鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗生产工艺改进试验

优化鸡胚成纤维细胞(CEF)培养鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗的生产工艺中,采用同步接毒法即在制备鸡胚成纤维细胞时同时接毒和异步接毒法即鸡胚成纤维细胞形成单层以后接毒,两种方法进行对比.结果以同步接毒法可以降低生产成本,缩短细胞培养的时间,简化工艺.     

一种新的鸡痘鹌鹑化弱毒疫苗生产工艺改进试验--绒毛尿囊膜渗透法

采用一种新的鸡胚绒毛尿囊膜接种方法,即绒毛尿囊膜渗透法来制备鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗.此法不必做人工气室,减少了鸡胚早死率及人为污染率,减化了生产工艺并使鸡胚利用率大大提高.     

混合型鸡痘弱毒疫苗的生产

将每瓶疫苗中所加入的绒毛尿囊膜减少１／２以上,另一部分含量则以尿囊液来补充,以此配成混合型鸡痘组织苗。经实验室和现地试验应用表明,该苗与单纯绒毛尿囊膜组织苗的免疫效果一样。     

鸡痘鹌鹑化弱毒在犊牛睾丸细胞上的适应性试验

鸡痘鹌鹑化弱毒不仅能够在鸡胚成纤维细胞上复制,而且经过试验也可以在犊牛睾丸细胞(以下简称BTC)上复制。本试验结果表明：鸡痘鹌鹑化弱毒在BTC上培养传代至第6代后,细胞产毒效价达10^-55EID50／0．2mL左右,达到了《兽用生物制品规程》的制苗标准。这为试验用BTC代替SPF鸡胚生产鸡痘活疫苗提供了重要依据。     

采用胚胎或胚胎加适量胚绒毛尿囊膜生产鸡痘鹌鹑化弱毒苗的初步…

经鸡胚绒毛囊膜或尿囊腔接种鸡痘种毒后，无菌采集正常死亡和接后１２０小时存活的有病变的鸡胚胎和ＣＡＭ。单独采用上述经无菌检验阴性的鸡胚胎或胚胎加适量ＣＡＭ制备成冻干菌，经安检，效检测和无菌检验证明，该苗符合所要求的标准。     

鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗病毒释放工艺探索

在鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗生产中，一般将收获的细胞培养物反复冻融释放细胞结合病毒，然后进行配苗冻干，为了确定合适的冻融次数和测定冻融对病毒的影响，我们以超声波裂解的细胞毒液为对照，通过对不同处理方法的原苗冻干前后毒价的多重比较，发现冻融对鸡痘病毒影响较大，因此试验确立了新的释放病毒方法（即超声波裂解法），现总结如下。     

鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗生产工艺的优化及改进试验

《中华人民共和国兽用生物制品规程》规定,在生产鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗时,采用鸡胚尿囊腔接种和人工气室绒毛尿囊膜接种工艺生产成品。由于人工气室绒毛尿囊膜接种早死胚多,而且工艺比较繁琐,所以我国大多数生产企业在生产中多采用尿囊腔接种方法,但尿囊腔接种后病毒繁殖时间要比人工气室绒毛尿囊膜接种后延长1~2 d,增加了孵化成本,而且绒毛尿囊膜病变(增厚、水肿等)也不如人工气室绒毛尿囊膜接种后产生的病变严重(膜重)。为此,借鉴了鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗的新生产工艺———鸡胚绒毛尿囊膜渗透法[1],并将此方法用于鸡传染性喉气管炎…     

鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗生产工艺的改进

在鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗生产中,通过改用尿囊腔接种种毒,减少鸡胚绒毛尿囊（ＣＡＭ）的含量,加入适量尿囊液,制备了鸡传染性喉气管炎混合型弱毒疫苗。这一改进简化了生产工艺,可使生产成本大幅度下降;用此法生产３批共１３５０万羽份疫苗,经在山东、河南、辽宁、黑龙江等省应用,其免疫效果与单纯性ＣＡＭ弱毒疫苗一样。     

鸡痘鹌鹑化弱毒株种子批的建立及鉴定

为保证制苗所用毒种质量和稳定性,在对鸡痘鹌鹑化弱毒株病毒含量、病毒纯净性、特异性、免疫原性及安全性等研究的基础上,建立了鸡痘鹌鹑化弱毒株种子批。将鸡痘鹌鹑化弱毒F278 E1(1966年6月3日冻干)通过鹌鹑连续传至4代(F282 E1)后,再经鸡胚传至14代(F282 E14)。传代毒种的鉴定结果表明：抽检的各代次的毒种均无细菌、支原体、外源病毒污染,且病毒含量检测稳定,均≥10_6.2EID₅₀/0.2ml。将抽检的各代次的毒种制成活疫苗,免疫适龄鸡只后均能产生完全保护。因此,确定鸡痘鹌鹑化弱毒株基础种子代数为F282 E2～E6代,生产用毒种继代应不超过3代。种子批的建立,为鸡痘鹌鹑化弱毒株疫苗的生产奠定了基础。     

鸡传染性法氏囊炎活疫苗(B87株)生产工艺的改进--鸡胚绒毛尿囊膜渗透接种法应用试验

采用绒毛尿囊膜渗透法给鸡胚接种病毒,收获感染的胎儿及绒毛尿囊膜,制备鸡传染性法氏囊炎（B87株）活疫苗,相比于传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法和尿囊腔接种法,可降低鸡胚早死率且无存活鸡胚,提高了鸡胚利用率,降低了生产成本.     

