一种机械分离马铃薯异核体改进的培养方法

把不同马铃薯双单倍体基因型间融合原生质体进行微滴的液体培养。如果这些融合了的原生质体,通过气相与其它活细胞接触,便能明显地看到它的分裂和持续的发育。影响这种效应的因子尚不清楚,然而在这种培养条件下,从马铃薯各种融合异核体中获得再生体细胞杂种的愈伤组织是可能的。     

二倍体马铃薯试管苗的培养及对叶肉原生质体融合的影响

以35份二倍体马铃薯试管苗为试验材料,对二倍体马铃薯试管苗培养的影响因素进行研究,目的是使试管苗的叶片增大,叶面积增加,并有利于进行叶肉原生质体的融合。结果表明:含有AgNO3的培养基(MS+0.5 mg/L NAA+1 mg/L AgNO3)适合22份供试二倍体马铃薯试管苗的培养;添加AgNO3比不添加AgNO3的试管苗的叶片明显增大,叶面积显著增加,添加2%蔗糖和2 mg/L AgNO3的培养基的试管苗叶面积最大;以二倍体野生种S.chacoense和二倍体材料DY4-5-10为亲本进行电融合,以添加2%蔗糖和1 mg/L AgNO3的培养基培养其试管苗,获得的融合产物可再生出完整植株,该培养基适合用于分离原生质体的二倍体马铃薯试管苗的培养。     

橡胶树原生质体培养研究进展

原生质体培养植株再生体系的建立,可为利用生物技术对橡胶树育种进行品种改良提供良好的受体系统.综述橡胶树原生质体培养的研究进展,并分析影响橡胶树原生质体再生的主要因素:(1)原生质体分离的起始材料;(2)原生质体的分离和纯化;(3)培养基成分;(4)培养方法;(5)品种基因型.     

影响马铃薯叶肉原生质体褐化的因素及AgNO_3对其褐化和分裂的作用

影响马铃薯叶肉原生质体褐化的主要因素是6-BA和基因型,还有NAA等其它因素。在相同浓度的6-BA下,同一材料的原生质体褐化率在NAA1 2mg/L时最高,在0 8和1 0mg/L时相近。在相同NAA浓度下,6-BA浓度越高,同一材料的原生质体越容易褐化。原生质体褐化率与基因型也有关。在相同的NAA和6-BA浓度配比下,6个材料的原生质体褐化难易顺序是CW-2-3>CW-1-4>CW-2-7,A-1>82-75>2-10,二倍体野生种的原生质体比双单倍体品系的更容易发生褐化。AgNO3可抑制马铃薯叶肉原生质体的褐化,从而提高细胞分裂频率。在本试验中,0 6mg/LAgNO3抑制效果最好,原生质体分裂频率最高。     

体细胞杂交技术在马铃薯遗传育种研究中的应用

体细胞杂交技术是打破有性杂交不亲和障碍,将野生种优良性状引入普通栽培种,丰富马铃薯遗传基础,创造新种质的有效手段。本文在原生质体的分离融合、融合体的筛选、杂种的鉴定等方面对马铃薯体细胞杂交技术进行综述的基础上,介绍了近年来马铃薯体细胞杂交技术的研究进展,并就体细胞杂交技术在马铃薯遗传研究育种上的应用进行了阐述。     

我国马铃薯组织和细胞培养研究进展

简述了近２０年来,我国马铃薯组织和细胞培养,包括茎尖、花药、花粉、胚、子房、胚乳、叶片、茎段、块茎、原生质体、悬乳细胞等多种外植体培养以及离体块茎生产种质离体保存取得的重要进展,讨论了马铃薯组织和细胞培养的应用前景及存在问题。     

紫色马铃薯离体培养芽诱导因子研究

[目的]应用组织培养技术对紫色马铃薯进行离体培养芽诱导研究,以建立紫色马铃薯离体培养技术体系。[方法]以紫色马铃薯芽为外植体,进行不同的灭菌处理、基本培养基、蔗糖浓度和培养温度的比较试验,筛选紫色马铃薯芽诱导的适宜因子。[结果]试验结果表明:适宜的芽外植体灭菌处理为75%酒精10 s+0.1%升汞10 min,芽诱导成活率为45.56%;适宜的基本培养基是MS培养基,芽诱导成活率为48.89%;适宜的蔗糖浓度是30g/L,芽诱导成活率为58.89%;适宜的培养温度是25℃,芽诱导成活率为54.44%。[结论]研究结果为紫色马铃薯快速繁殖提供了技术参考。     

