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1.
张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》1992,20(Z1)
用80μs和800,1000,1200,1400V/cm的脉冲获得的2细胞胚卵裂球融合率分别为53%(21/40),70%(32/46),82%(36/44),81%(29/36);用1200V/cm和80,160,320μs的脉冲获得2细胞胚卵裂球的融合率分别为82%(36/44),92%(44/48),70%(26/37)。用160μs和1400,1600,1800V/cm的脉冲获得的4细胞胚卵裂球融合率分别为77%(27/35),91%(39/43),79(30/38);用1600V/cm和80,160,320μs的脉冲获得的4细胞胚卵裂球融合率分别为73%(29/40),91%(39/43),77%(27/35)。2,4细胞胚卵裂球融合的适宜条件分别是1200V/cm和160μs,1600V/cm和160μs。 相似文献
2.
用80μs和1000V/cm的电脉冲,在PBS、甘露醇液和Whitten氏液中诱导融合,卵裂球的有效融合率分别为79%(38/48),68%(27/40)和68%(26/38)。在PBS中,用80μs和600,800,1000,1200V/cm的电脉冲获得的卵裂球融合率分别为53%(21/40),68%(30/44),79%(38/48)和78%(28/36);用1000V/cm和40,80,160,320μs的电脉冲获得卵裂球融合率分别为66%(23/35),79%(38/48),90%(36/40)和75%(30/40);用1,2和3个160μs,1000V/cm的电脉冲获得的卵裂球融合率分别为90%(36/40),78%(28/36)和 67%(24/36)。 相似文献
3.
小鼠电融合胚胎发育影响因素的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
电融合技术,是获得四倍体胚胎的主要手段.本试验研究了各种不同因素,对小鼠电融合胚发育的影响.结果表明,电刺激前后,使用不同的操作液对融合胚发育有影响.电刺激前使用M2液、电刺激后在Whitten氏液中融合,然后转入CZB液中培养,这一操作体系(M/W—CZB)效果最好,融合胚的囊胚发育率为80.5%,显著高于M/W—W,W/W—W,W/W—CZB组,后者的囊胚发育率分别为0,0,54.5%(P<0.05).试验还发现,刺激强度为1.0kv/cm,80μs;1.0kv/cm.40μs和0.8ky/cm,80μs时,融合囊胚的发育率分别为79.0,81.9和71.1%.HCG注射后47h、48h的2—细胞胚胎的融合胚发育率,显著高于(P<0.01)HCG注射后42h、44h和46h的,囊胚发育率分别为82.9,80.6,0,0和22.8%. 相似文献
4.
以湖北白猪为试验动物,研究了不同处理对猪2-细胞胚胎电融合的影响,结果表明;融合液的离子强度,电场强度,脉冲时程和交流电处理等均影响电融合的效率,以非电解质的甘露醇溶液为融合液,融合前交流脉冲处理,直流电场强度为1500-2000V/cm和脉冲时程为40-60μs时可获得较高的融合效率。 相似文献
5.
牛体外受精卵5~10细胞期单一卵裂球染色体诊断 总被引:2,自引:0,他引:2
利用单一卵裂球的染色体诊断牛体外受精5-~10-细胞期胚胎的正常性。牛体外受精后5-~10-细胞期的胚胎用0.5%链霉蛋白酶处理分离单一卵裂球,然后用100ng/ml长春花碱处理10h,制作染色体标本。检查33枚不同发育期胚胎及卵裂球185个,有43.8%的可进行染色体分析(81/185)。结果表明,正常2倍体的发生率为46.9%,染色体异常的卵裂球中,单倍体的发生率为50.6%,显著高于多倍体(2.5%)的发生率(P<0.001)。单倍体中含有X-性染色体和含有Y-性染色体的性比基本相同。引起单倍体发生的原因可能是由于卵母细胞的孤雌发育或受精过程中精子穿入未成熟卵后由雄性原核产生。 相似文献
6.
对山羊2-细胞胚胎的电融合参数进行了研究。结果表明,从融合率、卵裂率、胚胎死亡率三个指标综合衡量,电场强度1.2kV/cm,脉冲时程40μs是适宜的参数。 相似文献
7.
小鼠卵母细胞孤雌激活及胚胎电融合研究 总被引:3,自引:0,他引:3
对小鼠的研究结果表明,7%酒精对17h和19h卵龄卵的激活率差异不显,但19h卵激活后的卵裂率显高于17h卵,酒精处理前去掉卵丘能使激活率提高的90%-100%,酒精处理时间之间差异不显。 相似文献
8.
对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究,证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解冻半胚的成活率:①在含10%甘油的磷酸缓冲液中平衡35~40min;②在-6.5℃或-7℃诱发结晶,③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min;④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮;⑤在30~35℃的水浴中解冻;⑥在含不同浓度(6.6%,3.3%,0%)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35~40min,去除甘油。将按上述程序冷冻—解冻的16对半胚移植后,获半胚鼠12只,其中5对为同卵双生。 相似文献
9.
对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究,证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解决半胚的成活率:①在含10%甘油的磷酸缓冲液中平衡35-40min;②在-6.5℃7或-7℃诱发结晶;③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min;④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮;⑤在30-35℃的水浴中解冻;⑥在含不同浓度(6.6%,3.3%,0%)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35-40min,却除甘油。将按上述程序冷冻-解冻的16对半胚移植后,获半胚鼠12只,其中5对为同卵双生。 相似文献
10.
