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《中国畜牧兽医文摘》2016,(5)
以原核表达鸡Ig Mμ链蛋白免疫BALB/c小鼠,取3次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选克隆,获得2株分泌抗鸡Ig Mμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1H2、1D10)。这2株杂交瘤细胞株连续传代4个月,并经液氮冻存5个月后复苏培养,仍能稳定地分泌特异性Mc Ab。1H2、1D10腹水ELISA效价分别为1:10~6、1:10~7,亚类鉴定均为Ig G1κ型。间接ELISA检测显示,这两株单抗均与鸡血清中的天然Ig M发生特异性反应,可用于鸡血清中Ig M的快速检测,对于各种传染病的早期诊断具有重要意义。 相似文献
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应用杂交瘤技术获得了4株抗鸡败血支原体单克隆抗体。4株单克隆抗体与鸡滑液支原体、传染性支气管炎病毒、鸡新城疫病毒、鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌抗原均无交叉反应。1株单克隆抗体为IgG2a,其余3株单克隆抗体均为IgM。4株杂交瘤细胞染色体均有少量中部或亚中部着丝点染色体。 相似文献
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江苏省家禽科学研究所首先研究成功抗鸡 IgM(u 链)单克隆抗体。方法是以绵羊红血球免疫鸡,获得富含 JgM 的鸡血清。提纯鸡 IgM 作为抗原免疫 BALB/C 系小鼠。取免疫鼠脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞以 PEG—1000融合,获得稳定分泌特异性抗鸡 IgM 的杂交瘤细胞共7株,分别命名为 TM_(18)、TM_(21)、TM_(25)、TM_(34)、TM_(57)、TM_(62)和 TM_(65)。杂交瘤 相似文献
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分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:6,自引:0,他引:6
利用超速离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广东地方分离株D41免疫BALB/c小鼠。取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经筛选及克隆,成功地建立了6株可分泌抗IBVD41株的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞:B5、B8、C7、D8、D9、G11。其中B8、C7、G11的稳定性最好,腹水McAb效价高达1010,无血清培养上清McAb(浓缩30倍)效价达4×104以上。6株杂交瘤细胞的特异性均很好。 相似文献
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抗奶牛衣原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:2,自引:1,他引:2
将奶牛衣原体抗原免疫的 B A L B/c 小鼠脾细胞与 S P2/ O 细胞在聚乙二醇作用下融合, 用间接 E L I S A 试验筛选, 以有限稀释法克隆3 次, 得到6 株分泌抗奶牛衣原体单克隆抗体( Mc Ab) , 选择抗体分泌较高的 G2 、 F23 、 A 株进行详细的研究, 结果表明, 其核内染色体数为9035 、9214 、9442 ; 抗体属性为 Ig G2a 、 Ig G1 、 Ig M, 用交叉 E L I S A 法对3 株 Mc Ab 作特异性分析, 该 Mc Ab 只与奶牛衣原体抗原, 猪衣原体抗原、羊衣原体抗原发生反应,而不与沙眼衣原体抗原、伪狂犬病抗原、布鲁氏杆菌抗原发生反应。 相似文献
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抗兔轮状病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
用小鼠骨髓瘤细胞与经兔轮状病毒免疫的BALB/c系小鼠脾细胞进行融合,融合成功率为22%。经间接酶联免疫吸附试验和斑点酶联免疫筛选杂交瘤细胞,阳性率为29%左右。对其中6株强阳性的杂交瘤细胞进行了亚克隆,获得高产亚克隆杂交瘤细胞,用BALB/c小鼠生产了腹水,鉴定后选取2株强阳性高效价的杂交瘤细胞,以ELISA阻断试验检验其分泌抗体的特异性,以直接ELISA测其敏感性,用琼脂双扩散试验鉴定类和亚类 相似文献
