中华蜜蜂csd多态性分析

 【目的】分析不同地理群体中华蜜蜂（Apis cerana cerana）csd的多态性。【方法】以吉林长白山、海南海口、广西南宁、湖北神农架和江西靖安5个省市的中蜂工蜂为试验材料,提取每个工蜂样品的基因组DNA,对csd 3区进行PCR扩增、克隆和测序,分析csd的多态性。【结果】对中国5个省市的中蜂csd 3区基因组序列进行了克隆测序,获得32条csd基因单倍型,其中吉林长白山和江西靖安群体csd的多态性显著高于其它群体,而吉林长白山群体和江西靖安群体之间,广西南宁群体、海南海口群体和湖北神农架群体之间csd的多态性没有显著差异。利用csd进行群体分析表明江西靖安中蜂与吉林长白山中蜂的核苷酸分歧度和遗传距离均最大,湖北神农架中蜂与广西南宁中蜂之间核苷酸分歧度和遗传距离最小。系统进化树表明来自5个地理群体的单倍型在进化树上混杂在一起,并没有按照地理来源分为5支。【结论】中华蜜蜂csd在各个地理群体中均具有很高的多态性,并且多态性水平在群体间有差异。     

长白山中华蜜蜂（Apis cerana cerana）遗传多样性分析

长白山中华蜜蜂是我国东北地区的重要蜜蜂资源,具有独特的分布区域、生物学特性和形态特性.本研究通过A107、AP043、AP085、AP313、AT101等5对微卫星引物与mtDNA tRNAku-COII 357 bp片段,对110只长白山中华蜜蜂进行遗传多样性研究.长白山中华蜜蜂在5个微卫星位点的平均期望杂合度、平均观察杂合度、平均香农指数分别为0.2110±0.2333、0.0645±0.0718、0.4031±0.4202,PIC值除A107为0.5541外,其它4个位点分别在0-0.1644之间;mtDNA标记检测到的单倍型多样度为0.249±0.054,核苷酸多样度为0.00074±0.00017,平均核苷酸差异为0.263,表现出很低的遗传多样性.长白山中华蜜蜂的遗传结构较为单一,5个微卫星位点的遗传结构均以一种等位基因为主,线粒体单倍型H1（Japan1）占83.64％,且在长白山中华蜜蜂研究中首次发现H3（登录号：KF673779）、H5（登录号：KF673782）、H7（登录号：KF673780）、H8（登录号：KF673781）等4种单倍型.长白山中华蜜蜂种群数量少,遗传多样性低,遗传结构单一,面临着灭绝的风险.长白山中华蜜蜂的资源保护刻不容缓,需要尽快建立保护区.     

武夷山自然保护区中华蜜蜂微卫星DNA遗传分析

采用5个微卫星DNA分子标记,测定武夷山自然保护区6个样点的中华蜜蜂的遗传多样性及遗传分化.结果共检测到23个等位基因,平均多态信息含量(PIC)在0.402 9～0.497 8,处于中等多态水平;平均杂合度(He)在0.452 5～0.561 3,处于中等水平.经Fisher精确检验,武夷山自然保护区6个样点,5个微...     

家蚕RAPD的多态性与稳定性分析

从家蚕品种大造和C108及其F1,F2的后部丝腺提取的基因组DNA通过的RAPD扩增,在477个随机引物中,85.9%的引物在家蚕基因组有稳定的扩增产物,总扩增片段5155条,每个引物扩增片段1-23条,平均为12.6条,多态性片段数共1496条,占两品种中总片段数的29.0%,经多次重复及反复验证发现,只要严格控制扩增反应条件及保证基因组DNA和试剂等不污染,则能检测到稳定的DNA多态性片段,从而保证其稳定性与重复性。     

绿僵菌不同菌株DNA多态性的RAPD分析

采用RAPD－PCR技术分析了4个绿僵菌株的DNA遗传多态性。从160条引物中筛选出27条引物，对各菌株进行PCR扩增，结果4个绿僵菌菌株共扩增出334个位点，其中多态性位点299个，占89．5％，表明各菌株间具有较丰富的遗传多态性。菌株DNA多态性与原寄主和孢子形态表现出明显的相关性，但与对松墨天牛幼虫的毒力间未表现出相关性。图2表4参7     

运用RAPD技术检测中华蜜蜂蜂群中亚家庭数量

以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)为实验材料,运用随机扩增多态DNA (RAPD)技术和NTSYS聚类软件分析蜂群亲缘关系指数和亚家庭数组成.结果表明:RAPD技术是检测中华蜜蜂亚家庭数量的一种有效方法.     

