天牛干标本DNA的提取及RAPD-PCR扩增反应

对标本馆保存多年的天牛标本进行基因组DNA的提取,并成功用于PAPD-PCR的扩增.结果显示基因组DNA的提取与标本的保存时间无直接的联系,而与标本保存的质量关系密切.用同一引物扩增,不同种天牛的扩增片段呈现多态性.     

豆象干标本基因组DNA提取方法的改进

[目的]筛选豆象干标本基因组DNA的有效提取方法。[方法]以口岸截获时间不等的豆象干标本为材料,在传统方法上加以改进,对从干标本中提取豆象基因组DNA的方法进行了研究。将其所提取的基因组DNA的纯度和浓度与CTAB法和SDS法进行了比较,并对DNA进行了完整性及PCR验证。[结果]与CTAB法和SDS法相比,豆象干标本提取方法提取的DNA OD260/OD280值均在1.7~1.9,且浓度合适。DNA完整性及PCR验证结果表明,豆象干标本提取方法比较适合后续PCR试验的开展。[结论]豆象干标本提取方法适合该研究中豆象干标本基因组DNA的提取,可推广到检验检疫工作中截获豆象的检疫鉴定中,以缩短检验检疫工作周期,提高检验检疫工作准确性。     

天牛基因组DNA的提取方法

通过试验探索出3种可以快速、简便地从天牛干标本、液浸标本和新鲜标本中提取DNA模板的方法。对所获得的基因组扩增分析表明,经过PCR之后的DNA能呈现明显的多态性,同种天牛用同一引物扩增幼虫和成虫所获得的结果相同,可以认为,RAPD技术可以应用于天牛成虫干标本及幼虫浸渍标本的鉴定及系统发育研究中,也证明了这3种方法用于提取不同保存时间、不同种天牛基因组的DNA是切实可行的。     

5种方法对蝴蝶干标本DNA的提取效果研究

[目的]研究蝴蝶干标本DNA的提取方法。[方法]采用5种不同的方法（SDS法、SDS-巯基乙醇-酚法、CTAB法、饱和NaCl法、SDS-巯基乙醇-氯仿法）对蝴蝶干标本DNA进行提取。[结果]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取,并且能成功地应用于蝴蝶线粒体基因COI、CytB和核基因EF-1α的PCR扩增。[结论]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法可以用于研究蝴蝶干标本DNA的抽提,为蝴蝶的分子系统进化研究奠定了基础。     

蜡梅花瓣基因组DNA提取及RAPD-PCR反应体系优化

以蜡梅花瓣为试材,用改良CTAB法提取基因组DNA,并设置不同浓度梯度对每个PCR反应因子进行相应试验,结果表明,改良CTAB法提取蜡梅花瓣基因组纯度高、质量好。并采用正交试验设计的方法,对蜡梅RAPD-PCR条件进行了优化,结果表明,最佳的蜡梅RAPD-PCR反应体系(20μL)为:1×buffer,1.0 U TaqDNA聚合酶,2.0 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTPs,0.5μmol/L引物和模板DNA 30～40 ng;适宜的扩增条件为:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,38℃退火30 s,72℃延伸90 s,38个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。     

5种方法对蝴蝶干标本DNA的提取效果研究(英文)

[目的]研究蝴蝶干标本DNA的提取方法。[方法]采用5种不同的方法(SDS法、SDS-巯基乙醇-酚法、CTAB法、饱和NaCl法、SDS-巯基乙醇-氯仿法)对蝴蝶干标本DNA进行提取。[结果]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取,并且能成功地应用于蝴蝶线粒体COI、EF-1α和CytB基因的PCR扩增。[结论]SDS-巯基乙醇-酚法、饱和NaCl法和SDS-巯基乙醇-氯仿法可以用于研究蝴蝶干标本DNA的抽提,为蝴蝶的分子系统进化研究奠定了基础。     

向日葵总DNA不同提取方法比较及在RAPD中的应用研究

比较了CTAB法和SDS法从油用向日葵的真叶和种子中提取DNA的提取过程、时间、DNA质量及在RAPD-PCR中应用的效果，结果表明：不同方法及材料中均能获得质量较好的DNA，而且在RAPD-PCR中均获得了较好的扩增结果。但利用SDS法从种子中提取DNA简捷、快速，且不受取材的限制，可满足RAPD技术处理大量样品的要求，具有较大的优势。     

天牛基因组DNA提取方法和标本保存方式的比较研究

[目的]为天牛的分子系统学研究奠定基础。[方法]采用不同提取方法(饱和NaCl法、CTAB法、SDS-蛋白酶K消化法)从不同保存条件下天牛标本中提取基因组DNA,进行RAPD扩增,比较不同保存条件和不同DNA提取方法对DNA提取质量的影响,探索天牛标本的最佳保存方式和最佳DNA提取方法。[结果]不同方法提取的DNA质量有明显差异。CTAB法和SDS-蛋白酶K消化法提取的DNA质量较好,条带清晰完整,无降解和RNA污染。但饱和NaCl法的提取效果较差。天牛标本的最佳保存条件为在-80℃条件下无水乙醇浸泡。CTAB法提取的天牛基因组DNA能扩增出稳定清晰的多态性片段。[结论]CTAB法提取的天牛DNA质量最好,可直接用于PCR扩增。     

