牛源腔隙莫拉菌的分离鉴定与药敏试验

为确定河北省某牛场牛细菌病的病原,本研究从采集的发病牛鼻腔拭子样品中分离到1株细菌,并对其进行常规形态学观察、生化鉴定、16S rDNA基因序列测定、动物致病性试验及药物敏感试验。结果显示,该分离菌株与腔隙莫拉菌的同源性为97.6%,系统发育进化分析显示其与腔隙莫拉菌位于同一进化分支;该菌株对小白鼠具有一定的致病性,将其命名为Mor QHD-1。西药药敏试验结果显示,分离菌株Mor QHD-1对氨苄西林、环丙沙星、阿米卡星等敏感;对磺胺间甲氧嘧啶、复方新诺明、磺胺二甲氧嘧啶耐药;中药药敏试验结果显示,分离菌株Mor QHD-1对苏木、诃子、乌梅、黄柏、五味子、黄连、五倍子极敏感;苏木、诃子、乌梅、黄柏、五味子、黄连、五倍子对该菌的最小抑菌浓度在1.95 mg/mL～31.25 mg/mL之间,最小杀菌浓度在3.91 mg/m L～62.5 mg/mL之间;本研究在国内首次分离到牛源腔隙莫拉菌,为进一步研究腔隙莫拉菌的致病机制、耐药机制及其跨物种传播奠定了基础。     

贵州地区紫云花猪腹泻病原菌的分离鉴定及耐药性分析

为了鉴定贵州地区紫云花猪腹泻病原菌,分析其耐药性,试验采用细菌学常规鉴定、16SrRNA基因测序、K-B药敏纸片法对从贵州地区不同养猪场采集的患腹泻紫云花猪肝脏、肛拭子、粪便等样品196份进行细菌分离鉴定,并分析其耐药性。结果显示,从采集的196份样品中分离得到了60株大肠杆菌、35株沙门菌、20株志贺菌,分离的60株大肠杆菌对庆大霉素、阿莫西林、强力霉素等5种药物的耐药率在70.0%以上,对其他药物耐药率在15.0%~40.0%之间,耐11、10种药物的菌株最多,分别占分离菌株31.7%、23.3%;分离的35株沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、氟苯尼考等5种药物的耐药率在58.3%以上,对其他药物耐药率在48.6%~17.1%之间,耐10、9种药物的菌株最多,分别占分离菌株25.7%、22.9%;分离的20株志贺菌对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等9种药物的耐药率在65.0%以上,对其他药物的药物耐药率在25%~35%之间,耐9、8种药物的菌株最多,分别占分离菌株30.0%、20.0%。本研究为该地区紫云花猪细菌性腹泻的防控提供研究基础。     

肉牛上呼吸道肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药分析

为研究重庆地区规模化肉牛场肉牛上呼吸道中肺炎克雷菌的带菌状况及耐药性。本研究从重庆荣昌、丰都两地肉牛上呼吸道分离细菌,采用形态学观察、生化鉴定及16SrRNA分子方法鉴定,获得12株肺炎克雷伯菌,分离率为19.7%,表明肺炎克雷伯菌是肉牛上呼吸道中主要的一种条件致病菌;分离菌株对庆大霉素,丁胺卡那霉素,头孢他啶,妥布霉素等药物敏感,对乙酰螺旋霉素,氨苄西林,苯唑西林耐药率达到100%,分离株存在多重耐药,但两个地区的分离株在耐药性上存在一定差异。     

河南鸡源沙门菌的分离鉴定及其耐药性分析

对来自河南郑州、许昌、周口等20个地市101个鸡场的161份疑似沙门菌感染的病料进行病原菌分离鉴定和耐药性试验。通过细菌分离培养、形态染色、生化试验、血清学试验、致病性试验,结果分离鉴定出33株沙门菌,且均具有明显的致病性。药敏试验发现,33株分离株除对头孢曲松较为敏感(51.5%)外,对其他13种药物均呈不同程度耐药性,对复方新诺明的耐药率最高,为81.8%(27/33),其次为喹诺酮类药物,且表现为交叉耐药现象。对环丙沙星产生耐药性的菌株占分离株总数的75.7%(25/33),对诺氟沙星耐药的菌株占69.7%(23/33),对氧氟沙星耐药的菌株占63.6%(21/33)。结果表明:不同地区的分离菌株对各种药物的耐药性不同,同一地区的分离菌株对各种药物的耐药性也存在显著差异。     

