捕后虾夷扇贝闭壳肌免疫因子与活品品质评价初探

为探索采捕后活品贝类的品质变化规律,以虾夷扇贝Patinopecten yessoensis为对象,研究了其闭壳肌中酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)、过氧化氢酶(CAT)等4个非特异性免疫因子的变化规律,试验基于活品虾夷扇贝的商品流通链分别进行湿藏和干藏处理,捕后贮藏分为离水至甲板、运输船中转、港口卸货、基地缓冲池和净化等5个关键环节,共设10个采样点。结果表明:虾夷扇贝闭壳肌中表现出ACP及SOD活力,CAT活力很低,LSZ则未检出活力;在捕后106 h内,ACP活力呈现出先下降再升高的趋势,而SOD活力则呈先升高再下降再升高的趋势,二者与虾夷扇贝所受胁迫强度均有相关性。研究表明,闭壳肌中非特异性免疫因子ACP及SOD可以作为活品扇贝的胁迫应答因子及品质评价指标进行深入研究。     

捕后虾夷扇贝闭壳肌免疫因子与活品品质评价初探

为探索采捕后活品贝类的品质变化规律,以虾夷扇贝Patinopecten yessoensis为对象,研究了其闭壳肌中酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LSZ)、过氧化氢酶(CAT)等4个非特异性免疫因子的变化规律,试验基于活品虾夷扇贝的商品流通链分别进行湿藏和干藏处理,捕后贮藏分为离水至甲板、运输船中转、港口卸货、基地缓冲池和净化等5个关键环节,共设10个采样点。结果表明:虾夷扇贝闭壳肌中表现出ACP及SOD活力,CAT活力很低,LSZ则未检出活力;在捕后106 h内,ACP活力呈现出先下降再升高的趋势,而SOD活力则呈先升高再下降再升高的趋势,二者与虾夷扇贝所受胁迫强度均有相关性。研究表明,闭壳肌中非特异性免疫因子ACP及SOD可以作为活品扇贝的胁迫应答因子及品质评价指标进行深入研究。     

干露对活品虾夷扇贝闭壳肌SOD酶活性及其性质的影响

为探究活品贝类在流通过程中的品质变化与胁迫代谢的关系,以虾夷扇贝Patinopecten yessoensis为研究对象,将采捕后的活品扇贝分为3组,进行冷却及室温干藏处理,其中冷却干藏温度为4℃,分充氧包装组(CDo)和充气包装组(CDa),常温环境温度20℃为充气包装组(ADa),对3个处理组进行跟踪观察,并每日采样直至扇贝死亡。探究其闭壳肌粗酶提取液中超氧化物歧化酶(SOD)的变化规律及其酶学性质。结果表明:缺氧和高温导致扇贝加速死亡,冷却充氧包装组(CDo)在第6天全部死亡,冷却充气包装组(CDa)在第4天全部死亡,而常温充气包装组(ADa)则在第2天就全部死亡;冷却干露贮藏期间,闭壳肌水溶性蛋白质含量出现轻微下降,SDS-PAGE电泳分析显示,卵清蛋白(相对分子质量44000)条带附近的蛋白组分出现降解;扇贝闭壳肌中SOD活性与胁迫出现应答关联,常温组(ADa)SOD活性高于冷却组(CDo、CDa),充气组CDa又高于充氧组CDo,干露期间所有处理组的SOD活性整体呈现上升趋势;扇贝闭壳肌中SOD同样具有较高的耐热性,耐热温度为60℃,其p H稳定范围为中性,Cu⁽²⁺⁾、Zn(2+)、Zn⁽²⁺⁾、Fe(2+)、Fe⁽³⁺⁾、十二烷基硫酸钠(SDS)、柠檬酸和H_2O_2等对SOD活性有抑制作用,低浓度Mn(3+)、十二烷基硫酸钠(SDS)、柠檬酸和H_2O_2等对SOD活性有抑制作用,低浓度Mn⁽²⁺⁾对SOD活性有促进作用,高浓度Mn(2+)对SOD活性有促进作用,高浓度Mn⁽²⁺⁾则有抑制作用。初步研究表明,干露与活品虾夷扇贝中SOD活性有一定相关性,温度、缺氧等胁迫均引起虾夷扇贝闭壳肌中SOD活性应答,可以进行深入研究。     

