企鹅珍珠贝不同组织同工酶表达的差异

采用垂直板聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳对企鹅珍珠贝[Pteria penguin (Roeding)]的消化盲囊、鳃、外套膜、足部肌肉和闭壳肌肌肉5种组织中的过氧化物歧化酶(SOD)、酯酶(ESF)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、乳酸脱氢酶(LDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)同工酶的表达变化进行比较研究。结果表明，企鹅珍珠贝组织内的这6种同工酶存在不同程度的组织特异性，其位点的表达与否和酶活性的强弱方面都表现出明显的组织差异。企鹅珍珠贝的SOD、ESF同工酶在消化盲囊中有较高活性，而MDH、ME在闭壳肌中活性较高。研究中讨论了这些差异与组织生理功能的相关性。     

卵形鲳鲹不同组织同工酶表达的差异

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对卵形鲳鲹（Trachinotusovatus）6组织（肌肉、心脏、肝脏、肾脏、脑、脾脏）的5种同工酶（EST、LDH、MDH、ME和AST）进行了初步研究,并对5种同工酶的同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。结果表明,卵形鲳够的5种同工酶系统具有不同程度的组织特异性。EST由2个基因位点编码,Est-1在这6种组织中都存在,Est-2只存在于肝脏和。肾脏中;LDH由3个基因位点编码,共检测到3条谱带,Ldh-2只存在于肾脏中;MDH由2个基因位点编码,Mdh-1表达为MDH1和MDH22条酶带,Mdh-2表达为MDH31条酶带,在肝脏中的活性最强;ME由1个基因位点编码,只检测到1条酶带,肝脏的含量丰富;AST由2个基因位点编码,只在肝脏和肾脏中检测到,共检测到3条谱带。     

青海湖裸鲤同工酶表达的组织特异性分析

使用水平淀粉凝胶电泳方法,分析了20尾青海湖裸鲤的背部肌肉、肝脏、心脏和肾脏4种不同组织的13种同工酶(LDH,MDH,ME,CAT,IDH,EST,ACP,POD,HK,PGM,GDH,SOD,GPI)差异表达,并对部分同工酶基因位点及表达酶谱表型进行了初步分析,以期为其种质资源保护和开发以及遗传育种等方面的研究提供基础资料.结果显示,13种酶类中12种在4种组织中表现出明显的组织差异性,仅有ME在4种组织间差异性较小.其中HK以及GDH的组织差异性尤为明显,仅在肝脏组织中表达.同时使用了适用于这13种酶类表达的3种缓冲系统(TC8.0、TC7.0、EBT),共检测到26个基因位点.其中,Cat,Pgm,Est-1,Gdh,Hk和s-Mdh等6个基因位点为多态位点.进一步分析了这6种多态位点酶类的亚基类型、多态基因位点以及基因位点命名,并计算了多态位点比例(P0.99)为23.08%.     

银鲳不同组织中4种同工酶的表达差异

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了银鲳(Pampus argenteus)脾脏、肝脏、肌肉、心脏、肾脏等5种组织中酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、乙醇脱氢酶(ADH)等4种同工酶的表达模式,并对各种同工酶的酶谱进行了分析。结果表明:这4种同工酶在银鲳5种组织中的分布均存在一定的组织特异性,其与各组织的生理机能密切相关。银鲳4种同工酶共记录出61条酶带,其中EST被检测出的酶带数量最多也较复杂,ADH同工酶酶带数量最少,只有6条酶带被检测到,LDH和GDH分别检测到16条和9条酶带;组织特异性主要表现在位点表达和酶活性强弱不同这两个方面,GDH1和ADH2只在肝脏中表达。     

中国绿螂组织中同工酶表达的差异

运用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了中国绿螂鳃、足、肝胰腺、外套膜、精巢和卵巢6种组织中ADH、MDH、ME、LDH、α-AMY、G6PD、SOD、SDH、EST和ACP同工酶的分化表达模式。除MDH外,其它同工酶具有明显的组织特异性。6种组织中肝胰腺同工酶系统最完善,具备所检测的10种同工酶,并且酶活性也最强,与其担任的重要生理功能相适应。精巢和卵巢组织中的同工酶表达有较大差异。     

毛蚶组织切片的制作和观察

以毛蚶组织为试验材料,使用苏木精—伊红染色法(HE染色法),对毛蚶组织结构进行固定、切片、染色。将制作的组织切片放在显微镜下,观察其组织结构特点,探讨贝类组织切片制作的各个技术要素。     

波纹唇鱼不同组织5种同工酶表达的差异

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对波纹唇鱼(Cheilinus undulatus)6组织(肌肉、心脏、肝脏、肾脏、脑和脾脏)的5种同工酶[酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]进行了研究,并对其同工酶位点及其酶谱表型进行了分析.结果表明,波纹唇鱼5种同工酶系统具有不同程度的组织特异性.EST检测到2条酶带,由2个基因座位编码.LDH在6种组织中都存在,共检测到9条酶带,由3个基因座位编码,具有多态性现象.MDH在6种组织中均可检测到,可分为线粒体型和上清液型,各由1个基因座位编码,组织差异性不显著.ME检测到2条酶带,肝脏的含量比较丰富,线粒体型和上清液型的区分不明显.AST在6种组织中都没有发现.     