火烈鸟腹泻沙门菌分离鉴定、致病性及耐药性检测

为了分析火烈鸟(Phoenicopterus ruber)腹泻沙门菌(Salmonella)的致病性及耐药性情况,2016—2020年采集动物园中患腹泻火烈鸟的粪便、肛拭子和死亡火烈鸟的肝脏等病料组织102份,采用细菌分离鉴定和PCR方法进行沙门菌鉴定,采用人工感染小白鼠致病性试验和K-B药敏纸片法分别检测分离菌株的致病性和耐药表型情况。结果显示:从102份病料组织中分离得到89株沙门菌,其中75株沙门菌对小白鼠具有致病性,这75株沙门菌分离菌株对链霉素、阿莫西林、氨苄西林等14种药物耐药率在45.3%以上,对其他药物的耐药率为13.3%～22.7%,且呈现多重耐药性,耐12、11、10种药物的分离菌株最多,分别占分离菌株的16.0%、18.7%和17.3%。说明该动物园分离的火烈鸟腹泻沙门菌对小白鼠具有致病性,耐药性严重且呈现多重耐药性。     

河南驻马店地区猪源肺炎克雷伯氏菌分离菌株生物学特性

为了分析驻马店地区猪源肺炎克雷伯氏菌分离菌株生物学特性,从驻马店地区不同养殖场中采集患呼吸道疾病猪肺脏、鼻拭子等病料组织74份中分离得到了43株肺炎克雷伯氏菌。采用人工感染小鼠致病性试验、PCR方法和K-B药敏纸片分别检测49株肺炎克雷伯氏菌的致病性、血清型及耐药性。结果显示,30株肺炎克雷伯氏菌对小鼠具有很强的致病性;43株分离菌株以K5、K20为主要流行血清型,分别占分离菌株的37.2%、27.9%;43株分离菌株对氨苄西林、阿莫西林、大观霉素等7种药物耐药性较高,耐药率在51.2%以上,对其他药物的耐药率在18.6%~234.9%之间,且呈现多重耐药性,耐10、9种药物分离菌株最多,分别占分离菌株的25.6%、27.9%。本试验为该地区猪源肺炎克雷伯氏菌病的防治提供理论基础。     

河南省鸡源沙门菌新近流行株的分离鉴定及其耐药性分析

旨在了解河南省鸡沙门菌临床分离株血清型分布及药物敏感情况。从河南省各地区养鸡场共采集了沙门菌可疑病料617份,按常规方法进行分离,经生化、PCR及血清型鉴定,共分离出98株鸡源沙门菌,其中血清型定型82株,主要为肠炎沙门菌(62.24%)、鸡白痢沙门菌(18.37%)。进一步Kindy-Bauer(KB)法检测分离菌株对22种药物敏感性表明,所有分离菌株对多粘菌素B、阿米卡星、庆大霉素、萘啶酸较为敏感,对阿齐霉素和氨苄西林耐药率在60.00%～70.00%之间,对红霉素和青霉素表现为极高的耐药性,耐药率高达100.00%。三重以上耐药菌株高达96.94%,七耐以上的菌株为56.12%,耐药最多的菌株可耐18种抗生素。由此可见,河南省禽类沙门菌的感染流行主要以肠炎沙门菌和鸡白痢沙门菌为主,多重耐药十分严重,严重影响了禽类沙门菌病的诊治与预防。     

四川凉山地区奶牛乳房炎主要病原菌分离鉴定及药敏情况分析

通过开展凉山地区奶牛乳房炎主要病原菌的分离鉴定和药敏情况试验,为指导凉山地区奶牛场临床合理使用抗生素以及提高抗生素的防治效果提供理论指导。通过采样、增菌培养、细菌鉴定、药敏试验、数据统计分析等方法,结果发现193 份患有乳房炎的乳样中有134 份分离出12 种病原菌,其中65 份检出两种及以上菌,占检出数的48.50%﹔共分离出234 株不重复菌株。分离率居前五位为：葡萄球菌63 株（26.9%）、大肠杆菌56 株（23.8%）、肺炎克雷伯菌42 株（17.9%）、肠球菌24 株（10.3%）、链球菌13 株（5.6%）。对本试验分离到的大肠杆菌、葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等12 种菌中的10 种细菌药敏试验结果显示,不论是革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌对试验选取的17 种常见抗生素均表现不同程度的耐药,有部分菌株还表现严重的多重耐药,有些菌株对部分药物耐药率达100.00%。     

