草鱼出血病病毒854株的理化_生物学特性及基因组结构

草鱼出血病是我国一种十分严重的病毒性鱼病。１９７８年,中国科学院水生生物研究所第三研究室的科研人员首先报道了草鱼出血病是一种病毒性鱼病,并初步认为其病原是一种疱疹病毒（Ｈｅｒｐｓｖｉｒｕｓ）。１９８３年,陈燕新等报道了自己分离的草鱼出血病病毒形态结构...     

草鱼出血病病毒854株基因组SDS—PAGE分析及其核酸类型鉴定

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明:草鱼出血病病毒854株基因组由11个分段的核酸片段组成,总分子量约为14.46×10~6道尔顿。其中最大片段的分子量约为2.45×10~6道尔顿;最小片段的分子量约为0.38×10~6道尔顿。其基因组核酸片段电泳图谱具有病毒株的特异性.核酸酶敏感性试验表明该病毒的核酸为RNA。     

草鱼出血病病毒854株在CIK细胞系上的繁殖动态研究

采用微量细胞培养系统测定草鱼出血病病毒854株在草鱼肾脏组织细胞系(CIK)上的繁殖动态。病毒在感染后12小时滴度开始上升,24～72小时呈对数上升,84小时病毒滴度达到最高点,以后渐趋平稳。     

草鱼出血病病毒VP6蛋白的原核表达、纯化及免疫效果

为了探讨草鱼出血病病毒(GCRV)VP6亚单位疫苗对草鱼出血病的免疫保护作用,将vp6基因克隆进原核表达载体pET-28a(+),构建了重组质粒pET28a(+)-VP6。SDS-PAGE和Western-blotting显示,重组VP6蛋白的分子量约为43 ku,主要以包涵体形式存在,重组蛋白占菌体总蛋白的20%左右;Ni2+柱纯化后的重组蛋白,以每尾500μg肌肉注射免疫草鱼(14～20 cm,60～120 g),并在第14、21、28、49、70天通过间接凝集反应检测抗体水平,结果显示,免疫注射后第14天可检测到鱼体产生的特异性抗体,第21天达到最高峰,第70天仍可检测到抗体的存在;免疫注射第21天人工接种GCRV,免疫后的草鱼对出血病的保护力达100%。     

草鱼出血病防治

在草鱼养殖过程中，出血病是鱼种培育阶段一种广泛流行、危害性大的病毒性鱼病，发病率高，流行季节长，可造成大批草鱼鱼种的死亡，危害甚大。笔者根据多年实践经验，现将此病的防治方法介绍如下： （１）清除池底过多淤泥，并用２００× １０－６生石灰或２０×１０－６漂白粉（含有效氯３０％）或１０×１０－６漂白精（有效氯６０％）消毒。 （２）鱼种下塘前，用聚乙烯氮戊环酮碘剂 ６０×１０－６药浴２５分钟左右，或用鱼复药３号 ２０～３０×１０－６药浴 ３０～６０分钟。 （３）每万尾鱼种用水花生 ４ ｋｇ，捣烂后拌入 ２５０ｇ…     

两种草鱼出血病病毒株的比较↑（*）

草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）是我国分离成功的第１种鱼类病毒,隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属（Ａｑｕａｒｅｏｖｉｒｕｓ）［７,１４］。ＧＣＨＶ是草鱼出血病的病原体,可导致当年龄草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｈｕｓ）鱼种大批死亡［５,８...     

应用Dot_ELISA技术检测草鱼出血病病毒的研究

报道了斑点免疫吸附ＥＬＩＳＡ（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）快速检测草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）的方法以及对提纯病毒、染毒细胞内病毒和病鱼组织的检测结果，并对该方法的灵敏度与ＳＰＡ－ＣｏＡ和常规ＥＬＩＳＡ法进行了系统的比较。结果表明，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出ＧＣＨＶ的最低含量为３ｐｇ，该灵敏度比ＳＰＡ－ＣｏＡ和常规ＥＬＩＳＡ法分别提高１０倍和２０倍，而且快速易行，是目前检测ＧＣＨＶ最为有效的方法，并可在草鱼出血病临床诊断和病毒疫苗质量鉴定等方面得到应用。     

