商品肉鹅新城疫母源抗体的消长规律及其最佳首免日龄

[目的]探讨商品肉鹅新城疫母源抗体消长规律及最佳首免日龄。[方法]通过血凝(HA)试验和血凝抑制(HI)试验,对商品肉雏鹅在不同时间首次接种鹅源新城疫油乳剂灭活疫苗后的免疫效果进行监测,以确定最佳首免日龄,并对ND母源抗体进行动态分析。[结果]霍尔多巴吉肉鹅的母源抗体由1日龄的10 log2下降到25日龄的0.6 log2。母源抗体水平4 log2作为免疫接种的临界点。7日龄免疫组HI抗体水平20日龄后一直维持在临界点以下,不能达到疫苗保护水平;11日龄免疫组HI抗体水平在免疫后16 d达到临界点,到出栏前仍维持较高水平;14日龄免疫组HI抗体水平在免疫后约22 d达到临界点。[结论]霍尔多巴吉肉鹅母源抗体半衰期约为2.7d,11日龄为霍尔多巴吉商品肉鹅新城疫的最佳首免日龄。     

青脚麻鸡新城疫和禽流感母源抗体的衰减规律研究

[目的]为青脚麻鸡的新城疫(ND)和禽流感(AI)预防提供依据。[方法]采用血凝抑制(HI)试验测定了3个鸡场青脚麻鸡在1～30日龄的AI H5、AI H9和ND母源抗体水平,并计算相应母源抗体的半衰期。[结果]3个鸡场的AI H5母源抗体水平均较低,1日龄母源抗体HI效价分别是5.8log2、7.2log2和6.0log2,AI H9和ND的母源抗体水平相对较高。青脚麻雏鸡的AI H5、AI H9和ND母源抗体平均半衰期分别为2.49、2.87和2.22 d。[结论]青脚麻雏鸡的AI H5首免日龄推荐为3～6日龄,AI H9和ND首免日龄推荐为7～12日龄。     

猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及疫苗免疫的干扰作用

[目的]制定科学合理的免疫程序,从根本上控制仔猪O型口蹄疫的发生。[方法]采用ELISA抗体检测试剂盒对涪陵某规模化养殖场母猪和仔猪进行了母源抗体和免疫抗体检测。[结果]仔猪在10日龄左右抗体效价最高,平均效价为2.62。随着日龄的增长,仔猪母源抗体水平迅速下降至不完全保护水平。不同日龄首免仔猪口蹄疫疫苗免疫抗体检测结果表明母源抗体效价对试验猪的免疫应答有较大的影响。[结论]30～45日龄是仔猪接种FMD疫苗的最佳时间,这与母源抗体的消长规律相一致。     

AA鸡禽流感母源抗体和免疫抗体消长变化的研究

[目的]为AA鸡的禽流感预防提供依据。[方法]用不同剂量的2种禽流感疫苗免疫8日龄AA鸡,通过血凝抑制(HI)试验研究AA鸡禽流感母源抗体和免疫抗体的消长变化。[结果]AA鸡禽流感母源抗体在1~7日龄时缓慢下降,之后迅速下降,表明其半衰期约为2 d。2种禽流感疫苗均可用于AA鸡的预防接种,免疫后15 d,免疫抗体HI效价达到保护临界值,20 d时达到峰值,然后缓慢下降,43日龄时仍在临界值以上。2种不同剂量的禽流感灭活油乳剂疫苗接种后所产生的HI抗体效价的峰值差异极显著。[结论]选用禽流感灭活油乳剂疫苗,免疫剂量为0.5 ml/只,免疫时间为8日龄,整个饲养期免疫1次,即可预防商品代AA鸡禽流感。     

农凤鸡新城疫与禽流感母源抗体的衰减规律研究

[目的]研究农凤鸡新城疫和禽流感母源抗体的衰减规律,为农凤鸡新城疫(ND)和禽流感(AI)的预防提供依据。[方法]通过血凝抑制(HI)试验对1~37日龄的农凤鸡进行新城疫和禽流感(H5和H9)母源抗体水平的检测,研究农凤雏鸡ND和AI母源抗体的衰减规律。[结果]AI H5母源抗体水平较低,AI H9和ND的母源抗体水平相对较高,但都在3~5日龄出现高峰,此后随着日龄的增长,抗体水平逐渐下降。[结论]农凤鸡AI H5的首免日龄推荐为5~8日龄,AI H9和ND的首免日龄推荐为7~12日龄。     

