自制苗治疗肉用仔鸡大肠杆菌病疗效观察

北京某鸡场发病的肉用仔鸡，经临床症状、病理变化的观察及实验室诊断，确诊为大肠杆菌病。将从病鸡心血、肝中分离的大肠杆菌，进行增菌、灭活，加入氢氧化铝胶制成铝胶灭活疫苗，给雏鸡1日龄进行一免，每只0．3ml，15日龄进行二免，每只0．5ml。结果表明，疫苗是安全的，保护率可达95％。药敏试验表明所分离菌株对庆大霉素、卡那霉素高度敏感。     

鸭瘟的综合防治

1、西药治疗:(1)高免血清疗法:每病鸭皮下注射高免血清1ml。(2)高免卵黄疗法:给病鸭皮下注射2ml高免卵黄,同时口服高免卵黄2ml。(3)给病鸭同群受威胁鸭子紧急接种1ml鸭瘟疫苗。(4)干扰素治疗:每只病鸭肌注1mg聚肌胞,1次/3日,连用3次。(5)板兰根注射液1～4ml、Vcl～3ml、地塞米松2ml,混合肌注,2次/日,连用3～5天。(6)     

新型鸭肝炎病毒流行病学调查及免疫防治试验

本试验通过鸭胚尿囊腔接种，对我国部分省市采集的死于疑似鸭病毒性肝炎的病鸭肝组织进行病原分离，获得9个病毒分离株。这些分离株对10日龄鸭胚的致死率为100％，人工感染6日龄雏鸭的致死率为0～100％不等。死亡鸭呈角弓反张姿势，剖检可见肝脏肿大，有出血点或出血斑。将9株分离株经鸭胚传至第5代，收集鸭胚尿囊液毒测定这些毒株的ELD50为10^-7.32／0．2ml～10^-3.5／0．2ml不等。用鸡抗1型DHV及新型DHV的血清进行中和试验，结果表明：有7株为新型DHV，有2株为1型DHV。对实验室早期分离的新型鸭肝炎病毒B株经过鸭胚传代致弱后，收集鸭胚尿囊液毒稀释成不同倍数对1日龄雏鸭进行免疫，并于10日龄时用新型鸭肝炎强毒进行攻毒保护试验，结果B20株在20倍稀释时，保护率达100％。采集免疫的雏鸭血清，中和试验测定血清的效价，雏鸭在免疫后可检测到中和抗体，第10天时抗体水平达到高峰，然后呈逐渐下降趋势。结果表明，B株经过鸭胚传代致弱后在毒力下降的同时仍保留一定的免疫原性．可以作为疫苗的候选株。     

鸭病毒性肝炎的防治措施

1 预防措施 （1）加强饲养管理，改善环境，严格执行消毒制度，搞好环境卫生，对控制鸭病毒性肝炎的发生具有重要的意义。 （2）采用康复鸭血清、高免鸭血清及高免卵黄抗体进行免疫接种。免疫接种方法：①有母源抗体的雏鸭，在7～10日龄时肌肉注射鸭病毒性肝炎弱毒疫苗1羽份／只。②无母源抗体的雏鸭，在出壳后1日龄肌肉注射鸭病毒性肝炎弱毒疫苗1羽1形只，或高免鸭血清及高免卵黄抗体0．5毫升／只；10日龄再注射鸭病毒性肝炎弱毒疫苗1羽份／只。     

鸭免疫程序的建议

1雏鸭群免疫（1）雏鸭3日龄左右,应用病毒性肝炎活苗皮下注射免疫。（2）鸭疫里默氏杆菌病灭活苗或鸭疫里默氏杆菌病、大肠杆菌病二联灭活苗免疫：雏鸭7~14日龄时应用单苗或二联苗免疫,每羽皮下注射0.5ml。     

鸭传染性浆膜炎蜂胶疫苗研制

从重庆疫鸭中分离到2株细菌，经细菌形态学、生理生化指标鉴定，证明为鸭疫里氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA)。用改良的血清酵母肉汤进行培菌培养，将2菌株菌液混合（1：1，体积比），经甲醛灭活后加入蜂胶左剂，制成蜂胶灭活疫苗。用其免疫5－7日龄雏鸭，一免后7、10、15d皮下注射RA混合菌液攻毒（0．2mL/只）,平均保护率达66．67％；10d后二免，二免后7、10d攻毒（0．2mL／只）,平均保护率达94．47％。     