DNA分子标记在蜜蜂遗传学研究上的应用

遗传变异是生物的重要特征之一,它决定着生物的存在和发展,因而成为人类极力要揭开其奥秘并进行能动性改造的方面之一.科学技术的进步赋予人类越来越多的能动性,在蜜蜂遗传研究上也是如此.遗传学家和养蜂学家不仅揭开了蜜蜂遗传变异之迷,而且通过遗传育种改良了它们的遗传特性,培育出许多新的优良蜂种而造福于人类.随着分子生物学理论和技术的发展以及与养蜂学的相互渗透,这种能动性手段增加了,进程也越来越快.     

海南中华蜜蜂线粒体DNA的遗传多样性

采用线粒体DNA tRNAleu-COII片段的序列分析方法,对海南16个样点的715群中华蜜蜂(Apis cerana cerana)进行遗传多样性研究,明确了海南中华蜜蜂线粒体DNA tRNAleu-COII片段序列的遗传多样性及单倍型的分布特点.结果共发现48种单倍型,其中新发现43种单倍型.共检测到38个变异位点,包括12个单一多态位点、23个简约信息位点、1个插入位点和3个缺失位点.海南中华蜜蜂单倍型多样度为0.742±0.017,平均核苷酸差异数为1.248,核苷酸多样度为0.00354±0.00013,这表明海南中华蜜蜂线粒体DNA tRNAleu-COII片段具有丰富遗传多样性.海南中华蜜蜂普遍在117位点发生G→A的转换,发生比例为74.27%.     

内蒙古地区8种主要蝗虫基因组DNA多态性的RAPD标记研究

[目的]从分子水平上研究内蒙古草原主要蝗虫种类的遗传进化与系统发育关系。[方法]采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对蝗总科4科6属8种蝗虫的80个个体进行扩增,对基因组DNA进行多态性比较。[结果]7条引物共扩增出64条特异性片断,分子量大小为300～2000bp。8种蝗虫间遗传距离在0.2282～0.5896。带型显示,科内属间及属内种间多态性普遍存在。根据Neis遗传距离对结果进行UPGMA法聚类分析,结果表明,属内的种各自先聚为一类,其次是科内的种聚为一类。[结论]该研究可为内蒙古草原主要蝗虫的系统发育及演化研究提供分子生物学依据。     

太湖地区与皖南地区中华蜜蜂微卫星DNA遗传多样性分析

利用筛选后的12对荧光标记微卫星引物,研究太湖地区与皖南山区中华蜜蜂(以下简称中蜂)间的遗传多样性并分析其遗传分化。研究检测判定了60个中蜂个体的基因型,计算2个群体的优势等位基因频率(Pi)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)、群体内近交系数(Fis),并分析中蜂群体内与群体间的遗传变异,采取配对试验均数差异t检验比较太湖中蜂与皖南中蜂群体的遗传差异。结果表明,太湖地区与皖南山区2个中蜂群体间的Pi、He、PIC、Fis差异均不显著(Pi=0.3560.05,PHe=0.3910.05,PPIC=0.2600.05,PFis=0.4280.05)。可见,太湖地区与皖南地区两地中蜂群体存在一定的遗传多样性,但遗传分化程度不大。本研究结果对江苏与安徽两地中华蜜蜂品种的选育和保护也具有一定的指导意义。     

应用微卫星DNA技术研究中华蜜蜂群内工蜂监督效果

【目的】研究不同中华蜜蜂（Apis cerana cerana）群内的工蜂繁殖现象,探讨蜂群的工蜂监督效果。【方法】以中华蜜蜂为试验材料,对处女蜂王分别进行单雄和双雄人工授精,并以蜂王自然交尾的蜂群作为对照。蜂王成功繁殖后7周,利用蜜蜂微卫星DNA技术检测蜂群内的雄蜂是由蜂王产的未受精卵发育而成,还是由工蜂产的未受精卵发育而成。【结果】所有蜂群中的雄蜂都是由蜂王产的未受精卵发育而成。【结论】在人工授精和自然交尾蜂群中都明显存在工蜂监督行为。     

