SRAP和SSR标记构建的甘蓝型油菜品种指纹图谱比较

利用SRAP ( sequence - related amp lified polymorphism)和SSR标记构建了甘蓝型油菜品种指纹图谱,并对 两种标记方法进行了比较。结果表明: (1)每对SRAP引物扩增出20. 36个条带,其中4. 44个是清晰、易于辩认的 多态性带;每对SSR引物扩增出3. 88个条带,均为多态性条带。(2)采用25对SRAP和SSR引物分别构建40个和 75个品种的特异指纹图谱, SRAP指纹中具有特异图谱的比例(82. 5%和50. 7% )高于SSR指纹图谱的结果( 60. 0%和44. 4% ) 。品种数越多具有特异指纹的品种越少。(3)运用引物组合法构建品种指纹图谱,大大地提高了指 纹图谱的特异性。25对SSR引物组合扩增97个多态性谱带,两个不同的品种具有相同谱带的概率只有6. 3108 × 10 - 30。组合指纹图谱比组合数码图谱更直观。与SRAP标记相比, SSR标记以其扩增谱带少、易于识别和统计而 更适合用于引物组合法构建品种指纹图谱。     

花生AFLP指纹图谱

ＡＦＬＰ是一种以ＰＣＲ为基础的ＤＮＡ指纹图谱技术。利用ＡＦＬＰ技术对从国际半干旱所（Ｉ－ＣＲＩＳＡＴ）引进的９份花生抗旱品种绘制指纹图谱,通过引物Ｅ—ＡＣＡ和与之匹配的ＭＣＡＧ和Ｍ—ＣＡＴ,在３００～６０００ｂｐ的范围内共获得１５７７条ＡＦＬＰ扩增产物,每个品种有主带和次带至少７１条之多,其中１０条为多态性的带纹。     

用微卫星DNA标记建立宁2A的指纹图谱

 应用筛选出的4对SSR引物，建立了杂交水稻不育系宁2A 以及宁2B的DNA指纹图谱，结果表明，宁2A/B 特异性的 SSR指纹是引物RM206的谱带1和引物RM224的谱带1。通过与其他广泛应用的杂交水稻亲本材料的遗传关系分析，发现宁2A/B具有籼稻的遗传成分，从而在分子水平上解释了该材料与籼稻亲和性较高的原因。     

21份不同木质素含量的苎麻的RAPD聚类分析

利用RAPD分析构建了苎麻属植物21份木质素含量不同材料的指纹图谱，从150个随机引物筛选出清晰且多态性高的15个引物，共扩增出85条DNA片段，其中特异性带68条，占80％。同时对退火温度进行了优化，反应条件稳定，重复性好。采用UPGMA法对21个品种扩增的谱带进行遗传聚类分析，在D=0．0760处可分为三类8组，可说明供试品种的亲缘关系。     

昆明市售稻米的DNA指纹及其聚类分析

用改良的SDS法提取昆明市主要销售27个稻米样品的总DNA，从70对PCR引物筛选出7对多态性高、带型清晰的引物对稻米样品DNA进行基因型分析，构建了DNA指纹图谱；应用NTSYS软件进行相似性系数计算，利用UPGMA法构建聚类树状图。结果表明，这7个引物得到的DNA指纹图谱基本能将27个供试样本区分开，DNA标记的聚类分析基本能区分出市售稻米的籼粳类型。结果不但可为市售稻米品种真假鉴别、打击冒牌行为提供技术支持，也可为稻米品种的亲缘关系的分析和市售稻米的指纹图谱数据库建立提供参考。     

甘蓝型油菜杂交种亲本指纹图谱分析

用140个随机引物对39份甘蓝型双低油菜杂交种亲本进行RAPD分析，选出40个能产生清晰多态性主带的引物重复扩增，以筛选出的9个引的扩增出重复性好的多态性主带构建39份亲本材料的DNA指纹图谱。结果表明，DNA指纹图谱可将27份亲本材料一一区分，其余12份材料可合并为4组，组内材料均为来源相同的姊妹系。指纹图谱鉴定结果与材料实际来源相吻合。     