鸭疫里默氏杆菌病细胞免疫动态研究

本试验选用1日龄仙湖鸭72只,随机均分为9组,其中1～8组为试验组,第9组为对照组。各试验组按不同的免疫次数、首免龄期、接种剂量,进行鸭疫里默氏杆菌油乳剂灭活疫苗接种,对照组不作接种。各试验组(包括对照组)在免疫前及免疫后每周采血一次,涂片,用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)反应学方法进行染色,用油镜检测计算T、B淋巴细胞百分比值。研究结果表明:无论是2日龄、7日龄或14日龄首免,首次免疫1周后,雏鸭体内都能产生相应的免疫应答,但2日龄免疫应答能力弱,7日龄较强,14日龄最强;两次免疫的细胞免疫效果比一次性免疫效果明显。     

鸭疫里氏杆菌病四价灭活疫苗的研究

在全国流行病学调查的基础上，选择四川等地流行广泛的鸭疫里氏杆菌(RA)1、2、4和5血清型菌株制备铝胶佐剂四价灭活疫苗。对疫苗经无菌检验及安全检验合格后，给3日龄樱桃谷商品鸭每只颈背皮下注射0．5mL，第10、13和16d免疫鸭对同源RA的攻击分别表现出5％--20％、75％--90％和100％免疫保护力，第23—30d免疫保护力开始下降。用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测，表明3日龄樱桃谷鸭首免后第23d抗体达到高峰，至93日龄时仍能检出抗体；10日龄时进行二免后可产生更高的抗体水平，到第65d时仍能保持较高抗体水平。疫苗免疫雏鸭能够显著(P＜0．05)或极显著(P＜0．01)地增强其T细胞的免疫力，时间达2周。经攻毒保护试验、抗体消长规律测定、T细胞免疫水平测定和田间试验，证明研制的鸭疫里氏杆菌病(RAI)四价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性，能有效预防RAI的发生。     

雏鸭禽流感母源抗体消长动态测定

为测定雏鸭禽流感母源抗体消长动态,试验选用绍鸭原种场商品代苗鸭52羽,公母各半,分为2组,分别于1、3、5、7日龄随机扑杀采血0.8ml;10、13、16、19、22、25日龄,每羽颈静脉采血0.5ml。经测定,1日龄雏鸭的母源抗体平均值为7.3log2,3、5、7、10日龄分别为6.6log2、6.6log2、5.4log2、5.1log2,3～5日龄抗体出现平台期,此后呈逐步下降趋势,10日龄时降至接近禽流感抗体保护临界线,至25日龄时母源抗体基本消失。因此,对种鸭免疫抗体较高的鸭群,其后代首免时间以2周龄左右为宜。     

一例鸭曲霉菌病的诊治

我镇肉鸭养殖户王某于2004年4月12日，进雏鸭1500只，饲养8日龄，突然发病，死亡13只。病鸭精神沉郁，呆立昏睡，有轻微的呼吸困难症状，死亡时有“角弓反张”症状，误诊为雏鸭病毒性肝炎，用病毒性肝炎高免血清治疗后死亡185只，第二天前来我中心就诊治疗。     

三种禽流感灭活疫苗对农村散养鸭的免疫效果比较

采用重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗三种疫苗免疫农村散养鸭,结果表明,在一次免疫和加强免疫中,重组禽流感灭活疫苗、禽流感灭活疫苗的抗体效价都分别明显高于H5-H9二价灭活疫苗同期的H5抗体效价,因此对水禽免疫宜使用重组禽流感灭活疫苗或禽流感灭活疫苗;加强免疫明显比一次免疫效果好,应用禽流感灭活苗对散养鸭免疫,必须加强方可达到理想的免疫效果。     

抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体IgY的制备及间接血凝检测方法的建立

本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1：1024,高效价持续5周开始下降,测定提取的IgY浓度为8.258mg/mL,无菌检测及动物安全性实验表明制备的卵黄抗体安全可靠。本研究制备了抗牛多杀性巴氏杆菌卵黄抗体,为防治由荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致的犊牛肺炎提供了新的手段。     