糖代谢关键酶活性指示的虾夷扇贝活品品质变化

为建立虾夷扇贝Patinopecten yessoensis活品的品质评价指标,以探讨捕后干露贮藏过程中闭壳肌能量物质和糖代谢关键酶活性的变化规律,将鲜活的虾夷扇贝在冰箱(4℃)中进行干露贮藏,监测贮藏过程中闭壳肌中的三磷酸腺苷(ATP)、糖原、磷酸精氨酸(ArP)含量,以及糖代谢主要阶段关键酶——磷酸果糖激酶(Phosphofructokinase, PFK)、Opines脱氢酶(Opine dehydrogenases, OpDHs)、柠檬酸合酶(Citrate (Si) synthase,CS)活性、丙酮酸和章鱼碱含量的变化。结果表明:在干露贮藏过程中随着扇贝活力降低,闭壳肌中ATP含量呈现逐渐下降趋势,0 d时的含量为3.88μmol/g,干露贮藏3 d时基本完全消耗(P<0.05);主要储能物质糖原在0 d时的含量为16.38 mg/g,干藏1 d时降为10.11 mg/g,从第2天开始由于代谢减弱,糖原含量变化较小;ArP含量在初始0 d时为3.66μmol/g,干露贮藏3 d后已经基本被完全消耗(P<0.05);在干露贮藏过程中糖原初步酵解产物丙酮酸及无氧糖酵解产物章鱼碱含量均有积累,该过程中PFK酶活力呈先升高后降低趋势;CS酶活力在0 d时较低且随干藏时间的延长逐渐降低;Opines脱氢酶中章鱼碱脱氢酶(Octopine dehydrogenase,ODH)活力最大,其活力在干露贮藏过程中呈上升趋势,在0 d时酶活力为1.74U/mg,干露贮藏3 d时其上升为2.19U/mg,说明干露贮藏条件下虾夷扇贝主要以无氧代谢为主。研究表明,章鱼碱脱氢酶具有成为评价活品虾夷扇贝品质指标的潜力。     

糖代谢关键酶活性指示的虾夷扇贝活品品质变化

为建立虾夷扇贝Patinopecten yessoensis活品的品质评价指标,以探讨捕后干露贮藏过程中闭壳肌能量物质和糖代谢关键酶活性的变化规律,将鲜活的虾夷扇贝在冰箱(4℃)中进行干露贮藏,监测贮藏过程中闭壳肌中的三磷酸腺苷(ATP)、糖原、磷酸精氨酸(ArP)含量,以及糖代谢主要阶段关键酶——磷酸果糖激酶(Phosphofructokinase, PFK)、Opines脱氢酶(Opine dehydrogenases, OpDHs)、柠檬酸合酶(Citrate (Si) synthase,CS)活性、丙酮酸和章鱼碱含量的变化。结果表明:在干露贮藏过程中随着扇贝活力降低,闭壳肌中ATP含量呈现逐渐下降趋势,0 d时的含量为3.88μmol/g,干露贮藏3 d时基本完全消耗(P<0.05);主要储能物质糖原在0 d时的含量为16.38 mg/g,干藏1 d时降为10.11 mg/g,从第2天开始由于代谢减弱,糖原含量变化较小;ArP含量在初始0 d时为3.66μmol/g,干露贮藏3 d后已经基本被完全消耗(P<0.05);在干露贮藏过程中糖原初步酵解产物丙酮酸及无氧糖酵解产物章鱼碱含量均有积累,该过程中PFK酶活力呈先升高后降低趋势;CS酶活力在0 d时较低且随干藏时间的延长逐渐降低;Opines脱氢酶中章鱼碱脱氢酶(Octopine dehydrogenase,ODH)活力最大,其活力在干露贮藏过程中呈上升趋势,在0 d时酶活力为1.74U/mg,干露贮藏3 d时其上升为2.19U/mg,说明干露贮藏条件下虾夷扇贝主要以无氧代谢为主。研究表明,章鱼碱脱氢酶具有成为评价活品虾夷扇贝品质指标的潜力。     

复合保鲜剂对冻藏虾夷扇贝品质的影响

为研究复合保鲜剂对冻藏虾夷扇贝Patinopecten yessoensis品质的影响,以感官评定、挥发性氨基态氮(TVB-N)、细菌总数(TVC)、p H、硬度、弹性、内聚性、耐咀性、SH基和可溶性蛋白质含量为评定指标,进行了由10%氯化钠、3%乙醇、2%甲壳素、5%甘油、3%蔗糖与10%抗冻蛋白AFPs组成的复合保鲜剂对虾夷扇贝冷冻贮藏(-20℃±2℃)过程中品质变化的影响试验。结果表明:复合保鲜剂能有效地抑制TVB-N值的上升速度和硬度、感官评价值的降低速度,但对TVC、p H、弹性、内聚性、耐咀性、SH基总量和可溶性蛋白质几乎无影响。研究表明,经此复合保鲜剂处理后,冻藏虾夷扇贝的品质明显改善,贮藏货架期可得到适当延长。     