沧州地区猪源肺炎克雷伯菌分离菌株、耐药性及耐药基因检测

为了分析沧州地区猪源肺炎克雷伯菌耐药性及耐药基因流行情况,试验采用细菌学常规的分离鉴定方法和16S rRNA PCR法,从沧州地区不同养殖场中采集患呼吸道疾病猪肺脏、肝脏、鼻拭子等病料组织123份,分离得到了45株致病性肺炎克雷伯菌。采用K-B药敏纸片法和PCR法分别检测45株致病性肺炎克雷伯菌的耐药性及耐药基因流行情况。结果显示,45株致病性肺炎克雷伯菌分离菌株对阿莫西林、氨苄西林、氟苯尼考等9种药物耐药性较高,耐药率在55.6%以上;对其他药物耐药率在13.3%～22.2%;分离菌株呈现多重耐药现象,耐11、10种药物分离菌株最多,分别占分离菌株的24.4%、28.9%;bla_(TEM)、ant(3″)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅱa、sul2、sul3五种耐药基因检出率较高,检出率在80.0%以上;bla_(SHV)、floR、qnrA三种耐药基因检出率在37.8%～46.7%;bla_(CTX-M)、mcr-1、qnrS、rmtB四种耐药基因未检出。说明该地区分离的45株致病性肺炎克雷伯菌耐药性严重,呈现多重耐药现象,携带耐药基因复杂。     

河北省保定地区雏鸡鸡白痢沙门菌的分离鉴定及耐药性检测

为了有效防控雏鸡白痢沙门菌病,试验自保定某蛋种鸡场疑似为鸡沙门菌病雏鸡采取肝脏病料进行细菌的分离培养、生化鉴定、鸡白痢沙门菌多价血清学鉴定及沙门菌inv A基因PCR鉴定,并对分离菌进行致病性检测及对7种抗菌药物的耐药性检测。结果表明,10株分离菌的形态特征、生化特性、血清学鉴定结果符合鸡白痢沙门菌的特征,说明从病死雏鸡组织中分离出的细菌为鸡白痢沙门菌。沙门菌inv A基因PCR扩增出373 bp目的片段,进一步证实分离菌为鸡沙门菌。用分离菌株接种雏鸡,其死亡率高达90%,表明该菌株有很高的致病性。10株分离菌株对阿莫西林和青霉素耐药率达100%,对阿齐霉素的耐药率达90%,而对阿米卡星、头孢唑林和庆大霉素耐药性较弱、对氧氟沙星较为敏感。3耐菌株多重耐药比例为42.86%,4耐菌株多重耐药比例为57.14%,5耐菌株多重耐药比例为71.43%,说明雏鸡沙门菌分离株对所试抗菌药物均表现出不同程度的耐药性,且表现出多重耐药现象。本试验为鸡白痢沙门菌病的防治提供参考。     

辽宁地区猪场呼吸道病原菌的分离鉴定与耐药分析

为了了解辽宁地区规模化养殖场(户)中猪呼吸道病原菌的流行分布情况及耐药性情况。对2022—2023年采集规模化养殖场(户)中不同阶段的猪患呼吸道症状的咽拭子、鼻拭子、肺脏、肝脏及肾脏等病料组织349份，采用常规细菌分离鉴定方法对采集的349份猪患呼吸道症状的咽拭子、鼻拭子、肺脏、肝脏及肾脏等病料组织进行鉴定，采用K-B药敏纸片法分别测定分离呼吸道细菌性病原菌对临床中常用的药物耐药情况。结果显示：从349份病料样品中多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌支气管败血波氏杆菌菌株的检出率分别为7.8%(26株)、 12.2%(40株)、11.5%(39株)、21株(6.0%);分离的4种呼吸道病原菌均对头孢噻呋、头孢噻肟、氟苯尼考等7种药物敏感，对阿莫西林、氨苄西林、新霉素等7种药物耐药。本研究为该地区规模化养殖场及散养户中不同阶段的猪呼吸道病防控及合理指导临床用药提供参考。     

