昆虫线虫抑制植物线虫的机理研究进展

斯氏科(Steinernematidae)、异小杆科(Heterorhabditidae)、索科(Mermithidae)和小杆科(Rhabditidae)线虫为几类较有生物防治前景的昆虫线虫。一些昆虫线虫除了能够有效地防治有害昆虫,还具有抑制植物线虫的作用,本课题组研究发现小杆科、小杆属Rhabditis(Oscheius)的某些昆虫线虫品系也有抑制植物线虫的作用。国内在这方面报道很少,国外许多线虫研究者自20世纪80年代以来有过一些研究。本文着重报道昆虫线虫抑制植物线虫的作用机理研究进展、植物线虫的生物防治途径和昆虫线虫的应用范围。     

不同品系昆虫病原线虫抗逆性分析

昆虫病原线虫作为一种高效的生物防治因子,具有广泛的应用前景.但昆虫病原线虫的生物活性受自然环境影响较大,筛选抗逆优良品系对于更好地推广和应用昆虫病原线虫具有十分重要的意义.为了评价昆虫病原线虫的抗逆性差异及生防潜力,在室内条件下测试了17个采自不同地区的昆虫病原线虫品系对高温、低温及干燥环境的抗性.结果显示:Stein...     

昆虫病原线虫的应用近况

昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematodes)是害虫的天敌,是害虫生物防治中的一个重要因子。它的研究应用从30年代发现距今已有50多年的历史,其中携带共生细菌的斯氏线虫属Steinernema Travassos和异小杆线虫属Heterorhabditis Poinar是在害虫生物防治中最有潜力的类群。各国科学家已发表了不少线虫的生物学、生态学、大量繁殖方法和防治效果的研究报告。利用昆虫病原线虫防治害虫有以下优点:①线虫的寄主范围广,可以利用线虫防治多种害虫;②可以人工培养基大量繁殖线虫;③线虫可以主动地寻找寄主,对土栖和隐蔽的钻蛀害虫效果高;④线虫体内带有共生细菌,具高的杀虫能力,能在16至48小时内杀死寄主昆虫;⑤线虫对环境安全,有一定的抵抗力,可与一些杀虫剂混用。本文拟就日前线虫的生产、应用,影响线虫效用的因素和线虫应用的前景浅淡。     

昆虫病原线虫应用的生态学问题

昆虫病原线虫寄主广泛,仅slinernema feltiae DD—136品系,寄主就超过一千多种,不但能有效地防治农作物的许多害虫,对于一些用化学药剂难以除去的钻蛀性害虫以及土壤害虫,也有一定的防治效果。近年来,由于人工廉价培养基的突破,可以大量培养昆虫病原线虫,使生产商品化,为大面积的田间应用提供了基础,因此昆虫病原线虫其有很广泛的应用前景。昆虫病原线虫的田间应用面临的主要问题是能否在相当长的时间内保持一定的密度     

对铜绿丽金龟具有高致病力的昆虫病原线虫的筛选

为筛选对铜绿丽金龟Anomala corpulenta幼虫具有生防潜力的昆虫病原线虫品系, 测定了9个昆虫病原线虫品系对铜绿丽金龟1 龄幼虫的致病力, 以及不同施用剂量、环境温度及土壤相对湿度条件对线虫致病力的影响。生测结果表明, 樱桃异小杆线虫品系Heterorhabditis beicherriana D26-6对铜绿丽金龟幼虫致病力最高, 处理11 d后的校正死亡率达到了98.3%;对线虫D26-6致病力的单因子测定发现, 侵染铜绿丽金龟幼虫的最佳剂量为150 IJs/头、最佳温度范围为20~30℃、最佳土壤湿度为18%, 有较好的开发应用潜力。     

海南槟榔园昆虫病原线虫对红脉穗螟的致病力

红脉穗螟Tirathaba rufivena Walker是槟榔上的重要害虫。本研究采用大蜡螟诱捕法,对海南省主要槟榔产区槟榔园中采集到的土样进行昆虫病原线虫的诱捕,并评估了目标线虫对红脉穗螟的致病力。在采集的150份土样中共有12个土样经检测发现含有昆虫病原线虫,检出率为8%。其中,屯昌、定安和万宁三个市县采集的土样中检出的带线虫比率相对较高,分别为12.90%、11.76%和10.00%,而海口和保亭土样中未检出昆虫病原线虫。在室内以大蜡螟为试虫测试线虫的致病力,结果表明诱捕的12个线虫种群均对大蜡螟幼虫具有一定的致病力,但致病力的大小存在较大差异（120 h校正死亡率21.11%～72.22%）。选取致病力较高的Tc05、Wn01和Wn09样本测试对红脉穗螟3龄幼虫的致病作用,结果显示在600 IJs/mL线虫液处理后24 h,Wn01种群对寄主的校正死亡率达到86.67%,半致死浓度LC₅₀为283.70 IJs/mL;Tc05和Wn09对红脉穗螟的致病力相近,校正死亡率分别为61.67%和65.00%,LC₅₀分别为504.75 IJs/mL和502.70 IJs/mL。研究表明,Wn01,Tc05和Wn09线虫种群对红脉穗螟幼虫具有一定的控制潜力。     