利用SSR标记检测棉铃种仁DNA鉴定杂交种纯度

利用棉铃种皮DNA和种仁DNA的差异,通过Simple sequence repeats (SSR)分子鉴定技术在棉花制种后期快速检测制种质量。筛选杂交种亲本间的多态性SSR引物,应用多态性引物鉴定棉铃种仁的指纹图谱,指纹图谱与种皮一致,表明该棉铃为自交铃;种仁图谱为共显性谱带,则该棉铃为杂交铃,计算杂交铃的比例得出杂交种的制种纯度。F₂的图谱分离验证了遗传的分离规律,F₂的个体间具有不同的指纹图谱,育种过程中的杂交后代的分子检测能加速育种进程。     

外源DNA导入大豆其后代的同工酶酶谱分析

采用聚丙稀酰胺凝效电泳的方法，对通过外源ＤＮＡ导入法所获的大豆变异后代，进行过氧化物酶和酯酶的酶谱分析。其结果是酶谱带清晰，变异后代与亲本的谱带有明显差异，并与该材料的表型性状相一致。因此，我们认为可以用同工酶分析法做为鉴定外源ＤＮＡ导入大豆的生化指标之一。     

利用SRAP标记绘制中国芥菜基因源分子指纹图谱

以中国9个省份和地区的86份芥菜种质资源为供试材料,利用SRAP分子标记和DNA指纹图谱分析软件,绘制芥菜遗传资源基因组DNA指纹图谱。从270对SRAP引物中筛选出40对多态性明显、条带清晰的引物组合,对86份供试材料基因组DNA分子进行扩增,共扩增出632条谱带,其中多态性条带427条,多态性比率为67.56%,表明芥菜种质资源遗传多样性较丰富。以供试的86份芥菜种质资源的SRAP扩增条带为基础,建立供试材料扩增条带指纹数据库的Excel文件,然后利用自主开发的DNA指纹图谱软件,构建86份芥菜种质资源的DNA指纹图谱,获得了所有芥菜种质资源的分子"身份证"。结果表明,SRAP分子标记非常适合芥菜DNA指纹图谱的构建。     

指纹图谱在作物品种鉴定中的应用

综述指纹图谱的特点、分类及其在作物品种鉴定中的应用。     

亚麻外源DNA导入后代的过氧化物酶同工酶分析

本文讨论了亚麻过氧化物酶同工酶谱分析的适宜方法，在此基础上对利用花粉管通道技术进行的亚麻外源ＤＮＡ导入后代过氧化物酶同工酶酶谱分析，结果表明：ＤＮＡ导入后代与其受体的酶谱差异明显，主要表现为酶谱带数的不同和谱带染色深浅的差异。由此表明外源ＤＮＡ片段（或基因）已整合到受体基因组中，并得到表达。     

亚麻外源DNA导入后代的过氧化物酶同工酶分析

本文讨论了亚麻过氧化物酶同工酶酶谱分析的适宜方法，在此基础上对利用花粉管通道技术进行的亚麻外源ＤＮＡ导入后代进行了过氧化物酶同工酶酶谱分析。结果表明：ＤＮＡ导入后代与其受体的酶谱差异明显，主要表现为酶谱带数的不同和谱带染色深浅的差异。由此表明外源ＤＮＡ片段（或基因）已整合到受体基因组中，并得到表达。     

利用淀粉凝胶电泳技术鉴定外源DNA导入后代

利用淀粉凝胶电泳技术，对外源ＤＮＡ直接导入栽培大豆的变异后代，进行了磷酸己糖异构化酶（ＧＰＩ）、异柠檬酸脱氢酶（ＩＤＨ）和葡糖磷酸变位酶（ＰＧＭ）的同工酶酶谱分析。实验结果表明：将向日葵的ＤＮＡ导入栽培大豆后，三种酶的谱带清楚，后代与受体及供体间谱带存在差异。有的出现了供体特异带，有的出现了供体和受体所不含有的新型带，有的酶谱带加强或减弱，这说明外源ＤＮＡ已导入到受体基因组中，并在不同程度和不同方式上得到了表达。     

中药指纹图谱的研究意义、发展趋势及可能存在的问题概述

论述中药指纹图谱的研究意义、发展趋势及可能存在问题。阐明中药指纹图谱是中药质量控制和监督的有效方法,并为中药新药研究提供了新的模式,开展中药指纹图谱的研究是最终解决中药质量评价科学性的关键,为中药走向国际市场奠定坚实基础。     

