PCV2和PCV3双重纳米PCR方法的建立及初步应用

本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）和猪圆环病毒3型（PCV3）的双重纳米PCR（nano-dPCR）方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化;同时考察所建立的nano-dPCR检测方法的特异性和敏感性。结果显示,所建方法的特异性和敏感性良好,对PCV2和PCV3两种病毒的最低核酸检测量分别为93.2和91.6拷贝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。应用该方法对送检的265份临床样本进行检测,结果显示,PCV2和PCV3在猪群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的阳性率分别为16.6%和14.7%,混合感染阳性率为6.8%。临床样品的检测结果表明,本试验建立的nano-dPCR方法为PCV2和PCV3早期感染进行快速、敏感鉴别诊断提供了新方法。     

猪圆环病毒（PCV2）综述之一—由来与相关猪病

猪断奶后衰竭综合征(PMWS)的主要病原体,已被世界各国学者确认为圆环病毒(PCV2)。本病最早发现于加拿大(1991),1996年暴发该病,同时此病很快在美国、西班牙、英国、丹麦、德国、荷兰、比利时、立陶宛、奥地利和意大利发生。除上述国家外,近年来,日本、韩国、泰国、捷克、墨西哥、匈牙利、中国以及台湾地区均有此病发生和流行,另外PCV2与许多猪相关疾病的发生有关。除PMWS之外,PDNS(猪皮炎与肾炎综合征)、PNP(增生性坏死性肺炎)、PRDC(猪呼吸道综合征)、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦与PCV2感染有重要关联。     

“猪Ⅱ型圆环病毒”专栏二：由猪圆环病毒引起的病毒血症对生产性能的影响

自1998年病毒血症与猪圆环病,现在也称作由PCV2引起的系统疾病（Systemic Disease due toPCV2,PCV2-SD）与联系起来后,与PCV2有关的病理学及其造成的养猪生产损失已成为研究的目标。自那时起,     

母猪接种PCV-2灭活疫苗可降低所产仔猪的PCV-2感染率和病毒血症发病率

本文旨在进一步探讨猪圆环病毒2型(PorcineCircovirustype2,PCV-2)的垂直传播以及母猪接种PCV-2灭活疫苗对新生仔猪抵抗PCV-2感染的作用。试验以从两家猪场中随机选择的繁殖母猪及其所产仔猪为研究对象,将所选母猪随机分入未接种疫苗的对照组和接种疫苗的试验组。母猪断奶后接种商用PCV-2灭活疫苗,18d后对两家猪场各一半的试验母猪接种疫苗。母猪分娩时,研究人员从两家猪场分别采集70头母猪的初乳,并在哺乳前(猪场1)或哺乳后(猪场2)从每窝中随机选择5头仔猪采集血液样本。检测发现98.5%的初乳样本含PCV-2抗体(135/137),且PCV-2抗体在免疫母猪的初乳中的分布率显著更广(P=0.0039)。在仔猪中,43.9%的仔猪血清(301/685)呈PCV-2阳性,11.7%(80/686)呈PCV-2 DNA阳性。对所有PCV-2 DNA阳性样本进一步分析后发现,28份样本中的PCV-2为PCV-2a型,28份样本中的为PCV-2b型,5份样本中的PCV-2既有PCV-2a型又有PCV-2b型。PCV-2DNA在仔猪群的流行性(0.7%～22.8%)低于早先...     

陕西7个地区猪2型圆环病毒(PCV2)感染的血清学调查

为明确陕西省PCV 2感染的发生情况,以便控制PMW S的流行,本试验用间接EL ISA方法对陕西省7个不同地区多个猪场不同日龄的猪群进行了PCV 2感染的血清学调查。报告如下。1材料与方法1.1材料被检血清样品共476份,采自陕西省榆林、宝鸡、西安、渭南、汉中、商洛、安康等7个不同地区     

猪圆环病毒（PCV2）综述之二—发病机制与防制对策

现有研究证明PCV2与相关疾病的发生机制与免疫系统的损害有关;而对此猪病的防制对策又是综合性的。现将有关情况综述如下:     

PCV2疫苗对仔猪体重和死亡率的影响

许多养猪生产者发现,在开始对仔猪接种猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗后,猪场生产效益要好于PCV2感染之前。这是怎么回事呢?     

“猪Ⅱ型圆环病毒”专栏五：种猪群感染PCV2的常见问题

猪圆环病毒Ⅱ型（Porcine Circovirus type 2,PCV2）与养猪生产各阶段的多种疾病的临床表现有关,这些疾病通常被称为猪圆环病毒相关疾病（PCV-Associated Disease,PCVAD）。     

规模化猪场猪圆环病毒2型感染的血清学调查

用ELISA方法对甘肃省酒泉、张掖、武威、兰州、临夏、白银、定西7市(州)及青海省大同地区的12个规模养猪场或个体养殖户送检的219份猪血清进行了猪圆环病毒2型(PCV2)抗体检测。结果，抗体阳性血清128份，其中母猪血清75份，仔猪血清53份；总抗体阳性率为58．45％，母猪抗体阳性率为63．25％，仔猪抗体阳性率为52．94％；同时对张掖市及大同地区的猪场进行了跟踪调查，张掖市2、3、4和6月份的阳性率依次为12．50％、42．11％、75．00％和97．42％，青海大同地区4月份和8月份的阳性率依次为12．50％和85．71％。表明两地的PCV2感染率随气候变暖而呈明显上升的趋势。     

