羊伪结核棒状杆菌的药敏试验

用纸片法测试了９株羊伪结核棒状杆菌对利福平、异菸肼、对氨基水扬酸钠及黄连等４０种中草药的敏感性。结果，供试菌均对利福平和黄连高度敏感；对黄芩和黄柏中度敏感；而对其余的３７种中草药及异菸肼和对氨基水扬酸钠均不敏感。     

结核病流行现状与研究进展

一．结核病防治研究的历史背景 1882年Koch发现结核杆菌,1921年Calmette和Guefin研制出卡介苗,1944年Waksnmn发现了链霉素,1959年印度马德拉斯化疗中心首次证明了不住院治疗的有效性和安全性,1966年意大利和瑞士共同研制成功高效抗结核药物——利福平,为短程治疗提供了有效手段,1971年W．Fox等应用异菸肼和利福平为主的联合短程化学疗法。     

结核病流行现状与研究进展

一．结核病防治研究的历史背景 1882年Koch发现结核杆菌,1921年Calmette和Guefin研制出卡介苗,1944年Waksnmn发现了链霉素,1959年印度马德拉斯化疗中心首次证明了不住院治疗的有效性和安全性,1966年意大利和瑞士共同研制成功高效抗结核药物——利福平,为短程治疗提供了有效手段,1971年W．Fox等应用异菸肼和利福平为主的联合短程化学疗法。     

单味中草药对罗非鱼维氏气单胞菌的体外抑菌试验

为了研究了20种单味中草药对罗非鱼维氏气单胞菌的体外抑菌情况,试验采用琼脂扩散法和试管二倍稀释法测定抑菌圈大小及最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:罗非鱼维氏气单胞菌对五味子、五倍子、黄连等5种药物极度敏感,对黄柏、苏木、石榴皮等5种药物高度敏感,对薄荷、公丁香、鱼腥草等5种药物中度敏感;其中黄连、乌梅、沙棘等5种药物对罗非鱼维氏气单胞菌有较好的抑菌效果,MIC在15.63~62.50 mg/mL之间;黄柏、白头翁、石榴皮3种药物的MIC均为125 mg/mL;苏木、黄芩、薄荷3种药物的MIC均为250 mg/mL;公丁香、鱼腥草、夏枯草等5种药物对该菌抑菌效果比较差,MIC均为500 mg/mL。说明五味子、五倍子、黄连等5种中草药可用来防治罗非鱼维氏气单胞菌。     

六味中草药对奶牛乳房炎四种病原菌的体外抑菌试验

为了研究金银花、蒲公英、鱼腥草、板蓝根、黄连、连翘对奶牛乳房炎病原菌的抑制效果,试验采用纸片扩散法进行了体外抑菌试验;同时按照奶牛的标准体重与中草药的参考给药量,制成浓度为1∶700,3∶700,9∶700的药敏片,和原液10倍浓度稀释药敏片进行最小抑菌浓度(MIC)的测定。结果表明:溶酪葡萄球菌对鱼腥草、黄连、连翘、金银花敏感;缓慢葡萄球菌对蒲公英、鱼腥草、黄连、连翘、金银花敏感;乳房葡萄球菌对蒲公英、黄连、连翘、金银花敏感;少酸葡萄球菌对黄连、鱼腥草、连翘高敏;板蓝根对本试验中的四种病原菌均未产生抑菌效应。说明金银花、蒲公英、鱼腥草、黄连、连翘五种中草药可作为预防和治疗奶牛乳房炎药物继续进行研究。     