研究了分割所用溶液、冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响。结果证明:①将解冻囊胚分割后,无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响(P>0.05);②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异(P>0.05);③与分割解冻桑椹胚相比,在蔗糖液中分割解冻囊胚可显著提高冻胚分割效果(P<0.05)。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体,结果有2只妊娠,共获得半胚仔鼠6只,其中2对为同卵双生。 相似文献
11.
室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20%犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,胚胎回收率为86.9%(254/292),胚胎形态正常率为77.1%(196/254)。其中部分桑椹胚经体外培养,囊胚发育率为71.4%(20/28)。将110枚冻胚移植给7只受体,3只妊娠,产仔12只(5,7),妊娠率为43%(3/7),产仔率为10.9%(12/110),其中囊胚移植1只受体妊娠产仔3只,产仔率为25%(3/12)。 相似文献
12.
利用CMRL—1066和国产其它药品对昆明白杂种小鼠2—细胞期的胚胎,进行了体外培养试脸,成功地将2—细胞胚胎在体外培养条体下,使之生长发育到卵圆筒阶段。从2—细胞期开始计算,囊胚形成率为70%,卵化率为30%,附植率为2%,卵圆筒期胚胎形成率为1%。试验发现,把2—细胞期小鼠胚胎体外培养到卵圆筒期比体外发育到同阶段推迟1~2天,此卵圆筒期胚胎的形成率与国外报道的24%相比仍然很低,其原因估计可能为:1)小鼠的品种;2)国产药物的纯度;3)CO2条件不同而造成。 相似文献
13.
为探讨不同浓度的亚硒酸钠对小鼠体重、超排效果及其胚胎后续发育的影响,将6~7周龄的小鼠随机分为4组,1组为对照组,其余3组按小鼠每千克体重分别注射0.30 mg(低剂量组)、1.50 mg(中剂量组)和2.25 mg(高剂量组)的亚硒酸钠溶液,再分别测量各组小鼠的体重及观察、记录各组小鼠的超排效果和胚胎体外发育情况.结果显示:(1)高剂量组小鼠体重变化量(-0.31 g)显著低于低剂量组(7.95 g)、中剂量组(8.65 g)和对照组(11.06 g)(P<0.05),而低剂量组、中剂量组与对照组之间无显著差异(P>0.05);(2)不同剂量亚硒酸钠处理的小鼠经超排后回收的平均可用胚胎数,各组之间相比均无显著差异(P>0.05),但高剂量组冲出的胚胎经体外培养后的囊胚发育率(17.6%)显著低于对照组(27.6%)(P<0.05),而与低剂量组(24.3%)和中剂量组(20.6%)差异不显著(P>0.05).以上结果表明,高剂量的亚硒酸钠不利于小鼠胚胎的发育,其作用机制需要从细胞和分子水平做更深入的研究. 相似文献
14.
本试验用0.1mL培养液在37℃,5%CO2条件下培养昆明小鼠原核胚。结果表明,用mSOF和PL3培养小鼠原核胚,4-细胞发育率分别为10%和77%。以后停止发育;PL3和PL3培养小鼠原核胚,每24h换1次培养液,结果发育到桑椹胚和囊胚的百分离分别是27.5%和38.5%;用mMTF,mMTF+20AA,mMTF+Non+Gln,mMTF+Non,mMTF+Ess+Gln培养小鼠原核胚,发育率分 相似文献
15.
本试验采用一步添加防冻剂(10%甘油)、12.5%蔗糖一步细管内脱除甘油,37℃温水快速解冻法,对393枚处于不同发育时期的优良胚胎做了冷冻研究,旨在探索不同发育时期的胚胎对一步细管内冷冻解冻耐受性存在的差异,为哺乳动物胚胎冷冻和移植提供资料。解冻后体外培养结果表明,晚期桑椹胚(包括致密桑椹胚和致密后桑椹胚两个阶段)的抗冻能力最强,体外发育率致密桑椹胚为80.0%(32/40)、致密后桑椹胚为78.0%(32/41);早期桑椹胚和早期囊胚次之,体外发育率为62.2%(28/45)和66.1%(39/59);囊胚和扩展囊胚的抗冻能力最低,体外发育率仅为51.6%(31/60)和54.5%(18/33)。 相似文献
16.
为提高核移植的效率,采用SHIMADZU生产的SSH-2电融合仪进行小鼠卵母细胞电激活及2-细胞胚胎电融合,结果表明:(1)不同脉冲的卵激活率有极显著差异(P<0.01),在2次脉冲和30μs的脉冲宽度的条件下,脉冲强度以0.1kV/cm最好,激活率达76.9%;(2)不同脉冲强度、脉冲次数和脉冲宽度的胚胎融合率亦有极显著差异(P<0.01),最佳融合参数为0.1kv/cm,30μs的脉冲宽度及2脉冲,胚胎融合率达84.6%。 相似文献
17.
本研究主要探讨了牛磺酸对昆明(KM)小鼠体外胚胎发育及对胚胎着床的作用。在mKSOM(modified potassium simplex optimized medium)胚胎体外培养液中分别添加不同浓度牛磺酸,培养24、72 h后分别统计4-细胞率、囊胚率、囊胚总细胞数;采用子宫角注射的方法,研究牛磺酸转运抑制剂β-丙氨酸对孕D9胚胎着床数的影响。结果表明,添加10 mmol/L牛磺酸培养液组的胚胎4-细胞率高于对照组(P<0.05),囊胚率与囊胚总细胞数明显高于对照组(P<0.01)。子宫角注射β-丙氨酸(20 μg/mL)显著降低D9着床的胚胎数。本研究初步明确了牛磺酸对小鼠体外胚胎发育及对胚胎着床的影响,为进一步研究胚胎发育和着床提供参考。 相似文献