紫贻贝4种同工酶的组织特异性表达研究

采用聚丙烯酰胺垂直电泳法对紫贻贝Mytilu sedulis的鳃、消化腺、外套膜、足、闭壳肌等5种组织的超氧化物歧化酶（SOD）、三磷酸腺苷酶（ATPase）、苹果酸脱氢酶（MDH）、苹果酸酶（ME）进行了检测分析。结果表明,SOD在紫贻贝的5种组织中均有表达,共有4条酶带,但迁移率最大的酶带在足和外套膜中未出现,而在另外3种组织中呈弱表达;ATPase在除消化腺外的组织中都表现为2条带;MDH在5种组织中都表达出1条酶带,其中足和闭壳肌的MDH染色最深;ME存在1～2条酶带,其中迁移率大的条带在5种组织中都有表达,而迁移率小的条带只存在于外套膜、闭壳肌和足中。从检测结果来看,上述4种酶在紫贻贝体内的表达有一定的组织特异性．     

泥鳅不同组织同工酶的特异性表达分析

应用垂直平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了泥鳅成体的心脏、肝胰脏、肾脏、鳃、肌肉5种组织中酯酶、过氧化物酶、过氧化氢酶同工酶的表达情况。试验结果表明,泥鳅3种同工酶在肝胰脏中表达活性较高。酯酶同工酶在5种组织中均大量存在,且条带较多;过氧化物酶在肾脏中表达较强,肌肉中表达最弱;过氧化氢酶在鳃、肌肉组织中表达不强,且条带较少,不利于分析,但其表达差异性明显。     

毛蚶三个地理群体生化遗传特征分析

利用同工酶技术结合聚丙烯酰胺电泳对江苏海州湾、浙江象山港、辽宁辽东湾三个海区毛蚶群体的同工酶遗传多样性进行了研究。在三个群体的9种同工酶中,共检测到了18个基因位点,海州湾、象山港和辽东湾三个群体的多态位点比率(P.95)分别为61.11%、55.56%、64.71%,平均杂合度观测值(Ho)变化范围在0.1689~0.1770间,位点有效等位基因数分别为1.4417、1.3917、1.4219,遗传多样性较丰富。各群体普遍存在着杂合子缺失现象,近交系数(Fis)分别为0.2140、0.1232、0.1797。比较了三个群体间的遗传分化指数(Fst)和群体每代迁移数(Nm),结果表明,海州湾群体和象山港群体间遗传分化较小,Fst=0.0448;而辽东湾群体与其它两个群体间的遗传分化较大,分别为Fst=0.0755,Fst=0.0812。聚类分析结果同样表明,海州湾群体首先与象山港群体相聚,后与辽东湾群体聚类。讨论了毛蚶群体分化机制,近交系数与繁殖生物学的相关性。     

毛蚶幼贝生活习性研究

毛蚶幼贝脱离附着基转入潜居生活主要与水温及个体大小有关。当水温降到19℃时,体长≥4 5mm的幼贝80%开始脱离附着基,转入潜居生活时间是在当年的9月中旬～10月上旬;体长<4 5mm基本不脱离附着基。同种规格的幼贝潜居后比在附着基上生长快36%。幼贝生长最适宜水温是20～26℃,20℃以下生长逐步减慢,到7℃时基本停止生长,停止摄食。     

不同饵料对毛蚶幼体发育的影响

在毛蚶人工育苗过程中,使用球等鞭金藻、角毛藻、小球藻、扁藻4种藻类的不同组合投喂毛蚶幼体。结果表明,饵料种类越多,变态率越高,生长速度越快;球等鞭金藻、角毛藻、小球藻、扁藻搭配(体积比1:1:1:1)变态率为30%,出库需(壳长1 mm)27 d;球等鞭金藻、角毛藻、小球藻搭配(体积比1:1:1)变态率为29%,出库需29 d;球等鞭金藻、小球藻搭配(体积比1:1)变态率为24%,出库需31 d;角毛藻、小球藻搭配(体积比1:1)变态率为19%,出库需33 d;单一投喂小球藻,变态率为3%,出库需44 d。说明不同饵料间的营养可以互补,多种饵料搭配能为幼体发育提供更全面的营养,饵料多样性是影响幼体培养效果的重要因素。     

