菌源性胞外弹性蛋白酶应用特性研究

研究菌源性胞外弹性蛋白酶对弹性蛋白、明胶、酪蛋白、大豆分离蛋白、牛血清白蛋白、卵白蛋白等的分解情况.表明菌源性胞外弹性蛋白酶对于弹性蛋白含量丰富的肉类有较强的水解力;对于较韧的肉类(牛肉、猪肉),其水解力可达59.9%,对于较嫩的肉类(鱼肉)水解力仅为22.8%.     

蜜蜂球囊菌几种胞外蛋白酶的特性

 【目的】研究由蜜蜂球囊菌引起的真菌性疾病白垩病的侵染机制,以及蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性。【方法】利用人工合成的培养基,在体外诱导蜜蜂球囊菌分泌胞外蛋白酶,用硫酸铵沉淀和透析,获得初酶液,利用相应的底物对酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶、弹性蛋白酶和胰蛋白酶的活力进行测定。【结果】蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶主要有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶3种,无弹性蛋白酶和胰蛋白酶。对这3种酶的最适温度、pH值以及热稳定性和酸碱稳定性进行了测定。这3种胞外酶的最适反应温度都在40℃左右,最适pH为7左右,均不耐高温,热稳定性差,在中性的pH环境下比较稳定。【结论】蜜蜂球囊菌可以分泌多种胞外蛋白酶,它们的最适pH和温度与蜜蜂消化道内的环境一致。     

水稻纹枯病菌胞外蛋白酶分离纯化及部分特性分析

[目的]为深入研究水稻纹枯病菌的致病机理奠定基础。[方法]水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solaniKhn）发酵液经硫酸铵沉淀,用离子交换柱层析、疏水层析和分子筛层析方法分离纯化胞外蛋白酶。[结果]从水稻纹枯病菌发酵液中分离纯化到一个分子量约为49.5ku的胞外蛋白酶。其活性最适温度为30℃,最适pH为6.4。Zn^2＋、Fe^3＋、Cu^2＋对酶活性有抑制作用,Mg^2＋、Mn^2＋对酶活性无影响,Ca^2＋在低浓度下对酶活性有激活作用。[结论]水稻纹枯病菌可产生胞外蛋白酶,该胞外蛋白酶与水稻纹枯病菌致病性的关系还有待深入研究。     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的研究概况

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶的研究概况李焕荣,陆承平（北京农学院动物科学系,北京１０２２０６）（南京农业大学动物医学院,南京２１００９５）嗜水气单胞菌等气单胞菌是鱼类［３３］、冷血动物及包括人在内的温血动物的重要病原菌［５,１２,１３］．在自然界中分布极广...     

化学杀虫剂对绿僵菌胞外蛋白酶和几丁质酶活性的影响

研究了几种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)胞外蛋白酶和几丁质酶活性的影响。结果表明,化学杀虫剂对绿僵菌的胞外蛋白酶和几丁质酶活性影响较大,供试的12株金龟子绿僵菌大部分菌株的胞外蛋白酶和几丁质酶活性均明显降低,仅有Ma202、Ma207菌株的胞外蛋白酶和几丁质酶活性略有提高。     

蟹源副溶血弧菌胞外蛋白酶的纯化与特性分析

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE—Cellulose离子交换柱层析等方法,从中华绒螯蟹Eriocheir sinensis弧菌病病原菌——副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus的胞外产物中分离纯化出两种具有致病作用的胞外蛋白酶。相对分子质量为39600的蛋白酶是一种金属蛋白酶,EDTA可抑制其活性,金属离子Cu^2＋、Mg^2＋、Fe^2＋对该酶有抑制作用,而Ca^2＋对其则有一定程度的激活作用;该酶在50—60℃下热稳定性最好,最适pH为9。而相对分子质量为20000的蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶,EDTA对其酶活力几乎没有影响,但苯甲基磺酰氟（PMSF）可抑制其酶活性;该酶的最适温度为50℃,最适pH为8。     

Dh菌株胞外蛋白酶及几丁质酶的活性测定

对Dh菌株的胞外蛋白酶及几丁质酶的活性进行了测定，发现该菌的胞外蛋白酶足以碱性蛋白酶为主，兼含中性和酸忡蛋白酶组成的复合酶系，其中中性蛋白酶对酸碱和温度的稳定性较好，最适作用温度为45C；该茼胞外蛋白酶在虫尸培养基和明胶培养基上均可活跃地产生，不同温度下在明胶-琼脂平板培养基上培养3d后用15％HgCl处理后菌落周围显示出清晰透明的环状，产酶量在33C时达到最大值，随后减少；几丁质酶产酶高峰出现在4～5d。     

蟹源副溶血弧菌胞外蛋白酶的纯化与特性分析

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶层析和DEAE-Cellulose离子交换柱层析等方法,从中华绒螯蟹Eriocheir sinensis弧菌病病原菌——副溶血弧菌Vibrio parahemolyticus的胞外产物中分离纯化出两种具有致病作用的胞外蛋白酶。相对分子质量为39 600的蛋白酶是一种金属蛋白酶,EDTA可抑制其活性,金属离子Cu2+、Mg2+、Fe2+对该酶有抑制作用,而Ca2+对其则有一定程度的激活作用;该酶在50⁶0℃下热稳定性最好,最适pH为9。而相对分子质量为20 000的蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶,EDTA对其酶活力几乎没有影响,但苯甲基磺酰氟(PMSF)可抑制其酶活性;该酶的最适温度为50℃,最适pH为8。     