单味中草药提取物对猪源沙门氏菌的抑菌效果

本试验旨在探讨黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药对猪源沙门氏菌的抑菌效果。试验制备黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药提取物后,采用牛津杯法测定五种中草药提取物对猪霍乱沙门氏菌的抑菌作用,并采用梯度稀释法测定其最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),观察其对沙门氏菌的体外抑制作用。结果表明,空白对照组无抑菌圈,阳性对照组抑菌圈直径为(20.13±1.47)mm;与对照组相比,苦参、黄芪组抑菌作用差异显著(P>0.05),敏感程度均为高敏;黄连、黄柏、甘草组的差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),敏感程度为高敏或中低敏;黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药的MIC浓度分别为20g/L、10g/L、80g/L、20g/L、160g/L。试验显示,黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药均可一定程度地抑制猪源沙门氏菌,苦参抑制作用最强,与抗生素效果一致,其次分别为黄芪、黄连、黄柏、甘草。     

几种抗菌中草药体外抗菌效果比较

本试验旨在了解单味中草药及复方中草药对于大肠杆菌的抗菌效果,从而在临床上更有效地使用中草药治疗大肠杆菌病。试验选用了5种单味中草药(板蓝根、黄柏、忍冬花、蒲公英、黄连)和1种复方中草药制剂(板青败毒口服液),选择一定浓度的大肠杆菌菌液在培养基上培养形成菌落,分别采用5种单味中药制剂、1种复方中药制剂、5种单味中草药液混合以及5种单味中草药混合液和板青败毒口服液的联合使用来做抑菌试验,试验结果显示,板蓝根、忍冬花、蒲公英、黄连、黄柏、硫酸庆大霉素注射液、板青败毒口服液、5种单味中草药混合以及5种中草药与复方制剂混合液的抑菌圈直径分别为21 mm、15 mm、16 mm、20 mm、14 mm、9 mm、28 mm、26 mm和30 mm。根据判定标准得出结论:板蓝根、黄连、板青败毒口服液、5种单位中草药混合以及中草药与复方制剂混合液对大肠杆菌为极度敏感;忍冬、蒲公英和黄柏为低度敏感。培养基扩散法得5种单味中草药、1种复方中草药制剂和抗生素对大肠杆菌抑菌效果,由强到弱依次为5种中草药与板青败毒口服液混合液>板青败毒口服液>5种单味中草药混合液>板蓝根>黄连>蒲公英>忍冬花>黄柏>硫酸庆大霉素注射液。     

8种中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验

为了寻找抗生素的替代品,试验采用琼脂平板打孔法、牛津杯法和试管两倍稀释法检测了黄芩、黄连、黄柏、鱼腥草、穿心莲、五味子、连翘、艾草8种中草药对大肠杆菌的抑制作用。结果表明:黄连、鱼腥草、五味子、艾草对大肠杆菌的抑菌效果为高度敏感,五味子和艾草的最小抑菌浓度(MIC)为62.5 mg/m L,黄连和鱼腥草的MIC为125 mg/m L,大肠杆菌对其他4种中草药均不敏感。说明部分中草药对大肠杆菌具有一定的抗菌作用。     

15味中药对猪致病性大肠艾希氏杆菌的体外抑菌试验

采用常规中药敏感试验打孔法,用15味中药及所组方剂对2种不同血清型的致病性猪大肠艾希氏杆菌进行体外抑菌试验。结果 O_8血清型菌株对丹皮呈高度敏感;O_8血清型和 O_(141)血清型对黄芩、连翘、五味子、地榆呈中度敏感;丹皮、诃子、藿香和黄连分别对 O_(141)血清型和O_8血清型均有中度抑制作用;诃子、藿香、肉桂和黄连分别对 O_8血清型和 O_(141)血清型有轻度抑制作用;而板蓝根、当归、赤芍、甘草、木通、桂枝等6味中草药和方剂均无抑菌作用。     