棉花原生质体培养再生植株获得成功

原生质体培养再生植株是进行细胞杂交与基因工程操作的重要基础工作。但至今未见从陆地棉原生质体培养获得胚胎发生与植株再生的报道。我们继1987年在我国首次完成棉花细胞悬浮培养再生植株之后,最近又从棉花胞性细胞原生质体中培养出再     

花生叶片原生质体游离和培养因子的研究

花生叶片酶解分离原生质体试验表明,植株的苗龄和叶龄对原生质体产量有很大的影响,苗龄１５～２０ｄ的顶部刚平展幼叶是获得高产原生质体的最佳材料。酶浓度和酶解时间是影响原生质体游离和培养的重要因素。通过相关和回归分析,选择较低的酶浓度,较短的酶解时间,并对原生质体产量影响不大的酶处理方法,是原生质体培养成功的关键因子之一。     

大豆愈伤原生质体的制备和培养方式探究

具有植物细胞全能性的原生质体是探究植物遗传转化和基因功能的理想材料,为了高效率制备大豆原生质体及其稳定培养,以交大05-133大豆未成熟子叶诱导的愈伤组织为材料,采用正交设计,对纤维素酶、果胶酶和离析酶等酶解液成分进行分析,研究原生质体高效制备方法的酶解液配比,同时探讨不同酶解时间对原生质体产量的影响,以确定最佳的原生质体酶解条件;通过对比在低熔点琼脂固体液滴培养与液体培养这两种不同培养方式下细胞的增值速率,以期建立高效的愈伤原生质体再生体系。结果显示,最佳酶解液配比为:2%纤维素酶+0. 1%果胶酶+1%离析酶,在该酶解液配比下酶解5 h,所得到原生质体产量和活力最高,达到(3. 976±0. 86)×10~6个·g~(-1)。用KP8培养基对原生质体进行培养,结果显示固体液滴的培养方式更适合原生质体的分裂,原生质体植板率高于液体培养,并且在25 d内分裂形成致密的细胞团。     

大豆单细胞培养和原生质体游离的细胞形态观察

本文将形状不同的大豆悬浮培养细胞分成三种类型;园形和椭园形(A类)稍长形(B类)和长形细胞(C类)。A类细胞分生能力强,经多次分裂形成多细胞团;C类细胞多数为老化细胞,能分裂但不能形成细胞团;B类细胞在悬浮细胞中含量很少,大部分能分裂形成细胞团。在用悬浮培养细胞游离原生质体的过程中,A类细胞几乎全能游离出原生质体,B类细胞大部分能游离出原生质体,C类细胞几乎不能游离出原生质体。因此,在游离悬浮培养细胞时,在原生质体中含有少量未去壁的C类细胞和极少数B类细胞可不必用其它的方法分离出去,因为C类细胞不能形成细胞团,那么经培养形成的愈伤组织和分化再生的完整植株可能几乎都是由原生质体产生的。     

丹麦马铃薯脱毒种薯生产技术

<正> 1 马铃薯组织培养技术丹麦马铃薯组织培养技术主要表现在3个方面:一是脱毒种薯生产程序;二是加速优良品种的繁育速度;三是保存种质资源。这三项工作全部在国家植物病理研究所进行。自1961年便开始实施生产健康种薯的计划,1970年有50个品种实现种薯无毒化,1986年所有栽培品种种薯均由无病茎尖培养所     

龙眼胚性悬浮细胞原生质体培养及其体胚发生再生植株

以“红核子”、“东壁”、“十二月龙眼”等龙眼品种的胚性悬浮细胞为起始材料分离原生质体,采用液体浅层培养、包埋悬浮培养等方式,进行原生质体培养与植株再生研究。研究结果表明,海藻酸钙包埋悬浮振荡培养(50r/min)是龙眼悬浮细胞原生质体培养的适宜培养方式,在含有多种生长调节剂的改良MS培养基(MP6)上,再生小克隆的形成频率可高达5%;采用龙眼胚性愈伤组织体胚诱导、成熟和萌发的优化方案,原生质体再生小克隆分化子叶形胚状体的频率达100%,萌发植株的频率一般大于45%。      