河南省42株奶牛临床型乳房炎病原菌的分子鉴定及药敏试验

为了解近年来河南省奶牛临床型乳房炎的主要病原菌种类及药物敏感性,从郑州、焦作等地奶牛场采集乳房炎奶样47份,采用微生物学方法、16S rRNA基因PCR扩增、序列分析比较等方法对分离菌株进行鉴定,并用K-B纸片法对分离菌株中的26株致病菌进行药物敏感性试验。结果显示,47份奶样中共分离出17种42株细菌,环境性病原菌32株,主要包括大肠杆菌、克雷伯氏菌、芽孢杆菌、葡萄球菌等,检出率17.6%~20.6%。郑州2家奶牛场分离出的23株致病菌对16种药物均有不同程度的耐药,耐药率4.35%~56.52%。焦作1家奶牛场分离出的3株病原菌只对复方新诺明、氨苄西林、四环素、氯霉素耐药。部分菌株多重耐药严重,同时对3~11种药物耐药。结果说明分离的奶牛临床型乳房炎的病原菌种类很多,并且已经产生了严重的耐药性。     

冀北地区致犊牛腹泻奇异变形杆菌的分离鉴定及耐药性研究

为鉴定冀北地区养殖场中引起犊牛腹泻的病原菌,本实验于2021年～2023年采集冀北地区养殖场中患腹泻病奶肉犊牛的肛拭子、粪便及肝脏等病料样品247份,采用细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定和ureR基因的PCR扩增等方法进行细菌的分离鉴定,结果显示,从采集的247份患腹泻病的奶肉犊牛病料样品中分离并鉴定到102株奇异变形杆菌(PM)。将分离菌人工感染小鼠(0.20 m L/只,含菌量为108cfu/mL),检测PM对小鼠的致病性。结果显示其中72株PM引起小鼠发病与死亡,为致病性PM,小鼠的死亡率在40%～100%。采用PCR方法及K-B药敏纸片法分别检测分离菌的毒力基因、相关耐药基因及耐药性,采用SPSS19软件中的Fisher确切概率法分析PM耐药表型与相关耐药基因之间的相关性。结果显示,毒力基因fliL、zapA、pmf A、atfA、rsb A、ureC、atfC在72株致病性PM中的检出率在63.4%～100%,其他毒力基因的检出率在2.7%～8.1%;72株致病性PM对阿莫西林、氨苄西林、安普霉素等12种药物耐药的菌株占51.4%以上,对其他药物耐药的菌株占6.9%～33....     

断奶仔猪腹泻病原菌的分离鉴定及药敏试验

为鉴定承德地区断奶仔猪腹泻病原菌并分析其耐药性,从承德地区不同养猪场采集腹泻断奶仔猪的肝脏、肛拭子、粪便等样品120份,试验采用细菌学鉴定法、K-B药敏纸片法进行细菌分离鉴定与药敏试验。结果显示,从采集的120份样品中分离得到了大肠杆菌42株、沙门菌23珠、志贺菌12株,42株大肠杆菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等7种药物耐药率在59.5%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星等4种药物耐药率为14.3%～31.0%;23株沙门菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等8种药物的耐药率在47.8%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星3种药物的耐药率为13.1%～34.8%;12株志贺菌分离株对阿莫西林、氟苯尼考、新霉素等7种药物的耐药率在50.0%以上,对头孢噻呋、头孢曲松、恩诺沙星等4种药物耐药率为16.7%～33.3%。研究为该地区断奶仔猪细菌性腹泻的防控提供理论基础。     

1株肉种鸭源金黄色葡萄球菌分离鉴定与药敏试验

为了确定引起肉种鸭死亡的病原菌,从无菌采集死亡肉种鸭的肝脏、心血、关节渗出液等病料组织中分离一株病原菌,通过培养特性、形态学观察、生化试验、16S rRNA PCR、等方法鉴定为金黄色葡萄球菌。人工感染肉种鸭验证其分离菌株的致病性,结果表明,分离菌株对肉种鸭致死率为100%。用K-B药敏纸片法分析分离菌株的耐药性,结果显示,分离菌株对头孢曲松、头孢噻肟、环丙沙星等5种药物敏感,对氨苄西林、恩诺沙星、卡娜霉素等4种药物中敏;对青霉素、阿莫西林、强力霉素等5种药物耐药。本试验为肉种鸭葡萄球菌病的防治提供参考依据。     

兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因检测

本试验旨在了解近年来浙江省兔支气管败血波氏杆菌的感染情况及耐药状况,指导合理用药,检测细菌的耐药基因,探究其耐药机理.根据细菌形态、培养特性、生化试验,结合PCR法对分离菌株进行鉴定;K-B纸片扩散法检测细菌对18种常用抗生素的耐药率;设计耐药基因特异性引物,PCR法扩增耐药基因,并进行测序分析.结果显示,分离鉴定出2012-2014年22株兔支气管败血波氏杆菌;药敏结果显示,分离菌对青霉素G、头孢拉定、链霉素、林可霉素、克林霉素、甲氧嘧啶耐药严重,对多黏菌素B、左氟沙星、强力霉素、四环素等药物敏感,耐β-内酰胺类药物的细菌中检测到耐药基因bla_TEM.结果表明,兔支气管败血波氏杆菌是引起兔呼吸道疾病的主要病原菌,分离菌多重耐药,耐药率较高,检测到的耐药基因与耐药表型相符.     

养殖型吉富罗非鱼暴发性死亡的病原菌分离鉴定及药敏测定

为查明广西全州县养殖吉富罗非鱼大批死亡的病原及其药物敏感性,为生产中有效防治该病提供参考。按常规方法从患病罗非鱼的腹水、肝脏和心脏中分离细菌,人工感染确定病原菌,以API 20NE生化鉴定和16S rRNA分子鉴定相结合的方法鉴定病原菌并确定其系统发育地位,K-B纸片扩散法检测病原菌的药物敏感性。试验结果,从患病吉富罗非鱼中分离到1株优势菌株GXQZ1,经API 20NE生化鉴定和16S rRNA分子鉴定为类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides),与Plesiomonas shigelloides HRS12816L株的同源性最高(99.3%)。根据人工感染试验结果,认为该菌株是引起广西全州县养殖吉富罗非鱼大批死亡的病原菌。该菌对先锋Ⅴ、先锋Ⅵ、复方新诺明等12种药物高度和极度敏感,对苯唑青霉素等3种药物耐药。     

50株鸭源致病性沙门氏菌的分离鉴定及药物敏感性检测

本文采用常规分离方法,从玉林地区规模化鸭场2007～2009年间疑似感染沙门氏菌的病雏鸭及病死雏鸭的心血和肝脏中,分离出50株致病性沙门氏菌,用56种沙门氏菌属诊断血清进行了血清学定型,并采用WHO推荐的Kirby-Bauer法进行了药物敏感性检测。结果表明,50株分离菌有13株能定型,分属O9群和O4群。分离菌株对37种抗菌药物的耐药率达50%以上的药物有17种（占45.9%）,菌株多重耐药性已相当普遍,所有菌株都耐药4种以上,其中耐药17种的菌体占64%。     

致奶牛乳房炎肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及防治建议

肺炎克雷伯氏菌为革兰氏阴性菌,是重要的条件性致病菌和医源性感染菌之一,也是引起奶牛乳房炎的重要病原菌。本研究对30份奶牛乳房炎乳样进行了病原菌的分离鉴定,并对分离菌进行药物敏感试验;结果表明,本次共分离肺炎克雷伯氏菌3株,遗传进化树关系显示分离菌株KP1、KP3与CP031810株、CP031562株、CP032185株亲缘关系较近,分离株KP2则相对较远。药物敏感试验结果显示,3株分离株均对阿莫西林、头孢他啶、头孢曲松耐药,对链霉素、庆大霉素表现敏感,分离菌株KP1和KP3对青霉素表现中度敏感,菌株KP2则表现耐药。本研究为奶牛场针对该菌的防控提供了基础数据。     

1株雏鸡致病性肺炎克雷伯菌分离鉴定与系统进化发育分析

为了确定引起雏鸡死亡的病原菌,从发病致死的雏鸡体内分离1株病菌,采用细菌常规的分离鉴定、16S rRNA基因测序、致病性试验、K-B药敏纸片法等分别对分离菌株进行鉴定、致病性及耐药性检测。结果显示,分离株鉴定为致病性肺炎克雷伯菌;其16S rRNA基因序列与GenBank登录的12株肺炎克雷伯菌参考株同源性在98%～99%之间,与肺炎克雷伯菌参考株KP262416.1聚于一支,与KJ803938.1聚于一大支,且与2株参考株存在密切的遗传进化关系;该菌株对头孢曲松、头孢克肟、恩诺沙星等4种药物敏感;对环丙沙星、新霉素、丁胺卡那霉素等6种药物中敏;对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等6种药物耐药。