紫外辐射对球孢白僵菌的影响及适宜保护剂的选择

本研究考查了２８０～４００ｎｍ范围的紫外光对球孢白僵菌分生孢子的影响。结果表明,孢子对２８０ｎｍ的紫外光极为敏感,照射６ｈ后,杀伤率达到５５．６０％。在供试的Ｏｘｉ－ｆｅ、Ｗ－ｔｉ和Ｂｌ－ｃ三种紫外保护剂中,以Ｏｘｉ－ｆｅ为最好,２８０ｎｍ下照射５ｈ．孢子的萌发率同未经照射孢子无显著性差异。将Ｏｘｉ－ｆｅ同白僵菌孢子分别以１：１０、２：１０和４：１０的比例混和。２８０ｎｍ下照射５ｈ,各处理间孢子的萌发率无显著性差异,４：１０的比例同未经照射孢子的萌发率没有极显著性差异。     

球孢白僵菌不同菌株血清学的初步研究

应用免疫双扩散和对流免疫电泳的方法对２４株球孢白僵菌的免疫学性质进行了初步研究,结果发现菌株间的交叉反应较普遍,具有明显的抗原类似性。根据免疫测定结果可将供试菌株分为４个血清型,该结果与酯酶同工酶的分型基本一致。     

球孢白僵菌不同菌株生物学特性的研究

在萨氏与虫粉两种增减基以及１％葡萄糖液和２％葡萄糖液和２％虫尸滤液两种营养液中,对４４株球孢白僵菌的菌落形态,菌丝生长、产孢量,孢子萌发情况以及孢子在不同湿度下储存一年的发芽率、抗紫外线能力和生物测定等方面进行了试验。     

蛋白酶高产菌株的紫外诱变选育

［目的］提高地衣芽孢杆菌B7的产蛋白酶能力。［方法］采用福林酚法测定酶活力,通过诱变育种试验和遗传稳定性试验选育出遗传性能稳定的蛋白酶高产菌株。［结果］紫外线照射时间为2 min,菌落的总致死率为62.47%。371株菌株的HC值变化小于5%,53株菌株的HC值正变大于5%,76株菌株的HC值负变大于5%。正变大于10%的12株菌株的HC值是出发菌株的1.18-1.34倍。所有变异株的蛋白酶活力均显著高于出发菌株,其中菌株B720和B749的蛋白酶活力达50 U/ml,比出发菌株提高了40%以上。经过复筛得到菌株B7 49,诱变前后其最高酶活分别为33.97和50.29 U/ml。遗传稳定性试验中菌株B749的蛋白酶活力变化小于10%。［结论］该试验成功选育出的遗传性能稳定的蛋白酶高产菌株B749可用于发酵法制备大豆肽。     

球孢白僵菌制剂载体的筛选

通过将１５种不同的供试载体与球孢白僵菌孢子粉以１;１混合,放置５ｄ后,测定混合物中孢子的萌发率。将种种上载体以５％的比例加徼ＰＤＡ培养基,接种培养７ｄ后,分别测定其产孢量和菌落生长速度,通过系统聚类和方差分析,以孢子粉作对照。筛选出高岭土,、滑石粉、铁红、凹凸棒土和硅藻土５种适宜作为白僵菌制剂的载体。     

灵芝三萜高产菌株原生质体紫外诱变选育

对灵芝（Ganoderma lucidum）HG菌株进行原生质体紫外诱变处理,经过初筛和复筛,获得了生长速度、菌丝干重和三萜含量明显高于出发菌株的9株诱变株;通过10次PDA斜面继代培养、液体培养以及栽培试验筛选,获得了菌丝干重和三萜含量稳定提高的诱变株UV-3,该菌株在栽培袋中的菌丝生长速率及子实体中三萜含量分别比出发菌株高58．6％和29．4％。SRAP-PCR结果表明,诱变株UV-3与出发菌株相比,DNA指纹图谱发生了明显改变。     

球孢白僵菌tps1转基因菌株与初始菌株生物学特性比较

该文对SDAY培养基上培养的球孢白僵菌tps1转基因工程菌株与原始出发菌株各自在菌落形态,菌丝生长速度,产孢量等方面进行了综合评价。结果表明:球孢白僵菌tps1转基因工程菌株与原始出发菌株的菌落形态有一定差异。且球孢白僵菌tps1转基因菌株菌丝生长速度更快,其菌丝生长速度为(3.73±0.05)mm/d而原发菌株菌丝生长速度为(3.45±0.52)mm/d。另外,重组菌株的产孢量(0.92±0.02)×10~8个,明显低于原始出发菌株(1.12±0.17)×10~8个。     