超免仔猪猪瘟抗体的消长规律研究

[目的]探索猪瘟疫苗首次和二次免疫的最佳时间。[方法]通过猪瘟正向间接血凝试验,对绿兴种猪场5头母猪及其哺乳的25头仔猪的猪瘟抗体水平进行检测。[结果]试验母猪和仔猪的猪瘟抗体水平均较高。当母猪的母源抗体进行1∶64稀释和凝集价为++++时,可不进行超免,首次免疫在产后30 d左右最佳。这说明该猪场制定的猪瘟免疫程序比较合理,能够发挥较好的保护作用。[结论]该研究可为猪场免疫程序的制订提供参考。     

鸡新城疫病毒F基因部分片段克隆表达及其抗体制备

[目的]为进一步研究新城疫病毒的分子结构和基因疫苗奠定基础。[方法]用自行设计的l对引物,通过RT-PCR从接毒的SPF鸡胚的尿囊液中克隆了新城疫病毒F基因部分片段,将该基因片段插入含谷胱甘肽(GST)基因的质粒pGEX-4T-1,构建了重组质粒,对提取的融合蛋白进行亲和层析纯化和琼扩、ELISA及W estern-blot检测。[结果]通过克隆和PCR扩增获得新城疫病毒F基因的部分片段,大小为509 bp;对构建的重组质粒pGEX-4T-1-F509经诱导表达,获得分子大小约为44 000 bp的融合蛋白,其中F基因的部分片段大小约18 000 bp;经亲和层析,获得纯化GST-F509融合蛋白,进一步用该蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗鸡新城疫病毒F蛋白抗体。[结论]琼脂扩散试验、ELISA及W estern-blot检测表明,该融合蛋白中的F片段具有良好的抗原性。     

新城疫病毒单克隆抗体的制备及鉴定

以纯化的新城疫病毒ND35免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合.经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒株反应,而不与禽流感病毒AIV(H5亚型)、产蛋下降综合症病毒(EDS-76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、马立克氏病毒(MDV)、禽肺病毒(APV)反应.通过Western-blot对7G5单克隆抗体进行鉴定,发现其在相对分子质量47 500～62 0130之间出现条带,表明其与NDV抗原有特异性结合.这5株单克隆抗体属于IgGl、IgG2b亚类,κ轻链.     

肉鸡非典型新城疫的发生与防治

目前,肉鸡生产在广大农村快速发展,业已形成以农户养殖为主体的小群体大规模的生产格局,但疾病的发生仍然是限制其健康发展的重要因素,特别是近年来鸡新城疫发生与流行出现新的特点,典型新城疫发病越来越少,而非典型新城疫发病却出现上升趋势。充分认识非典型新城疫的发病特点,了解把握其发生原因,寻求积极的防治对策和解决办法,是促进肉鸡生产稳步发展的关键所在。     

肉鸽新城疫的诊治报告

新城疫病毒(Newcastle disease virus)属于副粘病毒科副粘病毒属禽副粘病毒I型(A/PMV-1)。新城疫(ND)是一种高度接触性传染病,鸡、火鸡、鸽以及野禽均易患。1926年Kraneveld氏首先发现于印度尼西亚的巴塔维亚,同年doyle氏发现于英国的新城而故名,新城疫(ND)1迄今仍在世界广泛流行。邯郸县某肉鸽养殖场暴发一种以神经症状为主,腹泻,死亡率极高的传染病。经病原分离与鉴定,确诊为鸽新城疫,经鸡高免卵黄抗体治疗收到了良好效果。     