复合保鲜剂对冻藏虾夷扇贝品质的影响

为研究复合保鲜剂对冻藏虾夷扇贝Patinopecten yessoensis品质的影响,以感官评定、挥发性氨基态氮(TVB-N)、细菌总数(TVC)、p H、硬度、弹性、内聚性、耐咀性、SH基和可溶性蛋白质含量为评定指标,进行了由10%氯化钠、3%乙醇、2%甲壳素、5%甘油、3%蔗糖与10%抗冻蛋白AFPs组成的复合保鲜剂对虾夷扇贝冷冻贮藏(-20℃±2℃)过程中品质变化的影响试验。结果表明:复合保鲜剂能有效地抑制TVB-N值的上升速度和硬度、感官评价值的降低速度,但对TVC、p H、弹性、内聚性、耐咀性、SH基总量和可溶性蛋白质几乎无影响。研究表明,经此复合保鲜剂处理后,冻藏虾夷扇贝的品质明显改善,贮藏货架期可得到适当延长。     

差状态活品虾夷扇贝电子鼻指纹图谱的建立

以活品虾夷扇贝为研究对象,研究了采用金属氧化物传感器电子鼻检测虾夷扇贝在常温干露条件下挥发性气味特征与其存活状态的相关性,从而建立了差状态电子鼻指纹图谱。主成分分析能够将A～I批虾夷扇贝进行分类,同一批样品能够很好地聚集在一起,不同批次样品根据其样品的气味品质进行聚类,最后3批样品在散点图中分布非常集中,根据其存活率,将最后3批作为差状态模板建立指纹图谱。通过将未知待测样品T、N与差状态指纹图谱的相似性分析,结果发现它们和差状态指纹图谱与D、E样品之间的标准欧式距离和相关系数指数都比较接近,这与待测样品T、N的存活状态是一致的,表明通过建立活品虾夷扇贝差状态指纹图谱能够对未知待测样品的品质进行判别和评价。     

虾夷扇贝同工酶的生化遗传分析

用聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳,对虾夷扇贝Patinopecten yessoensis的闭壳肌、外套膜、消化盲囊、鳃和性腺5种组织中CAT、MDH、SOD、ME、EST、α～AMY、ADH、ACP和ALP9种同工酶的表达情况进行了分析,记录了20个基因座位,其中8个为多态。并分析了SOD酶谱带特征及虾夷扇贝遗传变异情况。     

不同单元化运输条件对活体虾夷扇贝存活率及主要营养成分的影响

为研究不同单元化运输条件对活体虾夷扇贝Patinopecten yessoensis存活率及其主要营养成分的影响,将净化暂养后的活体虾夷扇贝放入4种不同单元化运输箱中(不加冰聚乙烯保温箱组、加冰聚乙烯保温箱组、低温半导体保温箱组、5℃恒温箱组),测定运输箱内外温度、湿度,以及虾夷扇贝存活率、糖原、粗蛋白质和粗脂肪等指标的变化。结果表明:在密闭的单元化运输条件下,箱内温度及制冷方式影响着活贝的存活率,不加冰聚乙烯保温箱组、加冰聚乙烯保温箱组、低温半导体保温箱组、5℃恒温箱组虾夷扇贝全部死亡的时间分别为48、64、112、104 h;随运输时间的延长,4组虾夷扇贝的糖原、粗蛋白质和粗脂肪含量总体均呈下降趋势,存活期内不同单元化运输条件下的糖原和粗蛋白质含量均呈显著性差异(P<0.05),低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组虾夷扇贝的糖原、粗蛋白质含量随时间的变化缓于其他两组,但64⁹6 h时,低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组间粗蛋白质含量无显著性差异(P>0.05);存活期内不同单元化运输条件对虾夷扇贝粗脂肪含量的影响不显著(P>0.05),但在096 h时,低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组间粗蛋白质含量无显著性差异(P>0.05);存活期内不同单元化运输条件对虾夷扇贝粗脂肪含量的影响不显著(P>0.05),但在0⁴0 h时其脂肪含量随时间变化显著(P<0.05);低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组虾夷扇贝至糖原、粗蛋白质和粗脂肪含量较低所需时间为96 h,比不加冰组长56 h,比加冰组长48 h。研究表明,使用半导体和压缩机有效制冷的低温条件可使得活体虾夷扇贝糖原、粗蛋白质和粗脂肪消耗减缓,存活期延长。     

