SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳4种染色方法的比较研究

[目的]比较SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中蛋白质的染色方法,建立美洲大蠊抗肿瘤活性部位SDS-PAGE后更为合适的染色方法。[方法]以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,采用考马斯亮蓝染色法、氯化钾染色法、钙染色法和银染色法进行比较,在此基础上,将样品美洲大蠊抗肿瘤活性部位进行SDS-PAGE电泳和染色。[结果]结果表明银染法能够准确、快速、简便的对美洲大蠊抗肿瘤活性部位的SDS-PAGE进行染色。[结论]为美洲大蠊药用价值的研究奠定了基础。     

美洲大蠊黄酮提取工艺条件研究

[目的]研究美洲大蠊黄酮类化合物的提取方法,确定美洲大蠊黄酮的最佳提取条件。[方法]采用单因素试验确定黄酮提取条件,通过分析不同提取温度、提取时间和料液比等条件对美洲大蠊黄酮提取率的影响,确定最佳的提取条件与方法。[结果]通过试验分析得出美洲大蠊黄酮的最佳提取条件:提取温度25℃,提取时间12 h,料液比为1∶8(g/m L)。美洲大蠊黄酮含量与提取温度、提取时间、料液比呈相关性。[结论]该研究对美洲大蠊黄酮类化合物的开发与利用具有较高的科学意义。     

美洲大蠊中小分子肽的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分离探索

[目的]探讨适合美洲大蠊中小分子多肽分离、纯化的Tricine-SDS-PAGE方法。[方法]通过比较Tricine-SDS-PAGE中,不同比例3种胶对小分子肽的分离效果,建立更适合小分子肽分离的方法。[结果]聚丙烯酰胺凝胶电泳在一定程度上使标准Marker得到了初步分离,样品混合液均在分离胶、夹层胶和浓缩胶中有着不同程度的聚集,未能起到分离的作用。[结论]对于小分子多肽的混合样品,有待于进一步摸索更合适的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离方法或是其他更好的分离方法。     

木瓜蛋白酶提取蜚蠊多糖最佳工艺研究

[目的]优化木瓜蛋白酶提取美洲大蠊多糖的工艺参数。[方法]利用不同梯度木瓜蛋白酶对美洲大蠊进行蜚蠊多糖提取试验,采用单因素和正交试验的方法,考察最佳酶用量、提取时间、温度等相关参数对提取液中多糖的含量的影响,确定蜚蠊多糖提取的工艺。[结果]试验表明,蜚蠊多糖提取的最佳条件为:酶用量为300μg/g,提取温度60℃,提取时间1.0 h。[结论]研究可为建立高效、实用的蜚蠊多糖提取途径提供技术参考,同时也为美洲大蠊的保健药品及功能性食品开发提供可靠的科学依据。     

超滤膜分离牡蛎多糖工艺研究

[目的]获得制备牡蛎多糖的最佳分离工艺。[方法]利用超滤膜对牡蛎多糖进行分离,采用单因素及正交试验考察牡蛎多糖通过不同截留分子量超滤膜的分子量分布并优化超滤膜分离工艺。[结果]试验表明,选择截留分子量10 kD的超滤膜分离牡蛎多糖,膜通量较好,截留液中牡蛎多糖的分子量为1.2×10~3kD,透过液中的分子量为4.4 kD。正交试验表明,影响膜通量的主要因素是料液温度,其次是膜分离操作压力,pH影响较弱。综合考虑生产成本及膜的使用寿命等多方因素,超滤膜分离最佳工艺为料液温度30℃、压力0.04 MPa、pH 7.0。[结论]研究可为工业化生产牡蛎多糖提供参考依据。     

稀碱法提取美洲大蠊多糖工艺条件的研究

[目的]确定美洲大蠊多糖提取的稀碱液浓度、提取时间及提取温度等参数。[方法]采用梯度浓度稀碱液及不同条件进行美洲大蠊多糖的提取试验,以稀碱液浓度、提取温度及提取时间作为单因素因子,并进行了正交试验;采用苯酚-硫酸分光法测定试验样品中的多糖含量,将葡萄糖作为标准品进行对照,比较不同提取条件所得到多糖的含量。[结果]各因素对美洲大蠊多糖提取含量的影响主次顺序为稀碱液浓度、提取时间、提取温度,美洲大蠊多糖的最优提取条件为稀碱液浓度0.02 mol/L、提取温度70℃、提取时间1.5 h。[结论]该研究为进一步开发具有功能活性昆虫食品及药物奠定了理论和试验基础。     