茄子基因组DNA提取及RAPD-PCR体系的优化

在CTAB基础上,系统地比较了提取缓冲液主要成分浓度的变化对提取茄子基因组DNA的质量及得率的影响,并以SDS法为对照,提出了一种适用于茄子基因组DNA的提取方法。进一步利用梯度PCR比较了BAPD-PCR反应体系中几个重要成分的浓度对PCR产物的影响,优化茄子BAPD-PCR反应体系,建立了茄子基因组适用的简单、稳定和重复性较好的BAPD-PCR方案。     

亚洲百合DNA的提取及RAPD-PCR反应体系的优化

为了促进亚洲百合分子水平的研究,以亚洲百合幼嫩叶片为材料,采用改良CTAB法提取亚洲百合基因组DNA,得到的DNA质量较高,适合于RAPD-PCR分析。通过单因素优化得到在25μl反应体系中,亚洲百合RAPD分析的最佳反应体系:160μmol/LdNTPs,0.3μmol/L随机引物,TaqDNA聚合酶1.5U,Mg2 浓度2.0mmol/L。     

桃树不同材料DNA提取的探讨

利用改良CTAB法,以桃树的冬芽、半木质化韧皮部、老枝韧皮部、嫩叶和成熟叶片为材料提取总DNA。结果表明:5种不同的材料都能提取出DNA,但纯度和产量不同,除成熟叶片和老枝韧皮部外,其他材料的A260/A280值都在1.8以上,DNA的产量在60~160μg/g之间。清晰明亮的PCR产物电泳结果也表明所提取的DNA完全满足ISSR分析的要求。     

快速提取烟草DNA的方法

利用快速、简易,适于烟草的ＤＮＡ提取方法。可以获得较纯净、高产率、大分子量的ＤＮＡ,以满足植物分子育种的要求。     

针茅属植物基因组DNA提取方法的研究

植物体内所含的蛋白质，酚类，单宁，色素及多糖等物质影响Tag酶的聚合效率。是使PCR扩增反应失败的主要因素。本研究以针茅属植物为材料，对CTAB法，SDS法，简易提取法和高盐沉淀法提取的针茅DNA进行了比较研究。结果表明：CTAB法适合于针茅属植物基因组DNA的提取，采用这种方法提取的DNA能很好的用于PCR扩增。     

蒌蒿DNA提取、RAPD优化及引物筛选初报

为了能从分子水平探讨蒌蒿资源的遗传多样性、蒿属的系统分类和种质资源的鉴定,在此,报道采用小量法(SDS法)和大量法(CTAB法)提取蒌蒿DNA,建立优化的RAPD-PCR体系,并进行引物初步筛选。结果显示,两种抽提方法都可有效抽提出高质量的DNA,大量法得率要明显高于小量法,但小量法抽提的DNA也足够RAPD-PCR反应几十至上百次,不同的实验室可根据实验的需要进行选择。对两种方法抽提的DNA,都进行PCR扩增体系梯度摸索,最优的RAPD-PCR反应条件为:25μl反应体系中,含DNA模板约20ng,10×TaqDNA聚合酶缓冲液2.5μl,2μldNTPs(2.5mM),Mg2 2μl(25mM),TaqDNA聚合酶0.15μl(5U/μl),引物0.5μl(25μM),其余以双蒸水补充。在剔除了重复性差,条带模糊和单态的引物后,有九个引物表现稳定,扩增出来的条带清晰、多态性高。     

云杉小黑天牛有效积温和发生期测报的研究

为适时防治云杉小黑天牛(Monochamus sutor L.)提供科学依据,在模拟自然条件下,对该虫的卵、蛹的有效积温、发育起点温度,成虫和初孵幼虫的发生期测报进行了研究。云杉小黑天牛蛹的有效积温为114日度,发育起点温度为9.0℃;卵的有效积温为66.9日度,发育起点温度为11.5℃。利用历期法、有效积温法对成虫、初孵幼虫发生期予测,其结果与实际调查基本相等。     

茶树叶片DNA提取、纯化与检测

对茶树叶片ＤＮＡ的提取、纯化与检测的方法进行了研究．对茶树叶片ＤＮＡ在提取过程中含色素太高等技术难题进行了处理，确定了聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）在茶树叶片ＤＮＡ提取中的效用及应用方法，摸索出了一套较好的茶树叶片ＤＮＡ提取流程．     

苹果果实中总黄酮的提取方法优化研究

本文采用正交实验的方法，以苹果果皮总黄酮得率为考察指标，对影响苹果皮总黄酮提取方法的因素进行了探讨，得出了苹果皮总黄酮提取的优化条件，并测定了苹果果皮中总黄酮的含量。结果表明，苹果果皮总黄酮提取的最佳实验条件为：水浴温度为65℃．乙醇浓度为65％，提取时间为2h，围液比为1：20，总黄酮得率为3．66％。     

1种提取产紫杉醇内生真菌高质量核酸的方法

介绍1种从产紫杉醇真菌中快速提取高质量DNA和RNA的方法。该方法由传统CTAB法改进而来,包括抽提液试剂浓度的提高、纯化步骤的改进和离心力的增加等,有效保证了细胞杂质的清除和核酸质量的提高。使用该方法能在24 h内提取高质量的核酸,为进一步开展产紫杉醇真菌的分子生物学研究奠定了基础。     

1种快速提取转基因冰草基因组DNA的方法

本文介绍了1种改良SDS法提取转基因冰草基因组DNA的方法。该方法具有快捷、高效、经济等特点,所提取的DNA纯度符合分子生物学操作要求,可用于转基因冰草植株的PCR检测及Southern检测等。