双酶水解法制备大豆多肽的研究

[目的]研究酶解法制备微苦大豆多肽的新方法,为其在食品和药品领域的广泛应用提供参考。[方法]选择Alcalase蛋白酶和Flavourzyme酶对大豆分离蛋白进行分步水解。采用单因素分析法和正交试验设计,研究pH值、温度、酶浓度和底物浓度等因素对Alca-lase蛋白酶水解效果的影响,确定其最佳的水解条件。并且,对Flavourzyme酶的脱苦作用进行了研究。[结果]Alcalase蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解条件是pH值8.0,温度60℃,酶浓度1000U/g、底物浓度3%,水解时间2h,此时的大豆分离蛋白水解度可达46.13%。Flavourzyme酶可明显降低大豆多肽的苦味。[结论]采用Alcalase蛋白酶和Flavourzyme酶分步酶解法制备的大豆多肽无明显苦味,可被广泛应用于食品生产中。     

双酶分步酶解制备玉米多肽

在Alcalase酶水解玉米蛋白粉研究的基础上,以多肽得率为指标,从5种不同蛋白酶中筛选出Protex.7L酶作为最适水解酶继续酶解玉米蛋白Alcalase酶水解物.采用响应面分析法确定Protex.7L酶继续酶解制备玉米多肽的最佳工艺参数为加酶量1090 U·g-1,p H 7.6,反应温度42.0℃时,继续酶解60 min.在此条件下,体系最终的多肽得率可达(56.28±0.18)%,与理论预测值的相对误差为±1%,比单独应用Alcalase酶提高21.05%.     

超声波对双酶水解玉米蛋白的影响

试验对超声场下双酶水解玉米蛋白的酶解反应条件进行了研究,并与恒温水浴条件下玉米蛋白的水解度进行了对照。单因素试验及正交试验结果表明,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶按一定比例复合水解的水解度比单独采用其中的一种有所提高:超声功率为1 000 W,超声时间与间歇时间比为2 s∶30 s,底物浓度3%,总酶浓度(中性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶浓度比为2∶1)5%,pH 7.5的条件下,玉米蛋白的水解度可达58.73%。     

共固定化双酶水解芝麻粕蛋白制备复合氨基酸研究

以海藻酸钠为载体、戊二醛为交联剂共固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,选择合适的固定化工艺,研究水解芝麻粕蛋白的优化条件和共固定化双酶的稳定性。结果表明：共固定化双酶的最佳条件为海藻酸钠3 g.dL^-1,戊二醛25 g.L^-1,氯化钙0.2 g.dL^-1,酶活力回收率为51.28%;水解芝麻蛋白的最佳条件为固液比1：25,pH 6.0,温度60℃,时间7 h,加酶量5 g.dL^-1,氨基氮含量最高为20.65 m g.g^-1,共固定化酶重复使用6次,酶活力仍保持50%以上。     

混酶水解法制备的鲢鱼皮多肽的抗氧化活性

以鲢鱼皮为原料,采用混酶水解法制备鲢鱼皮抗氧化肽,经超滤膜分离得到SP1(6 ku)、SP2(3～6 ku)、SP3(3 ku)3种组分,研究不同分子质量组分的体外抗氧化能力及SP1和SP3组分的氨基酸组成,并选出体外抗氧化能力最强的SP3组分,进行体内抗氧化活性评价。结果表明:3种组分的羟自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和还原能力从高到低的顺序均为SP3SP2SP1,而铜离子螯合率无显著差异;氨基酸分析结果显示SP3组分中疏水性氨基酸所占比例较高;体内抗氧化试验显示:相较于损伤模型组,灌服SP3组分的小鼠肝脏和脾脏指数明显增大,且血清和肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的酶活力明显提高,丙二醛(MDA)含量明显降低。综上可知,SP3组分在体内外均具有较好的抗氧化活性。     

酶法水解蛋清蛋白制备多肽的条件优化

为利用蛋清开发活性肽提供理论依据,以水解度为主要指标,对水解蛋清蛋白的蛋白酶予以筛选,并分别进行了加酶量、水解温度、时间和pH等因素对水解度的影响试验,在此基础上进行正交试验优化其水解条件。结果表明:酶法水解蛋清蛋白制备多肽的优化水解工艺条件为加酶量0.8%、水解温度55℃、时间5h、pH 6.5,在此条件下水解度为44.38%,多肽含量达22.3mg/mL。     