4种清热解毒复方中草药体外抑菌及抗PRRSV活性研究

【目的】 探索泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散4种清热解毒复方中草药体外抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的效果, 为临床应用提供参考。【方法】 采用传统水煎法对4种复方中草药进行提取, 通过二倍稀释法测定中药对大肠杆菌标准菌ATCC 259222和金黄色葡萄球菌标准菌ATCC 25923的体外抑菌活性; 在测定复方中草药对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上, 通过实时荧光定量PCR鉴定复方中草药对PRRSV的抑制作用。【结果】 泻心汤对大肠杆菌的体外抑菌活性最好, 其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)均为7.81 mg/mL; 三黄虎杖汤和黄连解毒汤次之, 其MIC和MBC为31.25~125 mg/mL; 清瘟败毒散抑制大肠杆菌效果较差: MIC和MBC均>250 mg/mL, 而金黄色葡萄球菌对泻心汤、黄连解毒汤和三黄虎杖汤非常敏感, 其MIC和MBC为0.24~0.98 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中, 泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散对Marc-145细胞最大安全浓度分别为0.49、0.49、3.90和1.95 mg/mL。4种复方中草药对PRRSV的抑制与直接灭活作用较好, 黄连解毒汤和清瘟败毒散均在0.98 mg/mL时对PRRSV有阻断作用, 泻心汤和三黄虎杖汤在0.24和0.12 mg/mL时对PRRSV有阻断效果。【结论】 4种复方中草药中泻心汤的体外抑菌及抗PRRSV的效果最好, 其次是三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散, 4种清热解毒复方均有一定的抑菌和抗病毒活性, 可以为临床应用提供参考依据。     

6种中草药对禽源沙门菌的体外抑菌试验

为了研究中草药对3种不同血清型禽源沙门菌的体外抑菌效果,采用水煎法制备黄连、黄柏、白头翁、金银花、女贞子、乌梅6种单味中草药水提液,然后进行药物敏感性试验,并进一步测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,鼠伤寒沙门菌LLCL-8株对黄连、金银花和白头翁较为敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(83.33±29.46) mg/mL、(125.00±0) mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL、250.00 mg/mL、大于500.00 mg/mL;鸡白痢沙门菌LLC-51株对黄连敏感,MIC为(31.25±0) mg/mL,MBC为125.00 mg/mL;肠炎沙门菌S株对黄连、白头翁敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(104.16±29.46) mg/mL,MBC均为250.00 mg/mL。说明黄连对3种血清型禽源沙门菌具有广谱抑菌作用,且抑菌效果相对明显;白头翁、金银花对某些血清型菌株具有较好的抑菌效果。     

单一中草药以及复方中草药体外抑菌效果研究

试验旨在探究单一中草药、多种中草药组方对猪肠道大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,筛选效果较好的单一中草药以及中草药组方。试验选用黄芪、何首乌、黄连、金银花、大黄、白头翁、五倍子、葛根等八种中草药的提取液,采用双层琼脂扩散法和微量二倍稀释法,测定其对3种育肥猪常见的有害肠道菌株抑菌圈的大小和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:(1)猪大肠杆菌对黄连、金银花和五倍子呈高度敏感,抑菌圈直径分别为24.54、20.13、20.13 mm,其MIC值分别为31.25、125、125 mg/ml。(2)金黄色葡萄球菌对黄芪、黄连和大黄呈低度敏感,抑菌圈直径分别为14.07、12.57、14.4 mm,其MIC值分别为250、125、125 mg/ml。(3)沙门氏菌对黄芪呈低度敏感,MIC值为250 mg/ml,黄连和大黄对沙门氏菌呈中度敏感,MIC值均为62.5 mg/ml。(4)黄芪和何首乌提取液混合试验,以黄芪0.75 mg/ml,何首乌0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈中度敏感,抑菌圈直径为16.1 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为11 mm;对沙门氏菌呈不敏感,抑菌圈直径为9.8 mm。(5)黄芪、黄连和大黄三种提取液混合试验,以黄芪0.25 mg/ml,黄连0.5 mg/ml,大黄0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.4 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.2 mm;对沙门氏菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.9 mm。综上所述,单一添加黄芪、黄连和大黄三种中草药对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果较好。以黄芪,黄连和大黄三种中草药复配的组方对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果最好。     