草鱼出血病病毒精细结构的研究

<正> Brenner和Horne发展的负染色技术已广泛用于电子显微镜下病毒精细结构的研究。我们采用这一技术对本协作组曾报道过的草鱼出血病病毒进一步做了精细结构的观察,并对观察结果进行了分析。现将我们的研究结果介绍如下。     

草鱼出血病及其防治对策

随着草鱼养殖密度的加大，养殖的集约化及养殖产量的提升，其病害日趋严重。据调查，草鱼的养殖成活率在５０％左右。危害草鱼的病害种类较多，尤以草鱼出血病危害最为严重。该病流行范围广，传染速度快，死亡率高，防治难度大，每年给渔业生产带来严重威胁和巨大的经济损失。１病原体草鱼出血病的病原体为呼肠弧病毒。该病毒为双链RNA类型病毒。该病毒颗粒直径在６５～７０纳米之间。具二十面体，无夹膜，双层衣壳，对脂溶剂、热、酸均不敏感。该病毒能在草鱼吻端、性腺、肾脏鳍条等草鱼单层细胞中复制。２流行与危害草鱼出血病是目前危…     

草鱼出血病病毒保存与人工感染

草鱼是一种优质淡水鱼类，它具有生长快，产量高，经济效益大的优点．但是草鱼极易患病，难养，成活率低，尤以草鱼出血病危害最大。草鱼出血病病原，属呼肠弧病毒。至今未有特效药物防治。据报导近年来采用土法疫苗进行人工免疫，已取得较好的效果。为解决草鱼出血病工厂化生产所需要的毒种，于1981年7月-10月，1982年8月--10月和1983年8月在草鱼出血病发病季节，     

草鱼干扰素的分离纯化及某些理化和生物学特性

通过ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ阴离子交换层析、Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００凝胶层析、高效液相层析和梯度聚丙烯酰张胶电泳等技术,对病毒诱生的草鱼血清干扰素进行了分离纯化。纯化的草鱼干扰素在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈现单一组份,分子量为３８ｋＤ,等电点为５．２５,过碘酸－Ｓｃｈｉｆｆ试剂反应表现为典型的糖蛋白染色特征。理化和生物学特性研究表明,草鱼干扰素具有１０００００ｇ（２ｈ）离心不沉降、耐     

应用Dot—ELISA技术检测草鱼出血病病毒的研究

报道了斑点免疫吸附ＥＬＩＳＡ快速检测草鱼出血病病毒的方法以及提纯病毒、染毒细胞内病毒和病鱼组织的检测结果，并对该方法的灵敏度与ＳＰＡ－ＣｏＡ和常规ＥＬＩＳＡ法进行了系统的比较。     

草鱼出血病病原—鱼呼肠孤病毒(FRV)核酸特性的研究

<正> 本协作组曾报道从草鱼出血病病鱼组织中首次分离出一种直径约为60nm的球形病毒,并证实这一病毒为草鱼出血病的病原。随后,做了其精细结构的观察与分析。本文对该病毒的核酸基本特性进行了研究。根据我们以前和本文报道的     

草鱼出血病病毒高滴度培养方法的研究

本文对草鱼出血病病毒 854株高滴价培养的几种方法进行了的研究 ,现将结果报告如下 :材料和方法1　细胞 :草鱼肾脏组织细胞系 (ＣＩＫ) (左文功 ,1986 ) ,培养基为含 10 %小牛血清的ＣＡＳ。2　病毒 :草鱼出血病病毒 854株 ,维持液为 2 %小牛血清的ＣＡＳ。3　高滴价培养方法3 1　用 854株病毒接种刚生长成单层的ＣＩＫ细胞系 (区别于致密单层细胞 ,下同 )。病毒接种量为维持液量的 1/ 10 ,2 8℃吸附 6 0分钟后 ,添加维持液 ,2 8℃培养 ,观察细胞病变过程 ,测定病毒的ＴＣＩＤ50 /ｍｌ。3 2　精氨酸处理　在接种病毒时 ,向病毒液中加入浓…