基于UPLC-MS方法的品质易逝期活品虾夷扇贝代谢组学研究

为探索易逝期贝类活品品质变化机制,以壳长(11.01±0.31)cm的虾夷扇贝Patinopecten yessoensis为研究对象,基于超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)的代谢组学方法研究了其湿藏条件下的代谢特征,试验设活品虾夷扇贝对照组(A)和湿藏组(C),并对虾夷扇贝闭壳肌的pH、糖原及代谢组学进行分析。结果表明:捕后湿藏的虾夷扇贝闭壳肌pH和糖原水平变化不大;经多元统计分析,品质易逝期湿藏36 h的虾夷扇贝闭壳肌中共检测出7个显著性差异代谢物,分别为二十二烷酸(behenic acid)、酪胺(tyramine)、脯氨酰谷氨酸(prolyl-glutamate)、二磷酸腺苷葡萄糖(ADP-glucose)、尿苷5′-二磷酸(UDP)、3-磷酸丝氨酸(3-phosphoserine)和柠檬酸(citrate);通路分析显示,三羧酸循环(TCA cycle)是最易受影响的代谢通路。研究表明,品质易逝期湿藏36 h条件下的活品虾夷扇贝与初始扇贝相比,传统理化指标变化不大,但其代谢组存在显著性差异,说明代谢组学方法可较为灵敏、全面地反映活品虾夷扇贝湿藏期间的实时状态。     

基于UPLC-MS方法的品质易逝期活品虾夷扇贝代谢组学研究

为探索易逝期贝类活品品质变化机制,以壳长(11.01±0.31)cm的虾夷扇贝Patinopecten yessoensis为研究对象,基于超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)的代谢组学方法研究了其湿藏条件下的代谢特征,试验设活品虾夷扇贝对照组(A)和湿藏组(C),并对虾夷扇贝闭壳肌的pH、糖原及代谢组学进行分析.结...     

不同单元化运输条件对活体虾夷扇贝存活率及主要营养成分的影响

为研究不同单元化运输条件对活体虾夷扇贝Patinopecten yessoensis存活率及其主要营养成分的影响,将净化暂养后的活体虾夷扇贝放入4种不同单元化运输箱中(不加冰聚乙烯保温箱组、加冰聚乙烯保温箱组、低温半导体保温箱组、5℃恒温箱组),测定运输箱内外温度、湿度,以及虾夷扇贝存活率、糖原、粗蛋白质和粗脂肪等指标的变化。结果表明:在密闭的单元化运输条件下,箱内温度及制冷方式影响着活贝的存活率,不加冰聚乙烯保温箱组、加冰聚乙烯保温箱组、低温半导体保温箱组、5℃恒温箱组虾夷扇贝全部死亡的时间分别为48、64、112、104 h;随运输时间的延长,4组虾夷扇贝的糖原、粗蛋白质和粗脂肪含量总体均呈下降趋势,存活期内不同单元化运输条件下的糖原和粗蛋白质含量均呈显著性差异(P0.05),低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组虾夷扇贝的糖原、粗蛋白质含量随时间的变化缓于其他两组,但64~96 h时,低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组间粗蛋白质含量无显著性差异(P0.05);存活期内不同单元化运输条件对虾夷扇贝粗脂肪含量的影响不显著(P0.05),但在0~40 h时其脂肪含量随时间变化显著(P0.05);低温半导体保温箱组和5℃恒温箱组虾夷扇贝至糖原、粗蛋白质和粗脂肪含量较低所需时间为96 h,比不加冰组长56 h,比加冰组长48 h。研究表明,使用半导体和压缩机有效制冷的低温条件可使得活体虾夷扇贝糖原、粗蛋白质和粗脂肪消耗减缓,存活期延长。     