玉米蛋白粉水解多肽对光磷水蜈蚣的生根抑制活性

以木瓜蛋白酶、中性蛋白酶为水解酶,以玉米蛋白粉为底物,制备出不同酶解时间条件下的玉米蛋白水解多肽。用培养皿生物分析法检测不同玉米蛋白水解多肽在不同浓度(0.5 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、5 mg/mL)条件下对光磷水蜈蚣(Kyllinga brevitoliavar.leiolepis)种子生根抑制活性。结果表明:①两种蛋白酶不同水解时间制备的玉米蛋白粉水解多肽对光鳞水蜈蚣种子萌发生根均有抑制作用,且随着浓度增高生根抑制活性增强;②木瓜蛋白酶在水解3 h和6 h制得玉米多肽的生根抑制活性明显优于水解9 h和12 h制得的玉米多肽,而中性蛋白酶在不同水解时间水解玉米蛋白粉所得的水解多肽对光磷水蜈蚣的抑制活性无显著性差异;③木瓜蛋白酶制备的玉米多肽比中性蛋白酶制备的玉米多肽生根抑制活性强,并达到极显著性差异水平(P<0.01)。     

玉米蛋白水解条件研究

小肽的高营养易吸收性对于促进幼雏消化系统早期发育及维护动物肠道健康具有重要意义。采用生物酶体外酶解玉米蛋白,通过单因素分析法研究了碱性蛋白酶水解玉米蛋白的条件,结果表明:当pH值为9、酶量为2 mL、温度为55℃、变性剂A为0.5 g时,玉米蛋白在1 h内的水解度可达30.85%。     

长牡蛎蛋白双酶水解工艺及其产物的抗氧化活性

使用中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解长牡蛎(Crasostrea gigas)蛋白,采用单因素试验分析了水解时间、pH和酶用量比对水解度的影响,并在此基础上设计正交试验优化酶解的工艺条件,并测定了酶解产物的还原能力和对DPPH自由基的清除能力.结果表明,中性蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解牡蛎蛋白的最佳工艺条件为酶解时间3h、pH 7、U中性蛋白酶∶U 胰蛋白酶=1∶3,此时水解度为27.09％;酶解产物具一定的还原能力并对DPPH自由基有较强的清除作用.     

Alcalase水解猪皮蛋白制备多肽的研究

以新鲜猪皮为原料,通过超微粉碎、干燥、脱脂,制备成蛋白含量达94.11%的猪皮蛋白粉。采用Alcalase对猪皮粉进行水解,研究了pH值、时间、酶与底物比、温度4个因素对水解度的影响,在此基础上通过正交试验确定了Alcalase水解猪皮粉的最佳条件为:时间90 min,温度55℃,pH值10.0,酶与底物比35μL/g。电泳试验结果表明,随着水解程度的加大,水解产物多肽分子量逐渐变小。     

酶法制备大豆蛋白成骨活性肽

[目的]探究从大豆分离蛋白双酶分步酶解产物中分离促成骨细胞增殖肽的工艺,为大豆产品的开发提供参考.[方法]以促成骨细胞增殖活性作为测定指标,选用木瓜蛋白酶酶解大豆分离蛋白(SPI),采用MTT法检测不同浓度的木瓜蛋白酶酶解产物对成骨细胞的促增殖活性.采用pH-Stat法检测水解时间为1、2、3、4、5和6h的木瓜蛋白酶...     

碱解玉米芯制备阿魏酸和对香豆酸

[目的]利用碱解农林废弃物制备阿魏酸和对香豆酸。[方法]对4种农林废弃物(花生壳、玉米秸秆、小麦秸秆、玉米芯)进行比较,发现玉米芯最适合用于提取阿魏酸和对香豆酸。考察不同氢氧化钠浓度、固液比(玉米芯/碱液)、提取温度、提取时间对玉米芯中阿魏酸和对香豆酸提取量的影响。[结果]提取玉米芯中阿魏酸的最佳工艺条件为:氢氧化钠浓度为0.5 mol/L,固液比(玉米芯/碱液)为1∶30 g/ml,提取温度为50℃,提取时间为2.5 h。在此条件下,阿魏酸的提取量最高为14.05 mg/g,对香豆酸的提取量为21.12 mg/g。[结论]研究可为提高玉米芯的附加值利用提供依据。     

大豆活性肽酶解工艺的研究

采用物理方法与酶解技术相结合水解大豆分离蛋白制备大豆肽。确定了大豆肽的制备工艺参数，即：温度为55℃，pH为8．5，底物浓度为3％，酶与底物比为6％，水解时间为1．0h，此条件下水解度(DH)为92．27％，并分析了各工艺参数对水解效果的影响；微波处理能提高水解度(DH)和氮溶指数(NSI)5％以上。     

