云南省楚雄州部分地区猪瘟血清学调查

为了解楚雄州部分地区的猪瘟免疫情况,利用酶联免疫法（ELISA）对楚雄市、南华县和禄丰县随机采取的393份血清进行猪瘟抗体检测,并对各县（市）的调查数据加以比较,了解猪瘟在楚雄州部分地区的免疫情况。结果显示,楚雄州部分地区均有较高的猪瘟抗体阳性率,各县（市）的猪瘟抗体阳性率都在80％以上,有的县（市）猪瘟抗体甚至达到了100％。说明楚雄州部分地区的猪瘟免疫效果较好,猪瘟免疫成功。     

河南省部分地区猪流感血清学调查

采用血凝抑制试验对河南省新乡、焦作、漯河等地采集的139份猪血清样品进行了猪流感病毒H1、H3、H5、H9亚型抗体的检测。结果显示,在被调查的139份血清中,H1亚型SIV抗体阳性率为43．17％,H3亚型SIV抗体阳性率为0,H5亚型SIV抗体阳性率为2．16％,H9亚型SIV抗体阳性率为1．44％;H1＋H5亚型SIV抗体阳性率为1．44％：H1＋H9亚型SIV抗体阳性率为1．44％;H1＋H5＋H9亚型SIV抗体阳性率为0。表明在所调查的猪群中,猪流感病毒的感染较为普遍,大部分猪场都曾被H1亚型感染,部分猪群有多种亚型混合感染存在。     

河南省部分地区猪流感血清学调查

采用血凝抑制试验对河南省新乡、焦作、漯河等地采集的139份猪血清样品进行了猪流感病毒H1、H3、H5、H9亚型抗体的检测.结果显示,在被调查的139份血清中,H1亚型SIV抗体阳性率为43.17%,H3亚型SIV抗体阳性率为0,H5亚型SIV抗体阳性率为2.16%.H9亚型SIV抗体阳性率为1.44%:H1+H5亚型SIV抗体阳性率为1.44%;H1+H9亚型SIV抗体阳性率为1.44%:H1+H5+H9亚型SIV抗体阳性率为0.表明在所调查的猪群中,猪流感病毒的感染较为普遍,大部分猪场都曾被H1亚型感染,部分猪群有多种亚型混合感染存在.     

广西部分地区猪流感病毒的血清学调查

为了解广西猪群中猪流感(SI)的流行情况,以猪流感病毒H3N2亚型作为诊断抗原,采用微量血凝抑制试验(HI)方法,对广西部分市(县)的猪群进行猪流感的血清学调查.在12个市(县)采集的1000份血清中,有10个市(县)检出H3N2抗体,共有257份血清呈H3N2抗体阳性,平均阳性率为25.7%.百色的阳性率最高,达到82.9%,贵港和南宁市郊两地没有检出阳性,其它9个市(县)的阳性率在13.0%～45.7%之间.结果表明我区猪群中很可能存在H3N2亚型猪流感感染,其中百色地区猪流感的感染率比较高.     

云南省楚雄部分地区猪场猪瘟血清学调查

为了解云南省楚雄地区猪瘟(CSF)的感染情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对楚雄州部分地区规模化猪场和散养户饲养猪的283份血清样品进行猪瘟抗体检测。结果表明,楚雄地区规模化猪场和散养户的猪瘟抗体阳性率为56.89%,其中规模化养殖场为71.77%,散养户为14.86%。从检测结果来看,部分猪场猪瘟免疫效果不理想,今后还需加大免疫力度,从而达到更好的免疫保护。     

云南省部分地区猪衣原体感染的血清学调查

为了解云南省猪衣原体病流行情况,采用间接血凝试验对采自云南省部分地区规模化猪场及散养户猪只血清共1 257份,进行猪衣原体感染的血清流行病学调查.结果表明,共检出阳性血清232份,阳性率为18.5%.其中,采自规模猪场的956份样品中,阳性193份,阳性率为20.2%;其中母猪样品132份,阳性38份,阳性率为28.8 9,5,育肥猪样品824份,阳性155份,阳性率为18.8%.农户散养户301份样品,阳性39份,阳性率为13%;其中母猪样品53份,检出11份阳性,阳性率20.8%,育肥猪样品248份,阳性28份,阳性率11.3%.表明猪衣原体病在云南省呈流行趋势.     