美洲大蠊蛋白质的提取工艺优化及其对伤口愈合的影响

[目的]优化美洲大蠊蛋白质的提取方法,并研究美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合的影响。[方法]采用碱提法、盐提法和酶提法对美洲大蠊蛋白质进行分离和提取,测定不同方法提取美洲大蠊蛋白质的含量,优化美洲大蠊蛋白质的提取工艺;并用提取的美洲大蠊蛋白质进行小鼠伤口愈合试验,研究美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合的影响。[结果]在碱浓度为1.5%、提取温度为80℃、提取时间为1.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高;在盐浓度为1.0%、提取温度为40℃、提取时间为2.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高;在酶占样本比为0.6%、酶解温度为45℃、酶解时间为2.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高。小鼠伤口愈合试验表明,美洲大蠊提取的蛋白质可以促进伤口愈合,且愈合时间比正常情况下缩短近一半。[结论]碱液浓度、盐浓度和酶浓度对美洲大蠊蛋白质提取的影响最大。3种方法提取美洲大蠊蛋白质的效果从大到小依次为酶提法、碱提法、盐提法,即美洲大蠊蛋白质提取的最优方法为胰蛋白酶提取法。美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合有促进作用。     

木瓜蛋白酶水解林蛙皮制备活性肽的工艺研究

[目的]以林蛙皮为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备活性肽。[方法]选取固液比、酶用量、pH、水解时间和水解温度为影响因素,以活性肽的水解度为考察指标,通过单因素试验和正交试验优选木瓜蛋白酶酶解林蛙皮制备活性肽的最佳工艺条件。[结果]最优工艺条件为固液比1∶4,酶用量14 000 U/g,pH 7.0,水解温度55℃,水解时间4 h。[结论]该研究为林蛙资源的综合利用提供了新的途径。     

盐提法提取美洲大蠊多糖工艺优化的研究

目的:通过盐提法对美洲大蠊多糖进行提取试验,为进一步开发昆虫药物奠定理论和实验基础。方法:采取盐提法对美洲大蠊多糖进行提取试验,采用单因素试验和正交试验进行工艺优化,用苯酚-硫酸分光法测定多糖含量。结果:实验因素对美洲大蠊多糖含量影响:盐浓度对美洲大蠊多糖影响最大,提取温度对多糖提取影响最小。确定最佳提取工艺为盐浓度为0.05mol/L,提取温度60℃,提取时间2h。结论:影响水溶性多糖提取条件为盐浓度、浸提温度、浸提时间等因素。盐提法提取时间越长,其细胞破碎越完全,多糖含量增高。     

响应面法优化青蛤降血压肽酶解制备工艺

[目的]采用响应面法优化青蛤降血压肽的酶解制备工艺。[方法]以青蛤肉为原料,木瓜蛋白酶为酶种,血管紧张素转换酶抑制率为指标,在单因素试验的基础上,选择pH、酶解时间和料液比为影响因素,进行3因素3水平的Box-Behnken试验设计,采用响应面法分析3个因素对青蛤降血压肽制备工艺的影响。[结果]木瓜蛋白酶酶解制备青蛤降血压肽的最佳工艺条件为pH 5.8、酶解时间8.4 h、料液比1∶3.1,该条件下酶解产物对血管紧张素转换酶抑制率达93.58%。[结论]该研究为青蛤的高值化利用和降血压肽的制备提供了新思路。     

超滤法分离枸杞多糖的工艺研究

[目的]探讨利用微滤和超滤膜技术分离加工枸杞多糖的最佳工艺条件。[方法]用2540型模设备采取微滤和超滤相结合的试验方法对枸杞多糖浸提液进行分离纯化,结合多糖定量检测结果评价操作压力、操作温度、料液浓度、操作时间等相关因子的膜分离工艺影响因素。[结果]超滤处理的最佳工艺条件为：操作压力0.65 MPa,操作温度45℃,原料液中多糖浓度为0.72 g/L。微滤处理的最佳工艺条件为：操作压力在0.20～0.22 MPa之间,操作温度50℃。[结论]与传统的真空浓缩法相比,膜分离法制备枸杞多糖时能够提高多糖产品的纯度,降低能耗,适合工业化生产。     