昆虫病原线虫共生细菌嗜线虫致病杆菌All对小菜蛾拒食作用物性质的初步研究

采用叶碟法测定了36个昆虫病原线虫共生细菌菌株对小菜蛾Plutella xylostella二龄幼虫的拒食作用,其中10个菌株对小菜蛾幼虫的选择性和非选择性拒食率高于75%。以嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophilus All菌株为代表,研究了对小菜蛾有拒食作用的物质与细菌生长过程、型变、pH值、温度、有机溶剂之间的关系。结果表明：拒食物质产生于细菌的对数增长期和稳定期,在稳定期最高,拒食率达85%左右;次生型菌液未能分泌足够的拒食物质,其拒食率在20%以下。在-80℃-100℃的范围内,其拒食率均在81%以上。pH3-11范围内,对拒食物质稳定性有一定影响,选择性拒食率变化不大,均在96%以上;非选择性拒食率变化明显,pH值为3、5、7、11时,非选择性拒食率下降至23.1%-34.9%。拒食物质可与氯仿、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、乙醇相溶,其提取液对小菜蛾拒食率均在80%以上。     

昆虫病原线虫对甘薯蚁象的致病力测定

昆虫病原线虫是隐蔽性害虫的有效生物防治因子,对8种斯氏线虫和3种异小杆线虫进行筛选证实夜蛾斯氏线虫Steinernema feltiae对甘薯蚁象Cylas formicarius的致病力最强;在此基础上进一步研究了11个不同地理来源的S.feltiae品系对甘薯蚁象末龄幼虫的致病力,获得强致病力的品系S.feltiae JY-17并测定了不同因素对该线虫品系致病力的影响。研究结果表明：在25℃条件下,甘薯蚁象不同发育阶段对S.feltiae JY-17的敏感性依次为末龄幼虫〉低龄幼虫〉蛹〉预蛹期〉成虫;在不同测试温度条件下,sfeltiae JY-17致病力由高到低顺序为25℃〉20℃〉30℃〉15℃〉10℃〉35℃;在25℃条件下,当寄主密度为196．6头·m^-2时,线虫对蚁象末龄幼虫的LD50=5．532条·头^-1,LD90=28．049条·头^-1;当线虫与寄主比例为5：1时,LT50=44．306h。本研究为利用昆虫病原线虫防治甘薯蚁象提供了理论依据。     

昆虫病原线虫斯氏线虫科的分类研究概况

斯氏线虫科(Steinernematidae)线虫的肠道具有共生细菌,侵染昆虫后能引起寄主昆虫的败血病,而迅速死亡,对人畜安全,是有应用前景的天敌类群,已经受到世界各国的重视,近十多年来,我国许多单位也先后开展了旨在应用于害虫生物防治和资源利用的研究,取得了很大的成绩,但由于线虫形态结构比较简单,过去描述的一些种类也因研究工具的限制,观察得不甚清楚,所以在过去一个时期出现分类上的混乱状态。尽管人们悉心注意,也难免存在一些错误,这在一定程度上影响着资源的发掘和有关应用性的研究。     

昆虫病原线虫应用研究概况

大规模工厂化离体培养技术的发展，活跃了昆虫病原线虫的实际应用研究。近20年来在生物防治实践和产业化方面已经取得了令人鼓舞的进展，已成为当前国际生防领域研究热点之一。我国在昆虫病原线虫的实际应用方面也进行了大量研究。本文从昆虫病原线虫对土栖性、钻蛀性和叶面害虫的防治效果，以及影响线虫应用的环境因子的分析，简要概述了昆虫病原线虫的应用进展，并探讨昆虫病原线虫进一步应用的前景。     

昆虫病原线虫rDNA多态性分析

本文对国内外昆虫病原线虫斯氏属和异小杆属的47个品系进行rDNA—ITS PCR—RFLP分析，研究其DNA多态性，并构建了分子系统发育树状图。各品系的ITS区无明显的长度差异，PCR—RFLP分析将47个品系分为斯氏属和异小杆属两大类，两属线虫又分别分为11组和4组。所得结果丰富了ITS PCR—RFLP图谱库，为弄清我国的昆虫病原线虫与国外种类的分子系统发育关系及未定名线虫的鉴定提供重要依据，同时为筛选适合的线虫种类防治害虫奠定基础。     

