-BA 3.0 mg/L+AD 3.0 mg/L+10% CM）有利于增殖培养;在生根壮苗过程中,生根培养基（1/2 MS+NAA 0.3~0.5 mg/L+10% CM）适宜澳洲鸽子石斛兰‘金斯卡’的生根培养。     

甘蓝型油菜组培苗生根培养体系的优化

为解决油菜组织培养中组培苗生根细短、移栽不易成活的问题,以甘蓝型半冬性油菜转化pCAMBIA1301空载体的再生植株为材料,从生根时间、根长、根重、苗高、苗重、总重、生根数、生根率等方面,以MS和B5为基础培养基,分别使用琼脂糖、琼脂粉及植物凝胶为凝固剂时再生苗的生根效率,得到了两种基础培养基的最适凝固剂组合;在以上两种组合的培养基中分别加入不同浓度蔗糖,进一步比较生根情况和成本,认为含20 g/L蔗糖的B5琼脂粉培养基为最优配方。利用优化后的生根培养基配方,极大地促进油菜组培苗的生根长度和数目,提高后期移栽成活率。     

根癌农杆菌介导的大豆子叶节转化体系的优化

以13种不同基因型的大豆为材料,研究了大豆外植体再生过程中不同大豆基因型对丛生芽数目的影响,选取优势基因型为受体材料,比较了在草丁膦和潮霉素筛选压力下外植体的再生情况,并确定其合适的筛选浓度,在对农杆菌介导的子叶节转化体系优化的基础上进行了大豆转化效率的研究。结果显示:在相同的芽诱导条件下,山宁14产生的丛生芽最多,更适合于大豆子叶节转化;与其它筛选剂相比,采用潮霉素的梯度筛选更有利于抗性苗的成活,其最适筛选浓度为8 mg.L-1;通过检测GUS基因的表达和分子鉴定证明外源的GUS基因已插入到转基因植株的基因组中,转化效率达到3.2%。     

Net photosynthetic rate of cocksfoot leaves under continuous and fluctuating shade conditions in the field

Maximum light‐saturated photosynthetic rate (Pmax) and stomatal conductance (gs) of field‐grown cocksfoot (Dactylis glomerata L.) leaves in a silvopastoral system were measured at different times under moderate (850–950 µmol m^?2 s^?1 photosynthetic photon flux density, PPFD) and severe shade (85–95 µmol m^?2 s^?1 PPFD). Also Pmax and gs were measured after 30, 60 and 180 min of severe shade to determine the lag in the rise of photosynthesis rate from low to high irradiance levels (induction state). The highest Pmax and gs values obtained were 26·5 µmol CO₂ m^?2 s^?1 and 0·41 mol H₂O m^?2 s^?1 in non‐limiting conditions with full sunlight (1900 µmol m^?2 s^?1 PPFD). These values were defined as standardized dimensionless Pmax_s=1 and gs_s=1 for comparison of treatment effects. The Pmax_s under severe shade decreased by 0·004 units per minute from 1 to 180 min and reached a steady‐state of 0·37 units after 140 min. Under moderate shade, Pmax_s decreased by 0·002 units per minute from 1 to 120 min and reached a steady‐state of 0·76 units. The time required to reach full induction on return to full sun (Pmax_s=1) was 15 min after 30 min of severe shade and 37 min after 180 min of shade. Mathematical equations were derived to describe the changes in Pmax_s and gs_s under severe and moderate shade and during induction. The rate of change of gs_s was slower than for Pmax_s on entering shade and also slower during the subsequent induction process. This indicated other factors in addition to gs were operating in the reduction and increment of Pmax and a two‐step model to explain this is proposed. The defined photosynthetic responses of cocksfoot leaves to fluctuating light regimes could be used to develop quantitative predictions of Pmax for inclusion in a canopy photosynthesis model of silvopastoral systems.     

头季稻株营养物质与再生稻生育的关系

以汕优６３为材料，研究了头季稻中后期的营养状况对再生芽（苗）生长、再生稻的生育期及植株性状与经济性状的影响和头季稻后期茎书与再生芽（苗）的糖、Ｎ供求关系以及分析头季稻茎节的糖、Ｎ含量与活芽（苗）率、芽长、芽穗分化率和芽穗分化期等的相关性。指出促成头季稻茎节淀粉和全糖积累的措施均有利于强秆壮芽，争取再生稻多收。     

建莲莲心黄酮类物质水浸提条件优化

以建莲莲心为原料,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定了水浸提莲心黄酮类物质的最佳工艺条件为浸提温度90℃、浸提时间45 m in、料液比3∶100,在此条件下莲心黄酮类物质提取率为0.9882%。     

大豆胚尖再生体系的优化及与子叶节再生体系的比较

研究了浸种时间、诱导时间、6-BA浓度3个因素对吉育91胚尖不定芽诱导的影响,并将优化的胚尖再生体系与子叶节再生体系进行比较。结果表明,浸种24 h最适宜胚尖不定芽的形成,不定芽诱导率可达到85.1%,平均芽数可达到4.9个;诱导培养48 h时不定芽诱导率及平均芽数较高,分别为84.2%和5.3个;诱导培养基中6-BA浓度为2.0～3.0 mg.L-1时,不定芽诱导及伸长状况最佳。除了生根率差异不显著外,吉育91胚尖再生体系在再生能力与培养周期上均显著优于子叶节再生体系,因此更适合作为遗传转化的受体材料。     

大豆子叶节遗传转化体系优化及抗逆基因AtNHX5的转化研究

以河北省优良大豆品种冀豆15、五星2号和NF-58的子叶节为受体材料,利用农杆菌介导法进行遗传转化,探讨了影响农杆菌侵染后子叶节不定芽诱导的因素。结果表明:以萌发6 d、4℃处理24 h的子叶节为外植体,农杆菌侵染后经超声波处理30 s、共培养基中添加20 mg·L-1硝酸银,能够提高子叶节丛生芽诱导率,转化植株经草铵膦筛选以及PCR检测,T0代转化率达0.97%。利用该体系对大豆品种五星2号进行At NHX5基因的遗传转化,获得3株T0代RT-PCR检测阳性植株,且2-1号T1代阳性植株检测具有一定耐盐性,初步证明获得了转At NHX5基因的大豆新材料。