海水养殖甲壳类动物幼体益生菌N6发酵条件的优化研究

[目的]优化海水养殖甲壳类动物幼体益生菌A.isolate N6的发酵条件。[方法]通过单因子和多因子正交试验,对菌株N6的培养基成分及发酵条件进行了优化。[结果]最佳发酵条件为：葡萄糖6.0 g/L,硫酸铵6.0 g/L,酵母膏1.5 g/L,NaCl 1.0 g/L,初始pH7.2,摇床转速180 r/min,接种量3%,温度26℃,培养周期24 h,得到的活菌数达到2.34×1011 cfu/ml,比优化前提高了129%。[结论]为该益生菌制剂的研制及推广应用奠定了基础。     

豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究

[目的]探索从豆粕中提取大豆异黄酮的工艺条件。[方法]在单因素试验的基础上,采用L9（34）正交试验优化豆粕中异黄酮的提取工艺。[结果]豆粕异黄酮最佳提取工艺条件为：用体积分数为70%的乙醇水溶液,以20∶1（V/W,ml∶g）的液料比提取2 h,提取温度为75℃。[结论]优化的豆粕异黄酮提取工艺简便、合理,为异黄酮的分离纯化及生理活性的开发研究奠定了基础。     

东北榆叶梅果仁蛋白质的提取工艺研究

[目的]研究榆叶梅果仁蛋白质的提取条件,分析果仁总蛋白的组成成分。[方法]以东北榆叶梅果仁为原料,通过单因素试验方法研究料液比、pΗ、提取温度、提取时间对果仁蛋白提取率的影响,并应用正交试验法对最佳提取工艺条件进行了研究。利用薄膜电泳法,对果仁蛋白进行电泳分离。[结果]榆叶梅果仁蛋白质的最佳提取工艺条件为:料液比1∶45 g/ml,pΗ8.5,温度50℃,提取时间75min。电泳分离结果表明,榆叶梅果仁蛋白由清蛋白和球蛋白组成。[结论]榆叶梅果仁利用价值高,有开发利用前景。     

1株巨大芽孢杆菌BM05发酵条件的优化

[目的]优化巨大芽孢杆菌BM05的发酵条件,提高其发酵活菌数。[方法]通过单因素试验筛选最佳碳、氮源,通过正交试验筛选最佳C/N比,并研究p H、发酵温度、接种量和转速对发酵的影响。[结果]碳源选用玉米淀粉和葡萄糖,氮源选择牛肉粉,初始p H 7.0,发酵温度35℃,接种量为4%,转速220 r/min为最佳发酵条件。通过发酵条件优化,发酵菌数达4.73×109cfu/m L,比原始配方提高了1.56倍。[结论]优化后的发酵条件大大提高了巨大芽孢杆菌BM05的发酵活菌数。     

无机超滤膜预处理垃圾填埋场渗滤液的过程参数分析

[目的]对无机超滤膜的液体渗透性进行评价。[方法]采用无机超滤膜对垃圾填埋场渗滤液进行预处理,重点探讨pH值、浓缩倍数、操作压差、膜面流速等过程参数对预处理效果和膜通量的影响。[结果]较优的运行参数为:pH值宜处于中性偏酸的范围,6.5~7.0效果较佳;操作压差不宜超过0.4 MPa,一般选择为0.34 MPa,膜面流速为3.5~4.0 m/s。在该条件下,对COD、TOC、氨氮、TDS、FDS和浊度的去除率分别达到40.6%、51.2%、6.0%、19.3%、19.9%和70%。[结论]渗滤液pH值的改变直接影响无机超滤膜表面的电性,从而与无机离子和腐殖酸共同作用,引起膜通量和去除率的变化。无机超滤膜通量随操作压差和膜面流速的增加而增大,但由于浓差极化和凝胶层的影响,存在临界压差和流速。