鸭出血症血凝及血凝抑制试验的建立和应用

鸭出血症是由不同于鸭瘟病毒的鸭新型疱疹病毒引起的鸭的一种传染性疾病。根据该病毒可凝集Balh／c小鼠红细胞的特性，我们建立了鸭出血症血凝及血凝抑制试验，经试验表明该方法是一种快速、实用、特异性强的检测方法。     

2016年我国部分地区屠宰场猪流感血清学调查

目前,全球范围内流行的猪流感病毒亚型主要有3种:H1N1、H3N2、H1N2,此外,H1N7、H4N6、H9N2、H5N1、H3N3、H3N1和H2N3等亚型病毒也在猪体内分离到,但没有证据显示这些病毒在猪体内建立稳定的谱系。为了解我国屠宰场猪群中流感病毒的感染与流行情况,选取2009年甲型H1N1(pdm/09)、欧洲类禽H1N1(EA H1)、经典H1N1(经典H1)、新型三源重排H1N1(ReH1)、H3N2(H3)、H9N2(H9)流感病毒制备的血凝抑制(HI)标准抗原作为检测抗原,对全国25个屠宰场的猪血清进行了HI抗体的检测。结果显示,2016年我国屠宰场样品中,pdm/09、EA H1、经典H1、Re H1、H3、H9抗体阳性率分别为23.18%、28.12%、19.34%、24.97%、7%、7.41%;在所监测地区中,华南地区屠宰场猪流感血清平均抗体阳性率最高。结果表明,2016年我国屠宰场猪群中H1N1亚型猪流感病毒感染比较普遍,H3N2和H9N2亚型猪流感病毒抗体阳性率较低。     

兔出血症病毒西藏野毒分离株的鉴定

对西藏农牧学院分离的一株兔出血症病毒(RHDV)西藏野毒进行血凝性、特异性和致病性进行鉴定。结果表明,此株RHDV野毒血凝价高达10240以上;RHDV抗血清可特异性抑制该株病毒对人“O”型红细胞的凝集;西藏株RHDV的最小致死量为10^-5／mL,是一株具有高致病力的RHDV强毒株。     

兔病毒性出血症病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

建立一种检测兔病毒性出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法。对RHDV陕西分离株VP60基因进行原核表达,Western blot分析表达产物的免疫反应性;以纯化的蛋白为包被抗原建立ELISA方法,并对反应条件进行优化。结果表明,VP60蛋白在大肠杆菌中成功表达,产物约为42.34 ku的融合蛋白,具有良好的反应原性;优化的ELISA最佳工作条件为:重组抗原包被浓度2.9μg/mL,37℃2 h后4℃过夜,1%BSA 37℃封闭2 h,待检血清37℃孵育1 h,酶标抗体1∶10 000稀释,37℃作用1 h,37℃显色5 min,临界值为0.340;建立的ELISA方法特异性强、重复性好、敏感性高;临床检测180份样品,与血凝抑制试验的符合率为74.1%,与商品化试剂盒检测结果符合率为94.8%。该方法可用于临床样品的大批量检测。     

Outbreak of rabbit hemorrhagic disease virus 2 in the southwestern United States: first detections in southern California

An outbreak of rabbit hemorrhagic disease virus 2 (RHDV2)-associated disease occurred in the southwestern United States following its first detection in New Mexico in March 2020. The disease spread throughout several states and was diagnosed for the first time in California on May 11, 2020, in a black-tailed jackrabbit (Lepus californicus). The following day, the California Department of Food and Agriculture (CDFA) issued an order banning the entrance into California of several lagomorph species and their products from any state in which the disease had been detected in the last 12 mo. RHDV2 is a threat to wild lagomorph species in California, including the endangered riparian brush rabbit (Sylvilagus bachmani riparius). Therefore, the California Department of Fish and Wildlife (CDFW) started tracking any mortality event in wild lagomorph populations. As of August 9, 2020, RHDV2 had been detected in wild and domestic lagomorphs of several counties in southern California that were submitted to the California Animal Health and Food Safety laboratory system by the CDFA or the CDFW. These positive cases included 2 additional black-tailed jackrabbits and 3 desert cottontail rabbits (Sylvilagus audubonii). In addition, the infection spilled over to domestic populations, whereby it was confirmed on July 10, 2020, in a domestic rabbit (Oryctolagus cuniculus).     

兔出血症病毒衣壳蛋白VP60与兔肝脏细胞中相互作用蛋白的初步筛选

为鉴定兔出血症病毒(RHDV)在感染兔肝脏过程中与肝细胞膜表面相互作用的靶蛋白,本研究利用SMART文库构建技术构建了兔肝脏细胞的真核表达cDNA重组质粒文库,将其转染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选表达兔肝细胞蛋白的阳性SP2/0细胞.以RHDV-VP60蛋白作为固相包被抗原,经筛选,获得能够与VP60蛋白相互结合的表达性阳性SP2/0细胞克隆.测序表明26个克隆与兔的一些功能性蛋白有较高的同源性,其中包括代谢酶类13个、免疫信号通路受体蛋白5个以及其他细胞膜蛋白等.本研究鉴定的与RHDV VP60具有结合性的细胞蛋白为RHDV感染机制的研究奠定了基础.     