球孢白僵菌GDS菌株对小菜蛾致病力的测定

从自然感病的鳞翅目幼虫体上分离出球孢白僵菌GDS菌株,在室内用108,107,106,105个/m L共4种浓度的孢子液侵染小菜蛾3龄幼虫。结果表明,从高浓度至低浓度,受感染的小菜蛾幼虫累积校正死亡率分别为80.5%,61.0%,26.9%和17.1%。毒力回归方程y=0.631 1x+0.776 9,相关系数为0.986 9,LC50为4.68×106孢子/m L。     

红曲霉紫外诱变选育多糖高产菌株

利用紫外线(波长254 nm)对出发菌株红曲霉AS 3.4701进行诱变处理,经过初步筛选确定最佳诱变时间为2.0 min。再经过复筛获得了1株最佳突变株ZH-100,该突变株经连续3次传代,红曲粗多糖的产量分别是4.26,4.69,4.10 g/L,平均4.35 g/L,证明该菌株具有稳定的遗传性,比出发菌株多糖产量提高286%。     

球孢白僵菌Bb01菌株的生物学特性

[目的]探索高致病白僵菌受自然环境影响条件下的生物学特性.[方法]研究外部环境条件对球孢白僵菌Bb01生长的影响及对青杨脊虎天牛幼虫致病力的影响.[结果]球孢白僵菌Bb01菌株的最适培养基为改良马丁氏培养基,菌落生长和产孢的最优培养温度为26℃,最佳湿度为100％,菌落的生长和孢子产量随着紫外线照射时间的延长而减少;球孢白僵菌Bh01对青杨脊虎天牛成虫的致病力不高,仅为16.67％;26 ～ 28℃条件下对青杨脊虎天牛幼虫的致病力最大,致死中时(LT50)分别为2.23和2.58 d,湿度在100％时致病力最大,LT50为2.57d;通过虫体传代白僵菌可增强菌株的致病力.[结论]试验结果为提高病原真菌的适应性和生产实践提供了理论依据.     

紫外线诱变选育苜蓿叶象甲高毒力白僵菌

[目的]选育出对苜蓿叶象甲高毒力的白僵菌.[方法]利用紫外线对前期筛选出的白僵菌菌株照射10和30min进行诱变,选出高几丁质酶突变株,再用诱变前后的白僵菌对苜蓿叶象甲3龄幼虫进行毒力测定.[结果]用诱变前后的白僵菌对苜蓿叶象甲3龄幼虫室内毒力测定:处理9d后,诱导菌株Bb- 10- 12校正死亡率为100;,Bb - 30 - 14校正死亡率为77.78;,而朱经紫外线照射的野生型菌株校正死亡率为62.97;.[结论]通过室内毒力测定法,获得了经10 min紫外线照射诱变对苜蓿叶象甲更高毒力的1株白僵菌菌株.     

球孢白僵菌标准菌株的筛选及毒力效价的评定

观察、测定了来源不同的球孢白僵菌19个菌株的毒力、产孢量、萌发中时、水分活性,紫外照射活率、水浴活率等多个生物及生态学指标。从专业角度构建最优序列,经灰色分析,以供试菌株Bb54具最大灰关联度（r=0.9490）,故将其确定为标准菌株。将标准菌株毒力与其它菌株相比较,得到不同菌株的毒力效价单位,其中以Bb13的效价最高,为1148.65,其次为Bb86,效价1125.16,两者的灰关联度分别为0.8813及0.8950。本文的研究结果为虫生真菌的标准化提供了方法上的参考。     

壳低聚糖高产菌的诱变选育

[目的]探讨壳低聚糖高产菌诱变选育的方法。[方法]以壳低聚糖产生菌蓝色犁头霉ZH08为出发菌株,经紫外诱变和亚硝酸诱变处理,以对硝基乙酰苯胺为指示剂,利用双层平板颜色反应法,挑取菌落黄色比较深的脱乙酰酶高活性突变株,再经摇瓶发酵复筛,以获得壳低聚糖产量较高的菌株。[结果]通过对出发菌株ZH08进行理化诱变,获得突变株共7株（XH01～07）,经过反复传代和筛选,这几株突变株的壳低聚糖含量均高于出发菌株,其中XH05菌株的壳低聚糖含量最高,其产量稳定在1.07 g/L,比出发菌株提高72.6%。[结论]利用对硝基乙酰苯胺作为筛选具较高甲壳素脱乙酰酶酶活的跟踪试剂,用于筛选壳低聚糖高产菌株,是一种快速、有效的筛选方法。     