45种药物对鸡关节源性金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果

以扩散法和平板打孔法分别检测了 2 1种抗菌药敏纸片和 2 4种中草药煎剂对临床分离的 1株鸡关节源性金黄色葡萄球菌菌株的抑菌效果。结果发现 ,在药敏纸片中 ,供试菌株对头孢氨苄极敏 ,对强力霉素、痢特灵、青霉素、壮观霉素、氯霉素、恩诺沙星、林可霉素、丁胺卡那霉素 8种抗菌药物高敏 ,对其他 12种药物中低度敏感或耐药。在中草药煎剂中 ,供试菌株对黄连、黄芩、大青叶 3种中草药煎剂极敏 ,其中对浓度在 0 .2 5g/mL及以上的黄连溶液都表现为极敏 ,对艾叶、连翘、黄柏、夏枯草、紫草 5种中草药煎剂表现为高敏 ,对其它 16种中草药煎剂表现为中低度敏感或耐药     

15种中草药对化脓隐秘杆菌的药敏试验及神经氨酸酶活性的影响

为了测定不同中草药对化脓隐秘杆菌分离株的药敏试验及神经氨酸酶活性的影响,试验采用煎煮法提取连翘、金银花、穿心莲、蒲公英、苍术、红花、黄连、虎杖、黄芩、蛇莓、乌梅、大青叶、杜仲、大黄和贯众等15种中草药的有效成分,测定其对化脓隐秘杆菌分离株的最低抑菌浓度(MIC),同时以2’-(4-methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminic acid(MUNANA)为底物测定不同中草药提取液在亚抑菌浓度下对化脓隐秘杆菌神经氨酸酶活性的影响。结果表明:连翘、蒲公英、黄连、黄芩、乌梅、大黄具有良好的抗化脓隐秘杆菌活性,其中黄连作用效果最好,对4株化脓隐秘杆菌的MIC值均为0.25 mg/mL;连翘、蒲公英、黄芩、乌梅和大黄对4株化脓隐秘杆菌的MIC值在1.95~31.25 mg/mL之间;对苯唑西林耐药的化脓隐秘杆菌分离株对上述6种中草药依然敏感;另外,红花和大黄两种中草药以亚抑菌浓度作用化脓隐秘杆菌后,其神经氨酸酶活性集中在30~50个荧光单位之间;连翘、黄连、乌梅和贯众等中草药作用化脓隐秘杆菌后,其神经氨酸酶活性集中在50~100个荧光单位之间。说明连翘、蒲公英、黄连、黄芩、乌梅、大黄对化脓隐秘杆菌分离株具有显著抑制作用。     

15种中药对猪大肠杆菌的体外抑菌试验

为了探讨黄连等15种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,试验采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法应用15种中草药水提取物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连、大黄均对大肠杆菌O101呈高度敏感,抑菌圈直径分别为20.8,20.3 mm,其MIC值为7.813 mg/m L,抑菌效果最好;黄芩、黄柏、金银花呈中度敏感,其MIC值为31.25 mg/m L;而苦参、马齿苋、败酱草等不敏感,其MIC值为500 mg/m L,抑菌效果差。     

38种中草药对半滑舌鳎源哈维氏弧菌的抑杀效果比较分析

为明确中草药对半滑舌鳎源哈维氏弧菌(Vibrio harveryi)的抑杀效果,选择38种常用中草药,采用牛津杯打孔法测定了中草药对半滑舌鳎源哈维氏弧菌的敏感性。结果哈维氏弧菌对五倍子、诃子和黄连等9种中草药高度敏感,其抑菌圈直径为22～27 mm;对大黄、虎杖和秦皮等10种中草药敏感,其抑菌圈直径为12～19 mm;对其他中草药无抑菌作用。同时,采用微量二倍稀释法和液体涂布法测定了上述19种中草药对哈维氏弧菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:上述中草药对哈维氏弧菌均具有抑杀作用,其MIC和MBC分别为1.5～50 mg/mL和3.1～100 mg/mL,其中以五倍子的抑杀效果最好,对哈维氏弧菌的MIC为1.5 mg/mL,MBC为3.1 mg/mL。     