三峡库区紫色土旱坡地农桑配置模式对土壤养分的影响

针对三峡库区紫色土流失严重和土壤肥力低的现状,本试验利用水土保育模式--农桑间作试验,研究横坡农作(CT)、双边桑树+横坡农作(T₁)、等高桑树+双边桑树+横坡农作(T₂)及四边桑树+等高桑树+横坡农作(T₃)4个处理对土壤养分的影响。结果表明,桑树布局小区内的土壤碱解氮、速效磷、速效钾和有机质含量均有极显著提高,且土壤碱解氮、速效磷、速效钾和有机质含量平均值大小均表现为:等高桑树+双边桑树+横坡农作(T₂)>四边桑树+等高桑树+横坡农作(T₃)>双边桑树+横坡农作(T₁)>横坡农作(CT)。4个处理的土壤碳氮比和碳磷比变化幅度分别在7~20和10~27之间,其中等高桑树+双边桑树+横坡农作(T₂)小区各个坡长的土壤碳氮比和碳磷比最大。土壤有机质、碱解氮、速效钾、碳磷比与玉米和榨菜产量具有极显著的正相关关系。可见,旱坡地农桑配置模式在一定程度上可以提高和维持土壤养分,降低上坡段土壤碳氮比和碳磷比,从而为三峡库区水土保育模式优选提供理论依据。     

ELISA验证兔铁蛋白重链与RHDV VP60相互作用

为验证本实验室前期实验中初步鉴定的兔铁蛋白重链(FTH)与兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)具有相互作用关系,本研究采用RT-PCR技术从兔肝脏扩增编码FTH基因,并将其克隆至pET-32a(+)中转化大肠杆菌BL21 (DE3)pLysS中进行表达.重组FTH蛋白(rFTH)经IPTG诱导获得表达,采用Ni-NTA Agarose纯化rFTH.利用纯化的VP60作为ELISA包被抗原检测FTH与VP60的相互作用.结果表明,ELISA检测的OD490nm值与FTH蛋白量呈正相关.本研究进一步验证了FTH与VP60具有相互作用关系.     

三峡库区澎溪河消落区草本植物的分布与分解

采用随机多次小样方对三峡库区澎溪河消落区草本植物群落进行了调查,并应用分解网袋法对消落区草本植物分解速率进行了研究。结果表明,消落区草本植物覆盖度为50％～90％;在分解试验进行的94d中,草本植物分解速率为0.073～0.081g/d,平均0.070g/d,干物质流失率为78.35％～89.88％,平均为82.49％;试验期间共采集到底栖动物21种,分属于9目、10科,20属。第2,6,11,17,94天栖息密度均值依次为27,80,37,114,300个/m²,生物量平均值依次为0.2992,0.3078,0.0657,0.3154,0.2257g/m²。     

兔出血症病毒和巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用

参照GenBank公布的兔出血症病毒(RHDV)VP60、巴氏杆菌kmt基因序列,设计两对引物,分别用于扩增RHDV的VP60和巴氏杆菌kmt基因的目的片段。通过正交试验,对反应各组分浓度与组合、反应退火温度及反应参数进行优化,最后建立了RHDV、巴氏杆菌双重PCR检测方法并进行临床应用。结果显示:本试验建立的双重PCR检测方法能够特异性地检测RHDV及巴氏杆菌,最低核酸检出限分别达到70 pg和62pg。检测兔源大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌,结果均为阴性。用本方法对临床送检的104份病料进行检测,结果检出RHDV与巴氏杆菌混合感染1份,巴氏杆菌单独感染10份,双重PCR检测结果与临床病原分离结果完全一致。表明本试验建立的兔出血症病毒和巴氏杆菌双重PCR检测方法具有良好的临床应用价值。     

三峡库区皇竹草的生物学特性与栽培模式

在对三峡库区生态环境与皇竹草生态适应性分析基础上,进行了不同海拔高度皇竹草越冬保种、无性繁殖与生物学特性观测等试验,提出了三峡库区皇竹草的栽培模式。结果表明:皇竹草适宜于三峡库区栽植与利用,能在三峡库区生态环境建设及退耕还草养畜工程中大力推广应用。