两种壳色虾夷扇贝壳体尺性状对活体重影响效果的分析

选取9月龄壳颜色为白色和普通褐色虾夷扇贝（对照）,测量其壳长（X1）、壳高（X2）、壳宽（X3）、活体重（Y）,并采用相关分析和通径分析的方法计算两种壳色虾夷扇贝各性状的相关系数,定量分析了壳体尺性状对活体重的影响效果。结果表明：白色扇贝的壳长、壳高、活体重的表型值均大于褐色扇贝,且差异达极显著（P〈0.01）。相关分析结果表明,两种壳色扇贝的壳体尺性状与其活体重的相关系数均达到极显著水平（P〈0.01）,褐色虾夷扇贝壳长对活体重的直接影响最大,壳高最小;白色虾夷扇贝壳高对活体重的直接影响最大,壳宽最小。经多元回归分析建立了两种壳色扇贝壳体尺性状估计活体重的回归方程,即Y白贝=-16.081＋0.168X1＋0.288X2＋0.577X3,Y褐色贝=-12.085＋0.281X1＋0.129X2＋0.402X3。本研究结果可为虾夷扇贝遗传育种的亲本选择提供参考。     

两种壳色虾夷扇贝壳体尺性状对活体重影响效果的分析

选取9月龄壳颜色为白色和普通褐色虾夷扇贝(对照),测量其壳长(X1)、壳高(X2)、壳宽(X3)、活体重(Y),并采用相关分析和通径分析的方法计算两种壳色虾夷扇贝各性状的相关系数,定量分析了壳体尺性状对活体重的影响效果。结果表明:白色扇贝的壳长、壳高、活体重的表型值均大于褐色扇贝,且差异达极显著(P<0.01)。相关分析结果表明,两种壳色扇贝的壳体尺性状与其活体重的相关系数均达到极显著水平(P<0.01),褐色虾夷扇贝壳长对活体重的直接影响最大,壳高最小;白色虾夷扇贝壳高对活体重的直接影响最大,壳宽最小。经多元回归分析建立了两种壳色扇贝壳体尺性状估计活体重的回归方程,即Y白贝=-16.081+0.168X1+0.288X2+0.577X3,Y褐色贝=-12.085+0.281X1+0.129X2+0.402X3。本研究结果可为虾夷扇贝遗传育种的亲本选择提供参考。     

虾夷扇贝底播增殖产量影响因素分析

在我国贝类养殖中,虾夷扇贝具有非常重要的经济价值。虾夷扇贝近年来的产量正稳步趋升。在全球虾夷扇贝养殖产中,我国是全球产量最多的国家。虾夷扇贝的养殖方式主要有2种,即底播和浮筏。本文就虾夷扇贝底播养殖产量的影响因素,以期能够提高虾夷扇贝的养殖产量。     

栉孔扇贝♀×虾夷扇贝♂单对杂交子一代的ISSR分析

用ISSR—PCR（Inter Simple Sequence Repeats PCR）技术对栉孔扇贝Cldamys farreri♀和虾夷扇贝Patinopecten yessoensis ♂及其单对杂交子一代担轮幼虫进行了分析。结果表明：从20个ISSR引物中筛选出4个引物对栉孔扇贝♀、虾夷扇贝♂及其单对杂交子一代担轮幼虫进行PCR扩增，共得到153个清晰稳定的扩增位点，其中母本栉孔扇贝的特异位点有38个，父本虾夷扇贝的特异位点有32个。对ISSR扩增图谱的分析结果证实，所研究的杂交子代是栉孔扇贝和虾夷扇贝的杂交种。杂交子代与母本栉孔扇贝的平均遗传相似性系数为0．6086，与父本虾夷扇贝的平均遗传相似性系数为0．4402，表明杂交子代在遗传上偏向于母本栉孔扇贝。     

温度对海湾扇贝与虾夷扇贝及其杂交受精、胚胎和早期幼体发育的影响

本文报道了温度对海湾扇贝和虾夷扇贝及其杂交受精胚胎和早期幼体发育的影响结果。在实验温度下,各亲本组合受精的适温和最适温度范围分别为：海湾扇贝１０～３０℃和１９～２８℃,虾夷扇贝５～２２℃和１０～１９℃;海湾扇贝♀×虾夷扇贝♂１０～３２℃和１９～２８℃,虾夷扇贝♀×海湾扇贝♂１０～２５℃和１５～１９℃。在适温范围内,海湾扇贝和虾夷扇贝受精率达１００％,两杂交组合可达７０％以上,高温或低温对受精都不利。各亲本组合胚胎发育的适温和最适温度范围分别为：海湾扇贝１５～２５℃和１７～２２℃,虾夷扇贝１０～１９℃和１３～１７℃;海湾扇贝♀×虾夷扇贝♂１５～２５℃和１７～２２℃,虾夷扇贝♀×海湾扇贝♂１０～１９℃和１５～１７℃。温度过高或过低对各亲本组合胚胎发育速度和成活率都有明显的影响。