21份不同木质素含量的苎麻的 RAPD聚类分析

利用 RAPD分析构建了苎麻属植物 21份木质素含量不同材料的指纹图谱,从 150个随机引物筛选出清晰且多态性高的 15个引物,共扩增出 85条 DNA片段,其中特异性带 68条,占 80%.同时对退火温度进行了优化,反应条件稳定,重复性好.采用 UPGMA法对 21个品种扩增的谱带进行遗传聚类分析,在 D=0.0760处可分为三类 8组,可说明供试品种的亲缘关系.     

利用淀粉凝胶电泳技术外源DNA导入后代

利用淀粉凝胶电泳技术，对外源ＤＮＡ直接导入栽培大豆的变异后代，进行了磷酸己糖异构化酶、异柠檬酸脱氢酶和葡萄磷酸位酶的同工酶酶谱分析。实验结果表明：将向日葵的ＤＮＡ导入栽培大豆后，三种酶的谱带清楚，后代与受体及供体间谱带存在差异。     

利用SSR技术构建陕西省主要玉米自交系的指纹图谱

采用100对玉米SSR引物分析了陕西省23个主要玉米自交系的遗传多态性,从中筛选出扩增带型清晰、稳定的30对引物作为构建23个玉米自交系指纹图谱的核心引物。每对核心引物可以检测到3～8个数目不等的多态性片段,共153个多态性片段,平均为 5.01个,PIC介于0.524～0.884之间,初步构建了陕西省玉米骨干自交系的指纹图谱。结果表明,利用SSR技术构建玉米自交系指纹图谱是可行的,可利用其进行玉米自交系及杂交种的真实性和纯度鉴定。     

利用RAPD、ISSR分子标记分析野牡丹属亲缘关系

采用ISSR和RAPD分子标记技术对9个种44份野牡丹属种质资源进行了亲缘关系分析。结果表明:11条ISSR引物共扩增出91条谱带,其中多态性条带90条,多态性条带的比率为98.9%;16条RAPD引物共扩增出113条谱带,其中101条多态性条带,多态性比率为89.38%。2种分子标记相比较,ISSR分子标记检测出的多态性比率更高。44份野牡丹属种质明显聚为2组,种质资源遗传相似系数在0.61~0.88,平均相似系数0.75。基于不同引物的条带组合构建了供试的44份野牡丹属种质资源的ISSR和RAPD指纹图谱,采用这2种指纹图谱可对供试的所有野牡丹属种质资源进行鉴定。     

国家冬油菜区试新品种ＳＳＲ指纹图谱构建与遗传关系分析

采用从２００对ＳＳＲ引物筛选中获得的１８对多态性好、带纹清晰的引物,对２００５～２００６年度国家区试 １０２份冬油菜新品种ＰＣＲ扩增,获得８８条谱带,平均每对引物４．９条,多态性比率平均达到８６．３６％,ＰＩＣ平均值为 ０．６４,构建了该年度国家区试１０２份冬油菜新品种ＤＮＡ指纹图谱。聚类分析表明,所有参试品种在相似系数０．７２５ 处被划分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ７个簇。其中Ａ簇包括８１份品种,其他２１份参试品种分布在余下的６簇。聚类分 析表明,Ａ簇内华中农业大学与湖南省品种有相近亲缘关系,聚成一组;而中国农业科学院油料作物所、贵州油料 作物研究所以及陕西地区部分品种相似系数高,聚成另一组,分别拥有３７和４２份材料。聚类分析同时显示,同一 单位的育成品种遗传背景相近。     

大豆外源DNA导入后代的异柠檬酸脱氢酶酶谱分析

采用淀粉凝胶电泳的方法，对利用外源总ＤＮＡ导入栽培大豆的变异后代异柠檬酸脱氢酸（ＩＤＨ）酶谱进行了分析，结果表明：酶谱谱带清晰，呈现Ａ、Ｂ、Ｃ三种类型。后代与受体及供体间谱带存在差异，有些后代的同工酶谱带中含有供体的特异带，说明供体的ＤＡＮ片段已整合到受体基因组中，并得到了表达。