牛乳β-酪蛋白遗传多态性及A2型乳制品研究进展

β-酪蛋白是牛乳酪蛋白的主要组成部分,具有重要的生理功能,与人体健康密切相关.牛乳β-酪蛋白具有多种遗传变异体,最常见的是A1型和A2型,其中A2型为天然原型.本文从β-酪蛋白的遗传多态性、β-酪蛋白消化特性与人体健康、A2型牛群选种选育及A2型乳制品研究进展等方面进行综述,旨在阐述牛乳β-酪蛋白遗传多态性研究现状及其...     

牛乳中A2β-酪蛋白功效特点及其检测方法研究进展

牛乳总蛋白中酪蛋白约占80％,其中36％是β-酪蛋白.A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白是β-酪蛋白遗传变体中最常见的两种类型,A2β-酪蛋白为天然原型.A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白消化酶解后会产生不同的生物活性肽,来源于A1β-酪蛋白的BCM-7可能与1型糖尿病、心血管疾病、自闭症、精神分裂症、消化功能紊乱等人体慢性非...     

牛乳腺β-酪蛋白基因的克隆及其表达载体的构建

利用高保真PCR法,分别扩增了牛乳腺β-酪蛋白基因的1.8和1.1 kb的5′和3′调控序列,将其分别克隆入TA载体。经PCR验证后测序,用NCBI Blast软件分析表明其克隆片断与奶牛β-酪蛋白基因相应区域同源性分别为97.0%和99.0%,表明成功克隆了酪蛋白基因5′和3′的调控区。然后利用DNA重组技术依次亚克隆入改造过的真核表达载体pcDNA3（切除CMV启动子）,构建成牛乳腺特异表达载体。获得的重组载体经限制性内切酶酶切鉴定,测序验证等表明,成功构建了牛乳腺特异表达载体。     

牛乳中A2β-酪蛋白功效特点及其检测方法研究进展

牛乳总蛋白中酪蛋白约占80%,其中36%是β-酪蛋白。A₁β-酪蛋白和A₂β-酪蛋白是β-酪蛋白遗传变体中最常见的两种类型,A₂β-酪蛋白为天然原型。A₁β-酪蛋白和A₂β-酪蛋白消化酶解后会产生不同的生物活性肽,来源于A₁β-酪蛋白的BCM-7可能与1型糖尿病、心血管疾病、自闭症、精神分裂症、消化功能紊乱等人体慢性非传染性疾病的发生密切相关,A₂β-酪蛋白酶解后产生的BCM-7要比A₁β-酪蛋白少甚至不会产生β-酪啡肽-7(BCM-7)。β-酪蛋白基因多态性受常染色体上共显性基因控制,目前常用的检测方法为反相高效液相色谱法(RP-HPLC)、等电聚焦电泳(IEF)法和等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR)、单链构象多态性聚合酶链式反应(SSCP-PCR)等。文章对β-酪蛋白遗传变体A₂β-酪蛋白功能特点、遗传学特点及A₂β-酪蛋白基因检测方法进行综述,旨在为A<...     

水牛乳β-酪蛋白基因多态性与消化性能及抗氧化性能的关联研究

本研究以水牛乳β-酪蛋白(β-CN)基因多态性分析结果为依据,从水牛乳中分离并纯化出具有活性的β-酪蛋白亚型.采用体外消化模型分析其在胃肠道中的消化性能;根据水解液的抗氧化活性来分析生物活性肽的释放.高效液相色谱法(HPLC)结果显示,水牛乳中β-CN有A和B两种等位基因.消化性能结果显示A等位基因更利于β-酪蛋白在肠...     

牛乳腺上皮细胞β-酪蛋白的检测及核型分析

本试验用Western-blotting检测奶牛乳腺上皮细胞培养液中的β 酪蛋白，鉴定该细胞的生理功能是否正常；通过分析染色体数目及核型以鉴定体外培养的奶牛乳腺上皮细胞是否发生转化。结果显示：培养液中含有β 酪蛋白，说明该乳腺上皮细胞生理状况良好；染色体数目正常，染色体数目为60，核型与哺乳动物染色体图谱一致，说明该细胞系在体外培养条件下未发生转化。     

牛科物种β-酪蛋白基因的研究进展

β-酪蛋白(CSN2)是牛科物种乳中重要的酪蛋白之一,对维持乳的理化特性具有重要作用。论文对普通牛、水牛和山羊的CSN2基因结构与功能、近年发现的变异类型及CSN2基因变异与生产性状的关联进行了综述,并对该基因在研究中存在的问题进行了总结和展望。     