仔猪副伤寒活疫苗半合成培养基的配方筛选试验

研制了一种适用于仔猪副伤寒活疫苗生产的半合成培养基，解决了培养基质量不稳定的问题。选用几种营养成分配比，制成半合成培养基进行细菌培养并冻干，结果冻前菌数超过普通肉汤培养基，冻干存活率略低于普通肉汤培养基，安全性检验合格，证明该培养基替代现用培养基生产疫苗是可行的。     

用反应缸灭活法制造山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗的工艺探讨

用反应缸灭活法制造山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗2.04×106mL,各项指标均达到《规程》要求,制成的产品更具有均一性,取得了良好的效果,使得在生产过程中大大降低了劳动强度,减少了污染机会,为大批量生产奠定了基础.     

科尔沁西部碱化草甸草地改良配套技术试验研究

对科尔沁西部典型重度碱化草地进行了改良试验研究,采用的方法包括翻耙补播沙打旺Astragalus adsurgens、施N肥、施土壤改良剂(石膏).经过3年改良试验,结果表明,这些技术的有机结合可以显著地提高碱化草甸草地牧草的产量和质量,土壤理化性质明显改善:翻耙补播沙打旺增加草地产量2.18～3.52倍;土壤容重、pH值、含盐量下降;土壤水分状况、孔隙度、有机C、全N、速效N、速效P等均明显增加;在翻耙补播的基础上施用(NH4)2SO4 75～225 kg/hm2和CaSO4 1 500～4 500 kg/hm2,牧草产量可分别提高4.5%～20.2%和17.4%～49.9%.     

培养基不同制造工艺对细菌培养效果的影响

用传统工艺和改进工艺制备培养基,进行大肠杆菌的培养,比较不同制备工艺对细菌培养效果。结果：在其他培养条件相同情况下,用传统工艺制备培养基培养三批大肠杆菌,其活菌数分别是4.6×10^5、5.2×10^5、3.9×10^5;平均4.57×10^5。用改进工艺制备培养基培养三批大肠杆菌,其活菌数分别是8.2×10^5、8.6×10^5、8.0×10^5;平均8.27×10^5。后者比前者增加活菌数3.7×10^5。     

鸡痘病毒诱发细胞融合现象的观察

鸡痘病毒在鸡胚绒毛作囊膜及鸡胚成纤维细胞上交替传代后，用本试验提供的条件，可以明显诱发鸡胚成纤维细胞的融合，形成多量多核细胞。经鸡胚及实验鸡回归试验证实，这种细胞融合现象确系鸡痘病毒所为。     

鸡痘耐热保护剂活疫苗的研究

选择不同基质组成保护剂与鸡痘抗原进行冻干试验，试制一种适宜鸡痘弱毒株的耐热冻干保护剂。应用耐热冻干保护剂和专用的冻干曲线，制成鸡痘耐热保护剂活疫苗，经37℃保存10d的耐老化试验，每羽份病毒含量下降0．2—0．4个滴度；疫苗在2—8℃保存24个月后，每羽份病毒含量下降0．2-0．4个滴度，且均≥10^3.0EID50／羽，具有良好的热稳定性。19万羽的田间试验证明，鸡痘耐热保护剂活疫苗安全、有效。     

A new freeze-dried living virus vaccine against sheep-pox

A sheep-pox virus strain has been adapted and multiplied in primary lamb kidney cell cultures. The main characteristics of the strain have been verified in vitro after clones were isolated, and the results confirmed its identity. The safety and the potency of the strain have been investigated in sheep.

The inoculation of the strain to sheep was followed by a post-vaccinal reaction materialised by a nodule at the site of inoculation and an increase of temperature by about 1°C. No reactions adversely affecting pregnancy have been noted. Immunisation was demonstrated by an increase in the level of neutralising serous antibodies and protection against the pathogenic virus. The immunity tended to decrease during the second year after primovaccination and a yearly booster vaccination appeared to be necessary. Primovaccination of lambs over 2 months of age produced a better immunity, especially when the lambs were born from vaccinated ewes.

This strain forms the active principle of a freeze-dried vaccine containing no adjuvant of the immunity.     

应用新技术提高规模化猪场猪群健康水平

疫病复杂而难以防治是当前影响规模化猪场生猪生产发展的大问题。采用常规的饲养管理和药物防治也难以完全奏效。有条件的猪场采用新的技术,如人工授精、全进全出、早期隔离断奶、多点隔离饲养、母猪分胎次饲养、无特定病原猪培育技术等,都能较好地阻断疫病传染链,达到控制、净化疫病,提高猪群健康的目的。