武汉地区鸭疫巴氏杆菌的分离鉴定

２０００年３～５月,对送检于华中农业大学兽医院的病鸭进行病理剖检及细菌分离鉴定,确定送检病例５０％以上由鸭疫巴氏杆菌（ＰＡ）引起,其发病日龄为７～５０日龄。从病鸭的脑脊液、心血、肝等均易分离到ＰＡ。药敏试验显示所有菌株对氯霉素高度敏感。此次试验结果说明,在武汉地区鸭疫巴氏杆菌确已存在,并已成为严重危害当地养鸭业的重要疾病之一。     

Immunization of cattle against Aujeszky's disease with inactivated adjuvant vaccine

The experiments with sheep and young cattle were carried out to test the immunizing efficacy of inactivated adjuvant vaccine against Aujeszky's disease. The vaccine application at doses of 1 ml and 2 ml to lambs at the age of eight to ten months caused the neutralizing antibody production with a significant rise of titres after revaccination. A survival of infection induced with a dose of 10(5.5) TKID50 of virulent virus was recorded in 62.5% of once vaccinated animals and in 87.5% of twice vaccinated animals. When applying different doses of vaccines (from 1 to 10 ml) to young cattle, the antibody reaction level was directly dependent on the inoculum quantity. The double inoculation of animals with vaccines of 2 ml and 5 ml caused the neutralizing antibody production at titres of 1:35, or 1:46. The animals, immunized with the live or inactivated IBR-vaccine possessing high antibody titres against IBR-virus, reacted upon the vaccination with inactivated Aujeszky's vaccine anamnestically, by early production of antibodies in high titres. Metaphylactic vaccination (2 ml of vaccine) of cattle in herds with an acute course days, however earlier during five days from the revaccination when it was carried out in seven days following the first vaccination.     

血清1型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制

为研究血清1型鸭疫里默氏杆菌(R.anatipestifer,RA)的灭活油乳剂疫苗,本研究将10株血清1型RA的临床分离株经腿部肌肉注射7日龄雏鸭进行动物体内复壮,结果表明所有被测菌株均具有较强的毒力,易感雏鸭致死率100％.对其中3株RA分离株CH3、WJ4和YL4的毒力测定结果表明其半数致死量(LD50)分别为2×108 cfu、3.25×108 cfu和2.37×106 cfu.选取5株RA分离株分别制备灭活油乳剂疫苗,分别于5日龄和18日龄对樱桃谷鸭进行两次免疫后,免疫鸭能够产生高水平的RA特异性抗体,对2 LD50 WJ4或CH3攻毒产生很好的保护效果,其中由CH3、CQ3和YXb12制备的灭活油乳剂疫苗对攻毒的保护率高达100％.     

A:L1型鸭源多杀性巴氏杆菌灭活疫苗制备及免疫效力研究

【目的】制备鸭多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,有效控制贵州省鸭多杀性巴氏杆菌发生和流行。【方法】以实验室分离保存的A：L1型多杀性巴氏杆菌地方流行株为菌种,通过涂板法测定该菌株生长曲线,并采用改良寇氏法计算该菌株对鸭的半数致死量（median lethal dose,LD₅₀）,将该菌培养至终浓度为1×10¹⁰ CFU/mL后分别制备白油佐剂灭活疫苗和卡波姆佐剂灭活疫苗,经疫苗质量检验后进行免疫雏鸭试验;通过攻毒保护试验评价比较两种疫苗的保护率,并对攻毒试验鸭肝脏、肺脏、脾脏进行病理组织学观察。【结果】A：L1型多杀性巴氏杆菌疫苗株培养至18 h到达峰值,活菌数可达1.0×10¹⁰ CFU/mL;LD₅₀为5 CFU;制备的两种疫苗安全性良好;攻毒保护试验结果显示,一免后卡波姆佐剂灭活疫苗免疫保护率可达62.5%,高于白油佐剂灭活疫苗（50.0%）及商品灭活疫苗（50.0%）。二免后卡波姆佐剂灭活疫苗优势更为明显,免疫保护率可达87.5%,高于白油佐剂灭活疫苗（75.0%）及商品灭活疫苗（62.5%）。病理组织学结果显示,一免后卡波姆佐剂灭活疫苗能对肺脏提供较好的保护效果,二免后在肝脏、肺脏和脾脏的保护效果上,卡波姆佐剂灭活疫苗组优势明显。【结论】利用贵州地区流行的A：L1型菌株所制备的卡波姆佐剂灭活疫苗免疫效果明显,能对贵州地区多杀性巴氏杆菌病的防控起到重要作用。     