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我校军事兽医研究所二室细菌组,用鼻疽菌菌体抗原给BALB/C小鼠免疫四次,加强免疫后第3天取其脾细胞,与NS-1骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)的作用下进行融合,接种于40孔微量塑料板5块共200孔,第8天出现融合细胞,第14天有15孔出 相似文献
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采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。 相似文献
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按katendel氏法用伊氏锥虫JG株制备全虫抗原,以其免疫BALB/C小鼠。以50%PEG(MW4000,pH8.0)作融合剂。使免疫鼠脾细胞与S P2/0 Ag14(简称S P2/0)骨髓瘤细胞融合。经系统筛选和克隆化,建立了9个分泌抗伊氏锥虫抗体的杂交瘤细胞株。他们分泌的McAb,4株为IgG1、1株为IgG3、另4株为IgM。9株McAb在琼脂免疫双扩散试验中均不形成沉淀线。用ELISA检测,这些细胞系培养上清和腹水与同源伊氏锥虫虫株抗原的滴度分别为1:64-1:1024和1:6.4×103-1:6.4×105;与泰氏锥虫和弓形虫抗原则全为阴性。用2个异源伊氏傩虫虫株抗原检测时,8株无任何交叉反应,8株与2个异源株均有交叉反应,另3株则只与1个异源株有交叉反应。用增值反应检查了5株IgG类McAb识别抗原决定簇的特异性,除2株共同识别一种抗原决定簇外,另8株各自识别不同的抗原决定簇。 相似文献
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用绵羊肺炎支原体(MO)抗原免疫的BALB/C小鼠,取血清抗体阳性免疫鼠的脾细胞与SP2/O细胞在聚乙二醇作用下进行融合,产生杂交瘤细胞、用间接ELISA法对杂交瘤细胞生长孔上清液进行检测,筛选阳性杂交瘤细胞株.以有限稀释法克隆1~2次,得到6株分泌抗绵羊肺炎支原体抗原的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株.选择抗体分泌较高的14A6、7A27、B38进行了较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为94~96.抗体属性是:1株为IgG2a、2株为IgG1.用间接ELISA法对3株McAb作符异性分析、该McAb只特异地与绵羊肺炎支原体抗原发生反应,而不与猪肺炎支原体、山羊无乳症支原体抗原发生反应.将杂交瘤细胞注射BALB/C小鼠诱生腹水.其抗体效价提高100倍.杂交瘤细胞在液氮中保存1~2年后复苏仍能稳定地分泌抗绵羊肺炎支原体McAb。 相似文献
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抗绵羊肺炎支原体单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
用绵羊肺炎支原体抗原免疫的BALB/C小鼠,取血清抗体阳性免疫鼠的脾细胞与SP2/O细胞在聚乙二醇作用下进行融合,产生杂交瘤细胞、用间接ELISA法对杂交瘤一长孔上清液进行检测,筛阳性交瘤细胞株。 相似文献
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将猪细小病毒(PPV)免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用血凝抑制试验(HI)筛选,以有限稀释法克隆3次,得到5株分泌抗PPV单克隆抗体(McAb),选择抗体分泌较高的4F4、A4或E8进行较详细的研究,结果表明,其核内染色体数为93和87,抗体属性为IgG1,其中1株为K轻链,用交叉HI法对2株McAb作特异性分析,该McAb只特异地与PPV发生反应,而不与日本乙 相似文献
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通过3次sp2/0骨髓瘤细胞与免疫小鼠脾细胞间的融合试验,筛选出7株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中2G_6细胞株作了进一步的检定分析,用2G_6上清液对T.e抗原进行ELISA试验,显示出高度的特异性,与血吸虫、弓形虫均未出现交叉反应。效价为1∶5.1×10~3,诱生腹水抗体的效价为1∶1.6×10~7,免疫球蛋白类型属IgG_1亚美。该细胞株在外培养下,稳定地分泌特异性抗体已达6个月之久,在液氮冻存近8个日之后仍深持分泌抗体的能力。 相似文献
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我所经过一年多的工作,初步建立了抗破伤风杂交瘤细胞株,并应用单抗在对小白鼠的抗毒素疗效方面收到了良好效果,为更有效地诊治人畜共患的破伤风病打下基础,现将结果报告如下。 相似文献