球孢白僵菌4菌株对桃蚜的控制效果研究

试验研究了球孢白僵菌(Beauveria bassiana)不同菌株对桃蚜[Myzus persicae(Sulzer)]的侵染致病力、生殖力及种群参数的影响,探讨了球孢白僵菌的侵染致病力及其开发潜力。结果表明:球孢白僵菌对桃蚜的侵染致病力、生殖力及种群参数的影响在总体上基本一致,但3个指标在4菌株间也有一定的差异,强弱依次为Bb7001>Bb7004≥Bb4014>Bb8001。桃蚜接种4菌株不同浓度孢子后在第3~5 d达到死亡高峰期;lgLC50分别为3.67,4.80,4.45,5.11。接种球孢白僵菌4菌株孢子浓度106个/mL后,桃蚜成蚜的生殖力在第3 d均与对照组桃蚜生殖力有显著差异,10 d内日均产仔与对照蚜相比下降43.71%~62.89%;球孢白僵菌4菌株对桃蚜净生殖力有极显著的降低作用,内禀增长率也有一定的降低,接种4菌株后的桃蚜,净生殖力下降了53.22%~73.36%,内禀增长力降低了21.78%~36.19%,但对世代历期几乎没有影响。综合3个方面来看,以菌株Bb7001显示了较高的杀蚜毒效,可考虑作为防治桃蚜的首选菌株进行开发。     

甜菜夜蛾优良球孢白僵菌菌株的筛选

测定初筛获得的6个球孢白僵菌菌株的毒力、产孢量、萌发率、胞外蛋白酶活性及菌株生长速度等多个生物、生态学指标,从专业角度构建最优序列,经灰色分析和不同菌株毒力效价显著性比较,筛选出了两株具有较大生产潜力的优良菌株BD-B015和BD-B038,对甜菜夜蛾的校正死亡率分别为88.33%和86.70%,僵虫率分别为86.67%和85.27%。     

防治玉米螟高效球孢白僵菌新菌株筛选

从吉林省田间采集玉米螟僵虫,进行菌株的分离、纯化,通过对产孢力、孢子发芽力和玉米螟幼虫毒力进行评价,选育出7株(D1虫-5、D1虫-9、L2虫-8、L1-1-1、D6虫-2、D10虫-2、S9虫-X-1)产孢力强、气生孢子发芽率高和毒力强的白僵菌新菌株。实验表明:7个菌株固体麦麸发酵产孢量分布在160亿～335亿个孢子/g的固体发酵物;气生孢子培养16 h萌发率为48%～93%,22 h萌发率均达到100%;孢子浓度106亿个/mL,接种8 d时,玉米螟幼虫僵死率在93%～100%;菌株毒力强弱与产孢能力和孢子萌发率无明显相关性,但与孢子浓度和作用时间呈正相关性。     

松墨天牛寄生白僵菌的优良菌株筛选

对21个球孢白僵菌(Beauveriabassiana)菌株的生长、产孢能力、抗逆性等生物学性状以及对松墨天牛(M.alternatus)4龄幼虫的毒力进行了全面的比较研究。综合各菌株的生物学特性和对天牛幼虫的毒力指标,最终得出防治松墨天牛幼虫最优良菌株是来自浙江象山的Bxs和来自江苏的B5菌株,其中Bxs在生长指标上略占优势,B在抗性指标上略占优势。     

白僵菌RAPD-PCR反应体系优化

为了建立一套适宜于白僵菌(Beauveria bassiana)退化研究的RAPD-PCR反应体系及反应程序,通过采用L16( 45)正交试验及退火温度和循环次数的单因素优化对反应体系中的各因素进行优化组合.结果表明:20μL PCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为,10×Buffer 2 μL,MgCl2(25 mmol/L)2.4 μL,4种dNTP(各2.5mmol/L)0.8 μL,随机引物(10 μmol/L)1.4 μL,TaqDNA聚合酶(5 U/μL)0.4 μL,模板DNA( 10 mg/L)1 μL.反应条件为,94℃预变性2 min,94℃变性30 s,38℃退火40 s,72℃延伸1 min,循环次数40次,72℃延伸5 min.