水禽用H5亚型禽流感灭活疫苗对高致病性禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果研究

为评价水禽用禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)对2010年以后分离的高致病性禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将该疫苗免疫3周龄SPF鸭后,21 d采血、分离血清测定HI抗体效价,同时用5株2010年以后分离的高致病性禽流感流行毒进行攻毒保护试验,攻毒后5d采集所有试验鸭喉头和泄殖腔拭子进行病毒分离.结果显示,该疫苗免疫SPF鸭21 d后的HI抗体效价的几何平均滴度达7.4log2,对5株高致病性禽流感病毒的攻击均可产生良好的免疫保护,并有效阻止病毒排泄.该疫苗的推广使用将对我国水禽高致病性禽流感的防控发挥重要作用.     

一种鸡抗猪丁型冠状病毒阳性血清的制备方法

为研究能否用鸡制备出猪丁型冠状病毒(PDCoV)阳性血清。将PDCoV用BEI灭活制备抗原,抗原与矿物油佐剂乳化制备疫苗,疫苗多次免疫SPF鸡,采集血清,检测血清中和效价、将血清用于IFA检测PDCoV。血清中和效价随免疫次数增加逐渐增高,4免后14日的中和效价平均值为1300;中和效价1000左右的血清混合作为阳性血清,1000倍稀释可用于IFA检测PDCoV。实验说明,用鸡制备PDCoV阳性血清的方法成立,制备的阳性血清可用于中和实验、IFA检测PDCoV。     

Antibody response of kori bustards (Ardeotis kori) and houbara bustards (Chlamydotis undulata) to live and inactivated Newcastle disease vaccines.

Adult houbara bustards (Chlamydotis undulata) and juvenile kori bustards (Ardeotis kori) were given four regimens of commercially available inactivated and live poultry paramyxovirus type 1 (PMV-1) vaccines. Immunologic response to vaccination was assessed by hemagglutination inhibition assay of serum. Kori bustards, to which a dose of 0.5 ml of a commercially available inactivated vaccine for poultry had been administered intramuscularly (0.15 ml/kg body weight), failed to develop hemagglutinating antibodies, but antibody titers of low intensity and duration were detected following administration of a second and third subcutaneous dose of 2.0 ml vaccine per bird (0.40-0.45 ml/kg). In subsequent trials, when inactivated vaccine was administered subcutaneously at 1.0 ml/kg body weight following two or four live vaccinations administered by the ocular route, juvenile kori bustards developed higher, more persistent titers of antibodies. Kori bustards given four live vaccinations followed by inactivated vaccine developed higher titers of longer duration compared with kori bustards given two live vaccines followed by inactivated vaccine. Antibody titers of kori bustards given inactivated vaccine were higher and more persistent than the antibody response to live vaccination. Houbara bustards, previously vaccinated with inactivated vaccine, that were given a booster dose of inactivated vaccine maintained high mean antibody titers (> or = log, 5) for 52 wk. The authors recommend that inactivated PMV-1 vaccine should be administered by subcutaneous injection of 1.0 ml/kg vaccine to bustards. Adult bustards, previously vaccinated with inactivated vaccine, should be vaccinated annually with inactivated vaccine. Juvenile bustards should receive a second dose of inactivated vaccine 4-6 mo after the first dose of inactivated vaccine. Even though inactivated PMV-1 vaccines induced hemagglutination inhibition antibodies and produced no adverse reactions, further studies will be required to determine the protective efficacy of the antibody.     

BHV-1 vaccine induces cross-protection against BHV-5 disease in cattle

Protection against BHV-5 disease induced by inactivated BHV-1 or BHV-5 based vaccines was analysed. Two groups of calves were subcutaneously immunized with an inactivated BHV-1 or BHV-5 based vaccine. A third group was not vaccinated and used as control. In the post-vaccination period, we studied the humoral and cellular immune response resulting similar to both groups. The efficacy of the vaccines was tested after intranasal challenge of the calves with a virulent Argentinean BHV-5 isolate (A-663). All control animals developed neurological signs associated with BHV-5 infection and high levels of virus shedding. Calves immunized with the BHV-1 and BHV-5 inactivated vaccines were protected against BHV-5 disease. Our study provides evidence that strongly support the existence of cross-protection between BHV-1 and BHV-5 in calves. Even though this has already been suggested by previous works, this is the first time an exhaustive study of the immune response is performed and typical clinical BHV-5 meningoencephalitis signs are reproduced in an experimental BHV-5 challenge trial.