牛乳中乳源糖巨肽及β-酪蛋白的分离纯化

[目的]通过凝乳酶酶解牛乳得到乳源糖巨肽（CGMP）,利用CGMP对三氯乙酸的耐受差异,实现CGMP的分离与纯化。利用β-酪蛋白在低温低酸条件下容易游离的特性,从凝乳酶酶解后的酪蛋白中分离出β-酪蛋白。[方法]鲜牛乳经过脱脂后,加入适量凝乳酶在35℃条件下充分酶解,酶解后样品离心后得到上清液和沉淀。在上清液中加入三氯乙酸实现CGMP的除杂和沉淀,得到固体CGMP采用高效液相色谱仪测定其纯度;沉淀经过碱性复溶降低温度后,在全程低温条件下调节pH值到3.5,低温离心取上层清液,升温至35℃,再次常温离心后得到β-酪蛋白,并用高效液相色谱仪测定其纯度。[结果]当TCA浓度达到10%时,溶液中CGMP全部析出。收集分离纯化后的CGMP固体,经高效液相色谱法检测,CGMP纯度为80%～90%。在低温低酸性条件下,分离得到纯度较高的β-酪蛋白,纯度为85%～90%。     

日粮营养水平对奶牛乳中酪蛋白含量影响的研究进展

酪蛋白是乳蛋白的主要成分,不仅营养丰富,且其水解产物对机体有重要调节作用。影响酪蛋白含量的因素主要有遗传、泌乳阶段、日粮营养水平及其组成等,其中通过调控日粮营养水平来提高乳中酪蛋白含量是一种较为常见的技术手段,对提高饲料利用率及改善乳品品质具有重要意义。作者综述了不同日粮营养水平对奶牛乳中酪蛋白含量的影响,以期为生产实践中提高奶牛乳中酪蛋白含量提供理论基础。     

牛乳中酪蛋白的分离及其特性研究

将鲜乳高速离心分离得到酪蛋白。并以分离得到的酪蛋白为原料,从流变学特性、粒径、Zeta电位和透光度等几个指标研究了其在不同pH下的变化情况。试验结果表明：在pH值5.0～7.0范围内,Zeta电势值（绝对值）、电导率值和粘度都是随着pH值的增大而增大,而酪蛋白胶粒的粒径先增大后减小,在pH值5.8和6.2时最小。分散稳定性分析仪测定结果显示,酪蛋白溶液在pH6.2到pH6.6时最稳定。进一步的分析表明,这种现象与其微观结构的变化有关。     

茶多酚对牛乳过敏原αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响

为探明茶多酚对αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响,选用茶多酚中活性较强的表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate,EGCG）和表没食子儿茶素（epigallocatechin,EGC）接枝αs1-酪蛋白。通过荧光光谱、同步荧光光谱和圆二色谱研究αs1-酪蛋白构象变化,通过间接竞争酶联免疫方法、免疫印迹实验分析αs1-酪蛋白抗原性变化。结果表明：EGC、EGCG均对αs1-酪蛋白内部荧光有猝灭作用,对αs1-酪蛋白的酪氨酸（tyrosine,Tyr）和色氨酸（tryptophan,Trp）残基均有影响,αs1-酪蛋白的α-螺旋和β-折叠含量略有增加,无规卷曲含量略有降低;αs1-酪蛋白构象的变化导致其抗原性显著降低,EGCG对αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响显著强于EGC。     

κ-酪蛋白基因及其功能研究进展

κ-酪蛋白(kappa-casein,-κCN)是牛乳中的一种重要的蛋白质。作者简要介绍了κ-酪蛋白基因的结构、遗传多态性与产奶性状的关系及其编码蛋白质的生物学功能等方面的研究进展。     

奶牛酪蛋白和β-乳球蛋白基因多态及其对泌乳性状的影响

牛乳蛋白主要包括酪蛋白和乳清蛋白,其中酪蛋白基因和β-乳球蛋白基因是对奶牛产奶性能有较大影响的两种基因。牛乳蛋白基因多态性与泌乳性状,如泌乳量、乳脂率、乳蛋白量及乳蛋白率有很强的相关性。本文主要对酪蛋白和β-乳球蛋白基     

β-酪蛋白的功能特性及其在婴儿配方乳粉中的应用研究进展

β-酪蛋白是母乳蛋白质中一种主要酪蛋白组分,调整婴儿配方乳粉的β-酪蛋白含量可以使婴儿配方乳粉的蛋白质及氨基酸组成更接近母乳水平。本文介绍β-酪蛋白的氨基酸组成、空间结构,比较人乳β-酪蛋白与牛乳β-酪蛋白的部分特性差异,论述β-酪蛋白的功能特性及其在婴儿配方乳粉中的应用,为婴儿配方乳粉的产品研发提供参考。     