母源抗体对禽网状内皮增生病病毒感染诱发生长迟缓和免疫抑制的预防作用

【目的】确定经禽网状内皮增生病病毒（REV）细胞适应毒免疫的种鸡提供的母源抗体在雏鸡抗REV感染中的保护性免疫作用。【方法】分别对有母源抗体和无母源抗体的雏鸡人工感染REV野毒，比较它们的生长速度和对新城疫病毒（NDV）和禽流感病毒(AIV)灭活苗免疫后的抗体反应。【结果】在没有REV母源抗体的商品代肉鸡，1日龄感染REV不仅造成生长迟缓，还会显著抑制对NDV和AIV (H5和H9）疫苗的免疫反应。由致弱的REV疫苗免疫的父母代种鸡提供的母源抗体，不仅可预防REV野毒感染引起的生长迟缓，也可预防REV引起的对NDV和AIV灭活疫苗免疫反应的抑制作用。在1日龄攻毒REV后，有REV母源抗体组对所有三种灭活疫苗免疫后的抗体水平都显著高于无母源抗体组。免疫后4周，有母源抗体组和无母源抗体组对NDV、AIV-H9和AIV-H5的血凝抑制（HI）抗体滴度分别是3.36±2.04 vs 1.58±1.69(P＜0.01)，6.27±3.87 vs 0.71±1.60(P＜0.01)和6.72±3.92 vs 0.54±1.44(P＜0.01)。【结论】来自免疫种鸡的REV母源抗体不仅有效地预防雏鸡感染REV，而且有效地预防或减弱REV感染造成的生长迟缓及其对NDV和AIV灭活疫苗免疫后抗体反应的抑制作用。     

不同抗体水平的种蛋生产鸡新城疫灭活疫苗的初步探讨

选择3种不同母源抗体水平的种蛋生产鸡新城疫灭活疫苗,发现母源抗体为1～3 log2的种蛋孵化接毒后死胚率平均值为7.49%,血凝价为1:1 024,EID50/(0.1mL)为108.97,其效果明显优于母源抗体较高组.     

日粮铜水平对育成蛋鸡生长性能和新城疫抗体效价的影响

通过探讨有机铜对育成蛋鸡免疫功能和生产性能的影响,为蛋白质螯合铜在生产中的应用提供理论依据。试验选用9周龄的海兰褐蛋鸡216只,随机分为6组,每组3个重复,每个重复12只鸡,11周龄时开始进入正式试验。分别饲喂添加蛋白质螯合铜(以铜量计)0mg/kg(Ⅰ组)、6.5mg/kg(Ⅱ组,对照组)、15mg/kg(Ⅲ组)、30mg/kg(Ⅳ组)、60mg/kg(Ⅴ组)、125mg/kg(Ⅵ组)相同的基础日粮,试验期为6周,测定鸡的平均日增重、平均日采食量和新城疫抗体效价。结果表明:与对照组相比,Ⅲ组和Ⅳ组显著提高育成蛋鸡平均日增重、平均日采食量和新城疫抗体效价。添加15mg/kg和30mg/kg铜(以蛋白质螯合铜的形式)可显著提高育成蛋鸡的生产性能和免疫功能,15～30mg/kg铜(以蛋白质螯合铜的形式)为育成蛋鸡最适宜的添加范围。     

仔猪猪瘟母源抗体消长规律的研究

试验采用ELISA抗体检测法,对仔猪猪瘟母源抗体进行检测,研究其消长规律,并用准确的试验数据来确定仔猪的首免日龄,使仔猪能在最佳时期进行免疫。试验结论表明,仔猪出生后的3～10d内猪瘟母源抗体维持在较高水平,保护值是OD450nm值0.93;第20d时的抗体水平比第10d明显降低;到第25d时,抗体水平下降到更低,保护值降到OD450nm值0.41。此保护值常常是最低保护的临界值,鉴于该猪场仔猪猪瘟母源抗体的消长情况来看,在不进行超前免疫时,20～25日龄是较佳的首免日期。     

5-羟色胺对鸡新城疫疫苗抗体效价的影响

研究了5-羟色胺(5-HT)对鸡新城疫疫苗抗体效价的影响,结果表明:5-HT受体激动剂中剂量组的抗体效价明显高于对照组,且呈现一直上升的趋势;5-HT受体拮抗剂中剂量组的抗体效价明显低于对照组,且呈现一直下降的趋势;这表明5-HT对新城疫疫苗的抗体效价有明显的调节作用。     