播娘蒿与甘蓝型油菜的原生质体融合与植株再生

以播娘蒿叶片和甘蓝型油菜子叶为材料提取原生质体.采用PEG-高pH、高钙附加DMSO融合方法,液体浅层静置培养,研究影响播娘蒿与甘蓝型油菜原生质体融合的因素,获得了再生植株.结果表明:4%纤维素酶 0.5%离析酶 5mmol/L MES酶解10b可获得高产率播娘蒿原生质体,1%纤维素酶 0.2%离析酶 3mmol/LMES酶解14h可获得高产率油菜原生质体;30%PEG 0.3mol/L葡萄糖 50mmoL/L CaCl2·2H2O 15%DMSO可获得10%的融合率;改良B5培养基的原生质体培养效果最好;最佳分化培养基为MS 4.0mg/L 6-BA 0.3mg/LNAA 5.0mg/L AgNO3;最佳生根培养基为MS 0.1mg/LIBA 0.1mg/L NAA.     

定西市马铃薯脱毒种薯生产技术

<正>马铃薯茎尖脱毒技术是目前防治马铃薯病毒病的有效方法之一,世界上许多国家利用此方法开展了无病毒马铃薯种薯生产,解决了马铃薯因病毒病造成优良性状退化而减产的问题,使产量得到了大幅度的提高。近几年我市在马铃薯脱毒种薯生产技术方面做了大量研究工作,总结了一整套先进适用的马铃薯脱毒种薯生产技术。     

橡胶树PR107原生质体的分离和培养研究

以橡胶树PR107花药愈伤组织建立的胚性悬浮细胞为材料,进行原生质体的酶解分离和培养研究。结果表明：在酶组合为纤维素酶1.5 %+果胶酶0.15 %+离析酶0.5 %的酶解处理下,继代培养第6天、直径小于0.5 mm悬浮细胞团获得最高产量的原生质体,达到2.2×107个/mL PCV;原生质体在看护培养基上培养1周后观察到细胞开始发生分裂,培养2周后细胞分裂形成含8-10个细胞的小细胞团。看护培养45 d后原生质体持续分裂并发育成肉眼可见的小愈伤组织。     

原生质体融合技术在烟草品种改良中的研究与应用前景

主要论述了原生质体融合技术在烟草品种改良中取得的成就,以及应用原生质体融合技术常采用的方法和存在的问题,讨论了原生质体融合技术在烟草抗生性育种上应用的前景。     

毛叶枣与冬枣原生质体分离体系的建立

研究了毛叶枣及冬枣的原生质体分离条件,为以后应用体细胞融合技术创造优异的毛叶枣体细胞杂种材料提供技术支持。结果表明:枣叶片分离出的原生质体活性显著高于悬浮培养物,但是产量低于悬浮培养物分离出的原生质体。毛叶枣酶解所需酶液最佳浓度为纤维素酶10g/L 离析酶4g/L 甘露醇0.7mol/L;冬枣酶解所需酶液最佳浓度为纤维素酶15g/L 离析酶4g/L 甘露醇0.7mol/L,酶解时间均为14￣16h。     

马铃薯组织培养衍生植株的变异性

在由马铃薯赤褐布尔班克品种原生质体衍生的植株中,发现一系列包括产量及抗病性的有用变异性状,但在其他一些品种的衍生植株中却没发现有这样的变异。为此,进行了以下几方面的研究:(1)一些英国品种原生质体     

甘蔗原生质体RNA提取条件和方法的优化

为了获得高产量和高纯度的甘蔗原生质体RNA,本研究以新台糖22号（ROC22）和桂糖28号（GT28）甘蔗原生质体为材料,探究了渗透压和原生质体活力对甘蔗原生质体RNA提取效果的影响,并比较了Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法、试剂盒法4种RNA提取方法。结果表明：原生质体渗透压与RNase活性呈显著正相关,原生质体活力与RNase活性呈极显著负相关;RNase活性越高,RNA提取效果越差;使用0.5 mol/L的甘露醇作为渗透压调节剂可获取活力最高的甘蔗原生质体;原生质体活力为70%和90%时所提的RNA完整性好且纯度高,符合后续分子实验的需求,原生质体活力为90%时,RNA产量最高。因此,需要提取甘蔗原生质RNA时,至少需要保证原生质体的活力在70%以上,且原生质体活力越高,RNA的产量越高;采用改良Trizol法,可以大量制备能满足后续分子实验的完整性好且纯度高的RNA,利用该条件和方法,可以确保获得大量高质量的甘蔗原生质体RNA。本研究结果为甘蔗体细胞融合育种过程中的分子生物学研究提供了方法和技术支撑。