HMC毒素诱导玉米专效寄主原生质体细胞凋亡的检测

以2对同核异质玉米B37和Mo17叶片的原生质体为试材,并将原生质体随机分为4组,HMC毒素质量浓度分别为0、50、100、150μg/mL,处理时间分别为1、3、6h。采用吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)荧光复染的方法进行检测,观察处理后原生质体的凋亡特征及细胞凋亡率的变化趋势。结果表明:HMC毒素处理玉米原生质体后发生细胞凋亡,并出现凋亡小体、染色质边集或环状染色质等凋亡特征;经不同浓度HMC毒素处理B37和Mo17玉米原生质体,CB37的最大凋亡率为10.80%,NB37为4.90%,CMo17为21.00%,NMo17为8.83%;HMC毒素对2种基因型的C、N细胞质所测结果一致,均为C细胞质对毒素敏感,先出现细胞凋亡,N细胞质出现细胞凋亡的时间相对较晚;C、N之间的细胞凋亡率差异显著,且前者高于后者。当毒素浓度不变时,细胞凋亡率随毒素处理时间的延长而递增;当处理时间不变时,细胞凋亡率随毒素浓度的增加而上升。     

玉米小斑病菌C小种毒素诱导玉米离体根冠细胞凋亡的检测

将玉米同核异质体不育细胞质CB37及其正常保持系NB37的离体根冠细胞分为4组,其中3组分别用质量浓度50μg/mL、100μg/mL和150μg/mL的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素诱导,1组用pH6.5PBS诱导作为对照,诱导时间分别为1h、4h和7h。然后采用中性红与伊文思蓝染色、吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)复染和Hoechst33258染色3种方法检测玉米根冠细胞的凋亡状况。结果表明:HMC毒素诱导玉米根冠细胞发生凋亡,并出现凋亡小体与染色体边集形态特征。中性红与伊文思蓝染色,只能检测出活细胞和死细胞,且在3种毒素浓度、3种处理时间下,CB37的根冠细胞死亡率均高于NB37;采用AO与EB复染方法,用150μg/mLHMC毒素处理7h时,CB37细胞凋亡率达到最高值70.2%,而NB37仅为36.7%;经Hoechst33258染色后,CB37用150μg/mLHMC毒素处理7h时达到最大凋亡率为74.5%,而NB37为30.7%。专效性HMC毒素对C细胞质敏感,在毒素伤害细胞致死过程中,C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质;在诱导细胞凋亡程序中,C细胞质的细胞凋亡率也远高于N细胞质,且其凋亡率随...     

玉米小斑病菌毒素诱导自交系Mo17凋亡的检测

利用提取的玉米小斑病菌C小种(Helminthosporium maydis race C,HMC）毒素处理同核异质体Mo17-C和Mo17-N叶片及叶片中的原生质体并进行凋亡检测。叶片凋亡检测采用DNA凝胶电泳分析,结果表明：Mo17-C和Mo17-N均出现DNA-ladder,其中HMC毒素质量浓度为250 μg/mL时,诱导12 h后Mo17-C出现的DNA-ladder最明显,而Mo17-N在HMC毒素质量浓度升至300 μg/mL时,诱导12 h后DNA-ladder才最明显。原生质体的凋亡检测采用Hoechst 33258荧光染色法并统计其凋亡率,结果表明：Mo17-C和Mo17-N均出现细胞凋亡的特征,包括产生凋亡小体、环状染色质和染色质边集的现象,且凋亡率均随毒素浓度的增加和诱导时间的延长而呈上升趋势。但对于相同处理,C细胞质的凋亡率显著高于N细胞质,Mo17-C对HMC毒素的敏感性大于Mo17-N。     

玉米小斑病菌C小种毒素的分离纯化新方法

魏建昆等证实在中国存在玉米小斑病菌C小种。后来，崔洋等提纯了C毒素（HMC－toxin)。通过硅胶柱层析（silica-gel）对C毒素的粗提液进行纯化，并对所纯化的C毒素进行活性检测。结果发现：所得到的C毒素使C细胞质玉米叶片失绿并且严重萎蔫。     

玉米C群不同亚群雄性不育细胞质对玉米小斑病菌C小种侵染的反应

通过4年的田间与室内试验，证实玉米C群中的CI亚群（cms-C）对玉米小斑病菌C小种专化感病，而CⅡ亚群（cms-RB）和CⅢ亚群（cms-ES）则不严重感病。这表明CⅡ和 CⅢ两个亚群可以在生产上应用。     

HMC毒素培养滤液对专化寄主玉米叶片诱导抗病性及相关酶的影响

 【目的】研究HMC毒素培养滤液对玉米叶片诱导抗病性作用及抗病性相关酶的影响。【方法】以两对同核异质玉米自交系（B37和C103）为试材,采用离体叶片法检测不同稀释倍数的HMC毒素培养滤液对专化寄主玉米叶片的致病性,从中筛选适宜诱导的有效浓度,在诱导中和接种后两个阶段分别测定防御酶活性及与抗病性相关物质含量等生理指标。【结果】不同基因型与不同细胞质玉米都可以利用低浓度HMC毒素培养滤液诱导以增强其抗性;不同处理时期,植物抗病性相关酶活性呈现不同的动态变化;不同的诱导处理均导致抗病性反应的产生,对C细胞质的预处理效果好于N细胞质,且具有浓度效应。【结论】低浓度HMC毒素培养滤液预处理后,刺激了POD、PAL酶活性提高和MDA含量下降,以此来启动玉米本身的防卫系统,因钝化作用而抑制侵染,当再接种高浓度HMC毒素培养滤液后,抗病性相关酶得到了进一步激活,使C细胞质玉米对HMC敏感性降低,从而玉米叶片呈现出抗病性。     