加热对牛乳中β-乳球蛋白(β-LG)的影响

1β-LG的来源与特性 牛奶包含了下列蛋白质：酪蛋白（casein）、乳清蛋白（whey，其中包括β-乳球蛋白和α-（乳白蛋白）、免疫球蛋白及血清白蛋白（BSA）。β-LG是乳清蛋白中的主要蛋白质，分子量约为18400kDa，存在于反刍动物及一些非反刍动物的乳汁中β-LG在60年前已被发现，但对于其生理及生物化学方面的功能尚未明确β-LG是牛奶中主要热敏感蛋白．主要由162个氨基酸所组成，并且在C106-C119及C66-C160的位置上有双硫键的键结，在C121位置上具有单一硫键。     

乳制品中A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白含量的测定

本检测方法在已有检测方法资料的基础上,通过改变柱温和梯度洗脱条件,提高A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白的分离效果,以便更好的分析乳制品中A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白的含量。本检测方法使用盐酸胍、二硫苏糖醇使β-酪蛋白变性,流动相选择B(乙腈),A(0.1%三氟乙酸水溶液),流速0.5 mL/min,梯度洗脱,柱温50℃,反相色谱柱进行分离,紫外检测器214 nm检测。采用本方法可以较好地分离牛乳中的A1 β-酪蛋白和A2 β-酪蛋白,并且出峰时间稳定。A1 β-酪蛋白在0.16～1.65 mg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程y=1.25×10⁶x-1.44×10⁵,R²=0.9985,R=0.9992,回收率范围96.4%～105.0%,精密度小于2.0%;A2β-酪蛋白在0.34～3.35 mg/mL浓度范围内线性关系良好,回归方程y=3.16×10⁶x-3.16×10⁵,R²=0.9988,R=0.9994,三浓度水平加标回收率范围97....     

牛乳中β-内酰胺酶残留及检测方法研究进展

β-内酰胺酶能将牛乳中抗生素残留量降到限量标准,在乳品生产中属于非法应用,但尚未有关于β-内酰胺酶及其降解产物对人体健康影响的安全性评价标准。本文综述了β-内酰胺酶的风险、残留现状,以及牛奶中β-内酰胺酶的微生物学检测方法、理化检验法、仪器检测法以及免疫学检测法最新研究进展,并展望了该领域今后的发展趋势。     

乳房炎牛乳中产β-内酰胺酶肠杆菌耐药性研究进展

随着抗菌药物在畜牧业及临床上广泛及不合理的使用,耐药菌株不断出现,革兰阴性菌临床分离株的耐药率大幅上升.菌株的耐药种类很多,近年来最受关注的是耐β-内酰胺类药物的菌株,其对β-内酰胺类药物的耐药机制日趋复杂,其中最主要原因是菌株产生可以特异性水解抗生素的β-内酰胺酶.目前国内外有关奶牛生鲜乳中分离出的肠杆菌耐药性研究越...     

奶牛乳质性状相关基因及其单核苷酸多态性的研究进展

乳质性状为奶牛重要的经济性状,主要包括乳蛋白量、乳蛋白率、乳脂量和乳脂率等。乳质性状改良是当今遗传育种界的研究热点之一,利用候选基因策略寻找影响乳质性状的功能基因或功能性单核苷酸多态,并将其应用于奶牛乳质性状的分子育种实践已经成为后基因组时代的发展趋势。目前针对乳质性状的功能基因或功能性单核苷酸多态已经开展了大量的研究工作,作者就参与泌乳调控的乳质相关基因、脂肪合成与次生物质代谢通路,以及其他一些与乳质性状相关基因及功能性单核苷酸的研究现状进行简要综述。     

热加工方式对牛乳过敏原αs1-酪蛋白二级结构和抗原性的影响

为探究热加工方式对牛乳过敏原αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响,利用间接竞争酶联免疫吸附测定方法、 免疫印迹方法分析不同加热条件下αs1-酪蛋白免疫原性的变化,进而通过8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针和圆二色谱分 析其二级结构变化,初步揭示热处理调控过敏原αs1-酪蛋白抗原性的机制。结果表明：在80 ℃、60 min,90 ℃、 10 min,90 ℃、60 min条件下热处理后,αs1-酪蛋白中α-螺旋结构含量显著低于未加热αs1-酪蛋白,在70 ℃、 20 min,80 ℃、20 min,90 ℃、20 min条件下热处理后,αs1-酪蛋白中无规卷曲含量显著增加,70～100 ℃加热 20 min条件下表面荧光强度最强,其他温度-时间条件下二级结构含量变化不显著;αs1-酪蛋白构象的变化导致αs1-酪 蛋白的抗原性显著降低,间接竞争酶联免疫吸附测定显示,在70～100 ℃加热20 min条件下,αs1-酪蛋白的抗原残留 量均较高,而免疫印迹方法显示不同温度-时间条件下αs1-酪蛋白仍具有免疫反应特性,建议进一步通过动物实验揭 示热处理调控αs1-酪蛋白抗原性的机制。