双酶水解黄粉虫水溶性蛋白制备抗氧化肽的研究

以黄粉虫幼虫的水溶性蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和胰蛋白酶水解制备抗氧化肽,并对其水解工艺进行优化。以.OH清除率为指标,在单因素的基础上设计3因素(加酶量、pH和酶解温度)3水平的二次正交旋转组合试验。结果表明,双酶水解的最佳工艺条件为:m(料)∶V(液)=1∶20、水解时间2 h、加酶量17.36 mg/g(碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1)、pH8.0、温度46.5℃。在此条件下制得的多肽具有较强的还原力,对DPPH.和.OH有较强清除作用。     

木瓜蛋白酶水解林蛙皮制备活性肽的工艺研究

[目的]以林蛙皮为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备活性肽。[方法]选取固液比、酶用量、pH、水解时间和水解温度为影响因素,以活性肽的水解度为考察指标,通过单因素试验和正交试验优选木瓜蛋白酶酶解林蛙皮制备活性肽的最佳工艺条件。[结果]最优工艺条件为固液比1∶4,酶用量14 000 U/g,pH 7.0,水解温度55℃,水解时间4 h。[结论]该研究为林蛙资源的综合利用提供了新的途径。     

酶磨法处理玉米秸秆的糖化发酵研究

将纤维素酶、木聚糖酶分别与湿磨相结合对玉米秸秆进行了预处理,对不同料液浓度的酶磨玉米秸秆进行了糖化发酵研究。试验结果表明:当经纤维素酶、木聚糖酶酶磨处理的玉米秸秆料液的酶解浓度均为6%时,还原糖收率最高,分别为37.2%和33.5%;对酶解后的料液进行酒精发酵,发现在酶解料液浓度为11%时,酒精浓度最高,分别为3.0%和2.8%。     

同化玉米芯酸解液为丁醇

[目的]探究用于丙酮丁醇发酵的玉米芯酸解液的制备方法,寻找培养基组分的较佳组合。[方法]以产物丁醇浓度为指标,比较4种不同玉米芯酸解液制备方法。[结果]稀硫酸处理玉米芯后,用Ca（OH）2调节pH,经XAD-4树脂、活性炭处理,可得到13.71 g/L丁醇;利用薄层层析法分析酸解液中主要还原糖是葡萄糖和木糖,经发酵分析可为Clostridium acetobutylicum ATCC824相同利用;经单因素分析,培养基组分较佳组合为：100%玉米芯水解液中,需加入2 g/L的FeSO4,30 g/L的黄豆饼粉,得到丁醇的最高浓度为19.2 g/L。[结论]玉米芯酸解液可用于丁醇发酵,但需去除有毒物。     

玉米秸秆预处理后的酶水解及丁醇发酵

[目的]寻求玉米秸秆预处理后的最佳酶解工艺条件。[方法]采用碱浸泡法和氨水浸泡法对玉米秸秆进行预处理,考察预处理方法以及温度、酶用量、pH值、底物浓度等因素对玉米秸秆酶水解的影响,得出最佳酶解条件,并利用最佳条件下的水解液进行丁醇发酵。[结果]碱法预处理玉米秸秆能有效地提高酶的水解效率。玉米秸秆经过预处理后的最佳酶水解工艺条件为：pH值4．5～5．0,温度50℃,底物浓度3．33％,酶用量950U／g秸秆。利用秸秆水解液进行丁醇发酵后,溶剂（丁醇、丙酮、乙醇）的产率比值为10．O：1．5：1．0,与传统发酵（6：3：1）相比,提高了丁醇所占的比值。[结论]该研究为以木质纤维素为原料进行新能源的开发和利用验提供试验依据。     

玉米秸秆酸水解制糖新工艺

[目的]开发新的玉米秸秆酸解糖化工艺,以解决生物质制乙醇技术中酸解糖化法收率低等问题。[方法]采用单因素及正交试验,考察了带压两段酸水解浓酸段和稀酸段的水解糖化规律和工艺条件。通过两段法浓酸预处理与稀酸水解相结合,对玉米秸秆进行水解,并对水解条件进行了优化。[结果]初步确定常压两段酸水解较优的水解工艺条件为:一段浓酸预处理中,酸浓度60%,酸固比12∶1,水解时间30min,温度45℃;二段稀酸水解中,水固比220∶1,水解时间120min,水解温度100℃。经两段水解后,总糖收率显著增加,达93.81%。[结论]首次提出常压两段酸水解工艺,该工艺条件温和、流程简单、成本低廉、总糖收率高、应用前景广阔。