玉米C群不同亚群雄性不育细胞质对玉米小斑病菌C小种侵染的反应

通过4年的田间与室内试验,证实玉米C群中的CI亚群（cms-C）对玉米小斑病菌C小种专化感病,而CⅡ亚群（cms-RB）和CⅢ亚群（cms-ES）则不严重感病。这表明CⅡ和 CⅢ两个亚群可以在生产上应用。     

玉米小斑病菌T小种毒素对玉米叶片过氧化物酶活性的诱导作用

 概述了利用低浓度玉米小斑病菌T小种毒素培养滤液处理玉米叶片以提高玉米叶片过氧化物酶的活性;而过氧化物酶的活性变化与植物抗病性呈正相关,从而说明低浓度T毒素培养滤液本身能够作为激发子来诱导玉米的系统获得性抗性。     

玉米小斑病菌O小种毒素的生物活性测定

中国玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)小种培养滤液含有活性较强的生理活性物质,对供试15个自交系种子根生长具有明显的抑制作用;可诱导幼苗和离体叶片产生典型的小斑病症状,自交系对培养滤液致病作用的抵抗性与幼苗对病菌的致病性密切相关;O小种培养滤液对玉米根冠细胞具有强烈的致死作用,根冠细胞对培养滤液的敏感性与幼苗对病菌的感病性间存在明显的正相关。据此,初步认为O小种滤液中的生理活性物质为O毒素。     

玉米小斑病菌复壮培养基的筛选

选用7种培养基对出现退化的玉米小斑病菌进行复壮培养。结果显示：通过V8培养基和玉米苗浸汁培养基获得的复壮菌株,菌落形态表现为菌丝黑密粗壮,且生长速度（分别为6.46 mm/d和6.33 mm/d）、产孢量（分别为2.72×10^6个/mL和1.92×10^6个/mL）和致病力等均得到恢复与提高。复壮后的病毒粗提液,对C和N细胞质产生较强的专效性毒害,反映出对菌株复壮的高度有效性。     

HMC毒素培养滤液诱导C103玉米抗小斑病的研究

以1对同核异质玉米C103自交系为试材,采用离体叶片法检测适宜浓度的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素培养滤液来诱导玉米的抗病性.结果表明:对照的玉米病斑面积是处理组的7.9～12.2倍,差异极显著,并以1:60预处理效果最佳;经0～72 h的动态检测,与对照相比,诱导玉米的过氧化物酶活性平均提高了57.8%,苯丙氨酸解氨酶活性平均提高了52.9%,有害物质丙二醛的含量平均降低了38.2%;低浓度HMC毒素培养滤液能够作为激发子诱导专化寄主玉米获得抗病性.     

玉米小斑病菌T小种培养滤液对玉米抗病性的诱导

 以1对同核异质的玉米C103为试材，进行了利用低浓度玉米小斑病菌T小种培养滤液作为激发子来提高玉米抗病性的研究。结果表明, 经预处理叶片的病斑面积为（0.3±0.05）～（0.9±0.5）mm2，而对照为（23.1±8.7）mm2，差异极显著。同时还测定了与提高抗病性有关酶的变化，经0～96 h的动态检测，以1∶50的处理效果为最好，苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性比对照平均提高了64.2%，过氧化物酶(POD)活性比对照平均提高了41.2%，有害物质丙二醛(MDA)的含量比对照平均降低了29.7%。从而说明低浓度培养滤液本身能够成功地作为激发子来诱导玉米的系统获得性抗性。     

Induced Resistance by the Toxin Filtrate of Bipolaris maydis Race T Cultivation

Resistance to maize southern leaf spot disease was induced by the low-concentration filtrate of Bipolaris maydis race T cultivation in an experiment. The nuclear neterogeny corn C103 was used as the test material. The lesion area on the leaves was significant difference by connalysis. The lesion areas on pretreated leaves were (0.3 ± 0.05)- (0.9 ± 0.5) mm2, but those on the control were (23.1 ± 8.7) mm2. At the same time, the changes in peroxidase, phenylalanine, ammonialyase, and malondialdehvde activities were determined. During 0-96 h of inspection, phenylalanine and ammonialyase (PAL) activities increased by 64.2%, peroxidase (POD) activities increased by 41.2%, but the malondialdenvde (MDA) content decreased by 29.7% compared with the control. It seems that the low-concentration filtrate of Bipolaris maydis race T cultivation itself can be used as an elicitor to enhance the induced resistance.     

利用线粒体DNA(mtDNA)鉴别玉米各类不育胞质种子的研究

提取黑暗中培养的玉米雄性不育胞质材料Ｔ群、Ｃ群、Ｓ群、ＹⅡ－１型和正常可育胞质的黄化苗体内的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）,通过琼脂糖凝胶电泳分析未经酶切和酶切（限制性核酸内切酶分别为ｘｈｏＩ和ＢａｍＨＩ）的ｍｔＤＮＡ的电泳特性。发现：Ｔ群、Ｃ群、Ｓ群以及ＹⅡ－１型彼此ｍｔＤＮＡ组成上都存在差异。据此,可用ｍｔＤＮＡ鉴别玉米各类不育胞质种子。     

药剂拌种防治大麦条纹病

用石灰水、粉锈宁、多菌灵,在大麦播种前分别对种子进行了浸种和拌种处理,最后经过防治效果的检查及产量的方差分析,其中粉锈宁防治大麦条纹病(Helminthosporium gramineum)效果最佳,石灰水次之,多菌灵最差。