嗜水气单胞菌胞外蛋白酶ECPase54的纯化及特性分析

嗜水气单胞菌（Ａｈ）Ｊ－１株的液体培养物上清在５６℃或与乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）或丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟（ＰＭＳＦ）作用，其胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓｅ）的活力有不同程度的下降，将酪蛋白掺入丙烯酰胺聚合后，加Ａｈ－Ｊ－１上清作ＳＤＳ－ＰＡＧＥ３７℃原位消化，染色，显示上清中存在至少５种分子量不同的蛋白酶，ＡｈＪ－１株的培养上清经硫酸铵沉淀，ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２０     

山东省马铃薯青枯菌生物型研究

从山东省枣庄,新泰、济南,泰安等8个县市采集到的马铃薯青枯病标本中分离到54个菌株,进行致病性测定,并对3种双糖和3种已醇的利用能力进行了试验,试验结果证明,山东马铃薯青枯菌存在4种生物型,大部分菌株属于生物型Ⅲ(23 54)和一个新生物型(24 54)能使3种双糖和两种已醇利用产酸,但对甜醇不能利用产酸有少数菌株属于生物型Ⅱ和(?)     

山东番茄细菌性疮痂病研究：病原鉴定及品种抗病性测定

１９９３－１９９５年从本省济南、泰安、新泰、青岛等１３县（市）调查采集的番茄茄疮病病叶和病果上分离得到６０个细菌菌株，经致病性测定、均能产生典型的疮痂病症状，各菌株间致病力有一定差异。结果表明，该病菌为油菜黄单胞杆菌疱斑致病变种：Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｒｓｔｒｉｓｐｖ．ｖｅｓｉｃａｔｏｒｉａ（Ｄｏｉｄｇｅ１９２０）Ｄｙｅ１９７８。从本省收集２５个品种（系），进行抗病性测定，没有一个免疫的     

内蒙古西部地区番茄溃疡病病原细菌的研究

从内蒙古西部地区番茄病株上分离到病原细菌,经致病性测定和细菌学鉴定,确定４个供试菌株为ＣｌａｖｉｂａｃｔｅｒｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｅＳｕｂｓｐ．ｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｅ（Ｓｍｉｔｈ）Ｄａｖｉｓｅｔａｌ．并测得其最适生长温度２５～２９℃,最高生长温度３９℃,致死温度５１℃,生长ｐＨ范围５．０～８．５,最适生长ｐＨ值６．０～６．５。     

山东省马铃薯青枯病的发生规律及防治研究

在山东省枣庄市和新泰市等地,马铃薯青枯病,一年有两次发病高峰,春季在5月23日～6月8日,秋季在9月20日～10月8日;病害发生与温度和降水密切相关;连作发病甚重;品种间抗病性差异较显著,以红芽眼、临选一号等高度感病,753、克新一号、798-24、克新四号等抗病性较强。室内药效测定以卞那霉素抑菌效果较好,庆大霉素、四环素和福美双防治效果较好。     

四川省细菌性青枯病病原菌菌系及分布研究

从四川省的7种作物上分离得到了154个细菌性青枯病Pseudomonas solanacearum病原菌。各个分离菌在形态、染色、培养性状、生理生化反应等方面的特性都相似。比较研究了不同地区、作物上的49个代表菌株。根据Haywagd和Buddenhagen的分类标准,四川省细菌性青枯病以生化型Ⅲ为主,病原菌的优势小种为生理小种1号。     

籼稻衍生抗源抗白叶枯病的遗传

本试验研究了DV85和DZ78的8个衍生抗源对水稻白叶枯病的抗性及其遗传。结果表明,衍生抗源抗性稳定;其中,21610受2对显性基因互补作用控制,2162、21637、21640、21642受1对隐性和1对显性基因控制,并存在显性上位效应,21621、21622、21625受1对显性基因控制。遗传背境对抗性基因的表达有明显的影响。     

鲢细菌性败血症病原的研究

从患细菌性败血症的鲢肝脏中分离到一菌株，编号青１－２－３。通过代感染试验，发病症状与自然病鱼基本一致，对致病菌株进行细菌学鉴定为嗜水气单胞菌。青１－２－３的生化表型不同于银鲫病原，为致病性嗜水气单胞菌的不同菌株。     

鲢细菌性败血症病原的研究

从患细菌性败血症的鲢肝脏中分离到一菌株，编号青１－２－３。通过代感染试验，发病症状与自然病鱼基本一致，对致病菌株进行细菌学鉴定为嗜水气单胞菌。青１－２－３的生化表型不同于银鲫病原，为致病性嗜水气单胞菌的不同菌株。     

翘嘴鳜细菌性败血症的免疫预防研究

从患细菌性败血症的翘嘴鳜分离嗜水气单胞菌ＢＳ－１菌株，制成福尔马林灭活疫苗（Ｆ－ＡＨ）、酚灭活疫苗（Ｐ－ＡＨ）和提取菌体脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原。注射接种体重为３５．５±５．６ｇ的翘嘴鳜后，通过检测血清中的凝集抗体效价、血液和头肾中吞噬细胞的吞噬活性以及应用活菌攻毒等方法，比较了３种不同免疫原的免疫效果。结果表明，ＬＰＳ的免疫效果最好，Ｐ－ＡＨ次之，Ｆ－ＡＨ较差。用活菌攻毒后，３种受免鱼体的免疫保护力分别为９２．２％，８４．７％和８０．７％。