嵌合型猪圆环病毒（PCV1—2）及PCV2 ORF2真核表达质粒对商品猪的免疫保护

应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒（PCV1—2）及真核表达质粒pcDNA3．1／V5-His-ORF2作为免疫原免疫母源抗体ELISA效价在0．07～0．60不等的商品猪,9头猪随机分为4组,1组（3头）肌肉注射免疫10^3.5 TCID50的PCV1-2／头,2组（2头）肌肉注射真核表达质粒200μg／头,3组（2头）肌肉注射空载体（pcDNA3．1）200μg／头,4组（2头）不免疫作为攻毒对照组。于免疫后42d,PCV1—2组及真核表达质粒组产生了PCV2抗体。免疫后42d所有组攻毒PCV2和PRRSV,剂量分别为2×10^4.5 TCID50／头和10^6 TCID50／头。攻毒后21d,攻毒对照组猪淋巴结比免疫组显著肿大,免疫组猪血清、淋巴结中PCV2病毒栽量低于对照组,攻毒对照组猪淋巴结中PCV2抗原含量高于免疫组。这些结果表明,嵌合型PCV1-2及真核表达质粒肌肉注射免疫商品猪后,对PCV2感染能产生保护性免疫应答,有可能成为候选疫苗。     

Effect of porcine circovirus type 2 (PCV2) vaccination on PCV2-viremic piglets after experimental PCV2 challenge

The objective of this study was to evaluate the effect of porcine circovirus type 2 (PCV2) vaccines on PCV2-viremic and -seropositive piglets born from naturally PCV2-infected sows against postnatal PCV2 challenge. The experimental design was aimed at mimicking commercial swine rearing conditions to evaluate the response of the PCV2 vaccine on PCV2-viremic and -seropositive piglets after experimental PCV2 challenge. PCV2a (or 2b)-viremic piglets received a PCV2 vaccine at 21 days of age followed by a PCV2b (or 2a) challenge at 49 days of age (28 days post vaccination). The PCV2 vaccines elicited a high level of humoral (as measured by immunoperoxidase monolayer assay and neutralizing antibody titers) and cellular (as measured by the frequency of PCV2-specific interferon-γ-secreting cells) immune response in the PCV2-viremic piglets after vaccination even in the presence of maternally derived antibodies (MDA). The initial infection of PCV2 in the pigs was not affected by PCV2 vaccination, however the challenging PCV2 was reduced by PCV2 vaccination on PCV2-viremic pigs. The results from this study demonstrate that the PCV2 vaccine used in this study is effective at reducing PCV2 viremia and lymphoid PCV2 DNA, even for PCV2-viremic pigs with passively acquired MDA at the time of vaccination.     

PCV2疫苗:有效性和临床应用

断奶后多系统衰竭综合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrone,PMWS)是一种主要由PCV2引起的疾病,被认为是全球主要的猪病之一.从传统上看,它的控制建立在消灭引起与这一病理学状态相关的致病风险,如改善管理、控制协同感染、改变公猪的遗传背景.然而,最近开发的PCV2疫苗已证实在实验和自然条件下能够极为有效地控制PMWS和PCV2的感染.因此,已证实给经产母猪和小母猪接种疫苗可提高血清中的抗体滴度,减少病毒血症的发生和病毒排放(通过母猪和初乳),改善生产性能(即降低死亡率和增加其后代的平均日增重).现在,国际市场上已有很多商用PCV2疫苗;所有的疫苗都是利用PCV2a基因型毒株制成的.所有疫苗都获得了许可,可应用于生长期猪,只有一种疫苗有望用于经产母猪和仔猪.     

Detection of porcine Circovirus type 2 (PCV2) variants PCV2-1 and PCV2-2 in Brazilian pig population

In the present study whole genome of six Brazilian isolates of PCV2 were sequenced, analyzed and compared with 35 other sequences (24 from other countries and 17 from Brazil). The phylogenetic analysis showed that mostly Brazilian variants of PCV2 were grouped as PCV2-1. Two isolates among the six analyzed here could not be grouped with any other PCV2-2 analyzed in this study. One of these isolates was from an aborted fetus with myocarditis and the other from a PMWS affected pig. The results pointed here showed that both groups of PCV2 are present in Brazilian pig population without any clear geographical correlation.     

猪圆环病毒2型复制及其影响因素

猪圆环病毒2型（PCV2）DNA的复制是滚环复制,Rep和Rep′蛋白是PCV复制所必需的蛋白质,核心元件A*TA*TAC为必需的结合位点。复制的影响因素包括病毒内部因素如病毒基因内的CpG寡核苷酸和干扰素反应元件、病毒黏附受体(硫酸乙酰肝素和硫酸软骨素B乙糖胺)和病毒内吞作用（小GTP酶和肌动蛋白）;外部因素如DL-硒蛋氨酸和刀豆素A。抑制PCV2复制的措施有猪营养的全面,干扰RNA技术,疫苗的使用等。     

猪圆环病毒Ⅱ型新疫苗可预防猪圆环病毒Ⅱ型相关疾病

美国堪萨斯州州立大学科学家完成了一项研究,结果表明新研制的猪圆环病毒Ⅱ型疫苗能有效预防猪圆环病毒Ⅱ型。病毒学家、诊断医学和病理学