小麦不同部位DNA提取的比较研究

[目的]探讨小麦不同取材部位对DNA提取质量和产率的影响。[方法]分别以小麦的种子、根尖和幼嫩叶片为材料,采用改良CTAB法分别提取小麦3个部位的基因组DNA,用0．8％的琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量,用紫外分光光度计分别测定3个部位的DNA在A260和A280下的吸光值,根据A260/A280的值检测DNA的浓度和纯度,并以3个部位提取的DNA为模版进行RAPD扩增。[结果]采用小麦叶片提取DNA的产率最高,种子次之,根尖最低。3个部位提取的DNA纯度均相近,提取叶片获得的DNA浓度最大,为756μg/ml;其次是种子,为233μg/ml;根尖获得的DNA浓度最低,为90μg/ml。小麦不同部位提取的DNA模板对RAPD扩增没有明显影响,DNA浓度都能达到扩增的要求。[结论]小麦3个部位提取的DNA质量均较好,可以进行后续的酶切和PCR扩增等实验。     

3个不同鸭种基因组DNA多态性的RAPD分析

RAPD（random amplified polymorphic DNA）即随机扩增多态性DNA技术是由Williamsc和Welsh发展起来的一项研究遗传物质本身的分子生物学技术,克服了从表型、染色体和蛋白质水平研究物种遗传多样性所固有的缺点,并具有相对简便、易操作、省时省力、无需设计引物和产物遗传多样性丰富等优点,已被广泛地应用于生物研究中。笔选取了3个鸭种,用RAPD技术研究其基因组DNA的多态性,目的在于深入了解其种质、亲缘关系及遗传多样性,为保护鸭种质资源和分析鸭配套品系的遗传多样性提供分子生物学方面的证据。     

中蜂与意蜂营养杂交对工蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ的影响

本研究以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)为实验材料,进行中华蜜蜂与意大利蜜蜂营养杂交,然后应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF-PAGE)技术检测亲本和营养杂交后代的工蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ的基因型、基因型频率、等位基因频率、杂合度和纯合度,结果表明:经过营养杂交后,杂交后代工蜂的苹果酸脱氢酶基因型发生了变化,并且苹果酸脱氢酶条带位置朝着对方蜂种偏移。     

向日葵核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的种内多态性RAPD分析

利用RAPD技术对向日葵核盘菌12个菌株进行了基因组DNA多态性分析.通过聚类分析发现在类间距15以下12个菌株可以分为5群,来自长春、内蒙、云南和来自吉林的5号菌株类间距离较小,其亲缘关系较近;而另一个来自吉林的4号菌株与来自黑龙江的2号菌株属第二类群;来自新疆的12号、来自陕西的7号菌株表现出与其它菌株较远的遗传背景.     

黄刺玫基因组DNA提取方法的研究

以黄刺玫的嫩叶为材料，比较了改良SDS法、CTAB法和陈大明法等3种方法对其基因组DNA的提取效果。结果表明：采用裂解前加入不含SDS的缓冲液，提取过程中用4％β-巯基乙醇的改良SDS法，可有效地控制材料的褐变及DNA污染。提取的DNA纯度和产率均较高，可完全满足RAPD扩增的需要。     

中蜂与意蜂营养杂交后代随机扩增多态DNA研究

以中华蜜蜂(Apis cerdna cerana Fabricius)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica Spinola)为实验材料,进行中华蜜蜂与意大利蜜蜂营养杂交,然后运用随机扩增多态DNA(RAPD)技术检测亲本和营养杂交后代的DNA多态性.结果表明:经过营养杂交,亲本蜜蜂与营养杂交子代的遗传相似系数变小,中华蜜蜂和意大利蜜蜂的特有DNA条带发生了转移.说明通过营养杂交,基因可能发生了转移.     

甘蓝Ogura胞质雄性不育基因的RAPD标记

以甘蓝Oguar胞质雄性不育系CMS451及其保持系为材料,优化甘蓝RAPD体系,并用RAPD标记分析了Oguar胞质不育基因。结果表明,适合甘蓝RAPD体系为,25μL中含有2.0 mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,0.56μmol/L pri mer,0.5 UTaqDNA聚合酶,20 ng DNA,2.5μL 10×buffer(剩余的用ddH2O补充);发现S20-495为不育基因的特异条带,在NCBI上比对此特异条带序列发现它与芜菁自交不亲和系SRK-46、SP11-46和SLG-46的基因全序列同源性达78%。     

中蜂与意蜂王浆中DNA的RAPD分析

以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)王浆为材料,用改进的苯酚-氯仿法提取蜂王浆中的DNA,利用35个随机引物对提取出来的DNA进行RAPD扩增,结果表明:有6个随机引物能扩增出谱带,其中1个引物对所有王浆DNA样品的扩增结果完全相同,5个引物出现多态性。共检测到32条扩增谱带,其中24条为多态带。