贝类养殖技术之二:毛蚶人工育苗技术

毛蚶作为我国重要的海产经济贝类,其自然资源在不断下降,而其市场价格和需求量在不断上涨,这就使毛蚶的人工养殖悄然兴起。为了加速毛蚶人工养殖的发展步伐,2003年,我们进行了毛蚶人工育苗试验,取得了一些成果,现将毛蚶人工育苗技术的要点总结如下:一、相关的生物学特性1.繁殖     

辽东湾毛蚶繁殖季节研究

根据1982年、1983年、1984年辽东湾自然海区毛蚶浮游幼虫调查、生殖腺组织切片比较、生殖腺指数测定以及1983年毛蚶室内产卵试验,初步认为:辽东湾毛蚶繁殖季节是7月10日～8月末,水温22～27℃。产卵盛期在7月15～30日,水温24～26℃。不同年份因水温不同产卵期可相差约5d。毛蚶产卵主要集中在两次产卵高峰期内,每个高峰可持续2～3d,两次高峰期间隔15～20d。     

毛蚶壳形态性状对重量性状的影响分析

随机选取毛蚶(Scapharca subcrenata)个体100只,测量其壳长(X1)、壳宽(X2)和壳高(X3)等3个壳形态性状及体重(Y1)和软体重(Y2)等2个重量性状,然后对各性状的描述统计量进行了统计分析。相关分析结果表明,各形态性状与重量性状之间的相关系数均达到极显著水平(P0.01);通过回归分析得出各形态性状对重量性状的多元回归方程如下:Y1=-30.904+0.451 X1+0.713 X2+0.352 X3;Y2=-11.262+0.170 X1+0.208 X2+0.185 X3。壳形态性状对重量性状的通径分析结果显示,壳长、壳宽和壳高对体重的通径系数依次为0.360、0.375和0.249;对软体部重的通径系数依次为0.325、0.262和0.314;壳长、壳宽和壳高对体重的相对决定程度依次为12.9%、14.1%和6.2%;对软体部重的相对决定程度依次为10.6%、6.9%和9.9%;进一步分析显示,壳宽对体重影响的直接效应最大,而壳长对软体重影响的直接效应最大。通过毛蚶壳形态性状对重量性状的影响效果分析,将有利于优化育种方案,提高育种效率。     

渤海南部毛蚶苗种生长季节变化的初步分析

于2008年开展了毛蚶苗种池塘培育技术研究,对其苗种生长的季节变化作了初步分析.结果表明:5月末～8月上旬毛蚶生长较快,尤以6月中旬～7月上旬生长最快;5月底前和8月下旬后生长缓慢;种苗生长的最适水温为20～24℃,海水比重为1.017～1.021.     

温度突变对毛蚶不同组织抗氧化酶活性的影响

为探究温度突变对毛蚶鳃、外套膜和肝胰腺组织中抗氧化酶活性的影响,将毛蚶由11 ℃(对照组)分别转移至14、17、20、23 ℃ 4个温度条件下,在转移后的0、3、6、12、24、48、96 h进行取样,测定毛蚶3种组织中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化情况。试验结果表明,毛蚶鳃、外套膜和肝胰腺中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性在试验期间均呈先升后降的趋势;除20 ℃和14 ℃温度组外套膜和肝胰腺中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,在6 h到达最大值并显著高于对照组( P <0.05)外,其余温度组各组织中3种抗氧化酶活性,均在3 h时达到最大值并显著高于对照组( P <0.05),24 h后各组织抗氧化酶活性均恢复至对照组水平。毛蚶3种组织中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性在不同温度下均以肝胰腺最高,外套膜次之,鳃最低。本研究探索了温度突变对毛蚶的存活及抗氧化酶活性的影响,明确了毛蚶对温度突变的自身调节过程,为毛蚶养殖提供了科学依据。     

贝类养殖技术之六毛蚶人工育苗技术初探

毛蚶(Scapharca subcrenata)为双壳软体动物,俗称麻蛤、毛蛤、瓦垄子、蚶子,在我国沿海均有分布,以我国北方省份最为丰富。近年来,毛蚶市场供不应求,在此情形下唐山市丰南区把发展毛蚶增养殖、加快恢复毛蚶资源工作做为推动全区浅海滩涂贝类增养殖事业的重要举措,为解决毛蚶苗种问题,2003年~2005年我们进行了毛蚶人工育苗和中间暂养等技术方面的研究,现将我们的实验情况报告如下。一、基础设施实验在丰南区渤海水产资源增殖站育苗室进行。沉淀池为1个面积8亩的土池;砂滤池2个,每个砂滤池水体为80m3;使用室内水泥池14个,规格为4m×6m×1.7m,…     

毛蚶不同密度对生长影响的研究

毛蚶Scapharca subcrenata俗名瓦楞子是我国重要的海产经济埋栖型贝类,主要分布于中国、朝鲜和日本沿海。我国以莱州湾和渤海湾分布较为广泛。上世纪70年代中期后,由于环境污染和过度捕捞等因素影响,毛蚶资源日益匮乏,毛蚶资源增殖与修复工作备受关注。