应用昆虫病原线虫防治杨木蠹蛾的研究

室内外试验结果表明,小卷蛾线虫Steinernema carpocapsae Agriotos对杨木囊蛾Cossus cossusL.的致病力较强,其毒力随着龄期的增大而下降。从每虫1000～5000条线虫接种中龄组的杨木蠢蛾幼虫,随着剂量增加致病力增强,并在25℃条件下毒杀效果最好。以每毫升5000条线虫的浓度防治林间杨木蠹蛾,防治效果优于敌敌畏。     

蔗扁蛾幼虫的生物防治

新害虫蔗扁蛾Opogona sacchari(Bojer)已给广东的花卉业造成了巨大损失,同时也对华南地区甘蔗和香蕉等重要经济作物的安全生产构成了严重威胁。为寻求防治良策,刘南欣等在室内进行了三个昆虫病原线虫品系感染蔗扁蛾幼虫的敏感性试验。此后,程桂芳、田世尧等也进行了利用昆虫病原线虫防治蔗扁蛾幼虫的研究,但其试验仅限于室内或少量寄主植物的处理。大面积条件下的情况则未见报道。鉴于此,作者进行了大面积条件下利用昆虫病原线虫防治蔗扁蛾幼虫的研究,结果如下。     

昆虫病原线由固体培养系统干粉培养基的优化

本文根据系统分析方法,利用二次正交旋转组合设计于固体培养系统中建立培养基组份对S.carpocapsae的A24品系和H.bacteriophora的H06品系的线虫产量影响的数学模型,然后对模型进行多项分析和优化。 根据营养配比适合、来源便利、质量稳定以及成本适宜的原则,选择黄豆粉、面粉、鸡蛋黄粉、猪油以及酵母膏作为线虫固体培养基组份。水份、酵母膏和鸡蛋黄粉对A24线虫产量产生显著的影响;水份、猪油对H06线虫产量产生显著影响。对A24和H06线虫来说,不同组份的重要性程度不同,表明根据不同的线虫种来筛选合适的培养基组份及其配比是极为必要的。在36个试验组合中,A24和H06线虫最高产量的组合分别获得每克培养基58×10~4和48×10~4条的感染期线虫。通过对两种线虫的培养基配比模型进行优化,得到了优化的培养基配方。为使优化配方更有广泛性,以频数分析方法进一步求得一定置信区间(95％)内各培养基组份的最佳配比范围。     

昆虫病原线虫的活体染色标记

在培养基中分别加入7种染色剂培养线虫,可以使各发育阶段的活线虫染色。用苏丹Ⅱ和苏丹Ⅲ染色的线虫,其肠道及脂肪体呈明显红色,易于辨认。经染色的线虫,其侵染寄主的能力和繁殖力都没有不良影响。染了色的侵染期线虫在进入寄主体前,能保持颜色不变。染色技术为观察和跟踪线虫的活动提供了方便。     

三种保存昆虫病原线虫共生菌的简易方法

在室温下，用１％ＮａＣｌ溶液、蒸馏水和液体石蜡保存４种２８株昆虫病原线虫的共生菌。结果，所有３种方法都能保持共生菌初生型活力达２年以上。在１０℃、２３℃恒温下，用１％ＮａＣｌ溶液保存的共生菌，保存期亦超过２年。在４℃下，用１％ＮａＣｌ溶液保存的共生菌半数以上可达６个月，而用蒸馏水和液体石蜡保存的共生菌大部分在６个月内即死亡。     

昆虫病原线虫和共生细菌培养系统中噬菌体的检测

本文利用紫外照射、温度、pH、盐度诱导五株溶源性共生菌株Xenorhabdus和Photorhabdus同时测定斯氏和异小杆属线虫Steinernema carpocapsae A24,S.carpacapsae ALL,S.feltiae English,S.feltiae SN,Heterorhabditis bacterophora H06在体外培养过程中是否存在感染共生细菌的噬菌体。结果未发现噬菌斑，说明实验菌株在实验诱导条件下以及昆虫病原线虫固体培养系统中不可能诱发噬菌体的危害。     

包含病原线虫的植物复合侵染病害

 包含病原线虫的植物复合侵染病害的研究已逾100年,对这种复合侵染病害的发现与验证是本世纪50年代至70年代间植物病理学的显著发展之一。植物病原学已从单一病原学发展至多重病原学。本文就重要的复合侵染病害及其病原的协同作用方式和协同作用机制等方面的研究进展作了评述。展望21世纪,相信我国植物病理学者将会越来越多地关注植物复合侵染病害问题,从而推动该领域的研究不断深入与发展。