12种中药对沙门菌的体外抑菌效果

考察12种中药对沙门菌的体外抑菌作用。采用水煎法制备中草药水提液,分别通过平板打孔法、二倍稀释法和平板接种法对沙门菌进行体外抑菌试验,测定中药的敏感性及最小抑菌浓度。结果表明,在12种中药中,沙门菌对乌梅、黄连、女贞子、丁香呈高度敏感,对栀子、木香、金樱子、龙胆草呈中度敏感,对贯众、薏苡仁、鹿衔草、知母不敏感。乌梅、黄连、女贞子对沙门菌抑制作用较好,最小抑菌浓度分别为15.6 mg/mL、31.25 mg/mL、62.50 mg/mL;栀子、丁香和金樱子抑菌效果次之,最小抑菌浓度为250 mg/mL;木香、知母和龙胆草抑菌效果较弱,最小抑菌浓度均为500 mg/mL。从12种中药对沙门菌的体外抑菌效果来看,在临床上可用乌梅、黄连、女贞子治疗猪源沙门菌感染。     

8味中草药水提物对马红球菌的体外抑菌和杀菌效果研究

[目的] 筛选对马红球菌（Rhodococcus equi,R. equi）具有抑菌和杀菌效果的中草药。[方法] 选择黄连、黄芩、大青叶、鱼腥草、黄柏、连翘、金银花及板蓝根共8味中草药制备单味水提物,采用微量肉汤稀释法及平板涂布法测定中草药水提物对R. equi参考菌株103S及临床分离株的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。[结果] 不同中草药水提物对R. equi的抑菌及杀菌效果不同,其中,黄连、黄柏和连翘单独用药杀菌及抑菌效果显著（P<0.05）强于其他中草药水提物;黄连、黄柏和连翘不同组合联合用药对R. equi的抑菌及杀菌效果均优于单独用药,其中,“黄连+连翘”联用后药效呈相加作用。[结论] 黄连等中草药对R. equi表现出抑菌及杀菌效果,且联合用药效果优于单独用药,提示这些中草药制剂有望作为抗R. equi乃至其他耐药病原微生物感染的有效治疗药物。     

中草药提取物对兔源性致病菌抑制作用试验

为了研究中草药提取物对家兔临床致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性。采用醇提法和水提法提取其有效成分,通过管碟法和试管二倍稀释法测定中草药的抑菌效果。结果表明,石榴皮提取物对大肠埃希菌极度敏感;黄连、厚朴提取物对大肠埃希菌高度敏感;抑菌圈直径在15.0mm^20.5mm,最小抑菌浓度在15.6~31.3mg/mL,石榴皮、黄连提取物对金黄色葡萄球菌高度敏感;抑菌圈直径在16.0mm^19.5mm,最小抑菌浓度分别为15.6、7.8mg/mL,本研究为家兔致病菌的中药防治提供了理论基础。     

单味中草药对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌试验

为了分析20种单味中草药对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌效果,为进一步研发防治猪源沙门氏杆菌复方中草药制剂提供基础,试验利用水提法提取20种单味中草药有效成分,并调整中草药药液浓度为1 g/mL,利用牛津杯法测定20种单味中草药体外抑菌圈直径,并对有抑菌效果的中药用试管二倍稀释法-平板法测定最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:猪源沙门氏杆菌对诃子、苦参、黄连、白头翁、沙棘、酱败草、锦灯笼等7种药物高度敏感,对连翘、金银花、五味子、五倍子、乌梅等5种药物中度敏感,对其他药物不敏感。