2株不同来源的新城疫病毒的F基因克隆和序列分析

以1株从发病鸽中分离到的新城疫病毒(PNDV／99株)和1株从发病鹅中分离到的新城疫病毒(GNDV／00株)为研究对象，用反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)对它们的F基因进行分段扩增、定向克隆到pUCll9质粒载体，然后测定它们的核苷酸序列，并推导出相应的氨基到序列。PNDV／99株和GNDV／00株的F基因全长1662bp，编码553个氨基酸，它们的裂解位点的氨基酸序列为112G-R-Q-G-R-L117，是NDV弱毒株特有的序列结构。序列分析结果表明，它们2株之间的核苷酸同源率高达99．28％，氨基酸同源率则为100％；它们与国内标准毒株F48E9的核苷酸同源率只有87．48％和87．36％，氨基酸的同源率都为91．68％；而它们与弱毒株La Sota的核苷酸同源率别为98．50％和98．74％，氨基酸同源率都为98．73％。     

不同新城疫疫苗和免疫途径对鸡新城疫HI抗体的影响

不同新城疫疫苗和免疫途径对鸡新城疫HI抗体的影响试验结果表明,30d内接种进口疫苗组和国产疫苗组HI抗体效价无明显差别,60d后接种进口疫苗组较接种国产疫苗组HI抗体效价高2～3个滴度。在接种途径上,无论进口组和国产组,早期滴鼻点眼途径免疫产生抗体效果相对较好,平均较其他组高0．5～20个滴度;肌注组在早期抗体滴度不及点眼组,但在稳定性上要比其他组强,抗体维持时间较长。     

复合RT-PCR快速鉴别鹅副粘病毒与鸡新城疫病毒

对新近分离的鹅副粘病毒SF02株通过自行设计的3条引物建立了复合RT-PCR方法。该方法对鹅源副粘病毒SF02株和GPV2株均可检测到215bp和401bp2条带，对12株(其中7株参考株，5株野毒)鸡源新城疫、2株鸽源新城疫、1株鸭源新城疫病毒的检测只出现1条401bp带，与预期的大小一致，对H5、H9亚型禽流感病毒、鸭病毒性肝炎病毒、传染性支气管炎病毒、SPF鸡胚尿囊液均未检测到特异性条带。     

免疫程序对肉鸡新城疫·禽流感(H5亚型)HI抗体消长规律的影响

[目的]为制定商品肉鸡新城疫(ND)、禽流感(AI)的免疫程序提供理论依据。[方法]在调查不同规模化养殖场免疫程序的基础上,制定商品肉鸡的免疫程序,分析不同免疫程序下ND和AI(H5亚型)HI抗体消长规律。[结果]1~7日龄商品肉鸡ND和AI的母源抗体均维持在免疫保护临界值之上。用ND疫苗免疫后,鸡群抗体水平不断下降,各免疫组均在24日龄最低。使用ND活疫苗和灭活苗的免疫组中ND抗体滴度比其他免疫组高。非免疫组AI(H5亚型)抗体滴度均随日龄的增加而逐渐下降,而免疫组24日龄后缓慢上升,38日龄达到免疫保护临界值。[结论]禽流感(H5亚型)灭活苗对商品肉鸡的免疫效果较差,应从免疫佐剂、抗原浓缩等方面进行新型商品肉鸡禽流感疫苗研究。     

仔猪O型口蹄疫母源抗体消长试验

[目的]为制定科学合理的仔猪口蹄疫免疫程序提供依据。[方法]以规模化养猪场和散养户中经猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫后母猪所生产的仔猪为研究对象,利用液相阻断ELISA诊断试剂盒对仔猪母源抗体消长情况进行检测。[结果]仔猪通过母乳获得被动保护,在21日龄母源抗体达到高峰,规模化猪场和散养户母猪的平均效价分别达1∶142和1∶89。规模化猪场场仔猪21~30日龄保护率在80%以上,45日龄下降到65%,60日龄时基本无保护;而农户仔猪21日龄保护率为60%左右,30日龄仅为40%左右。农户饲养母猪免疫抗体水平远低于规模化猪场。[结论]对规模化猪场的仔猪进行口蹄疫疫苗的最佳首免时间为45~50日龄,而对散养户仔猪的最佳首免时间应为30日龄左右。