轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选

建立轮钟花的组织培养方法,为轮钟花进一步开发利用提供依据,以轮钟花茎段、叶及种子为外植体,通过添加不同浓度的6-BA、NAA和2,4-D于MS或1/2MS培养基中,筛选轮钟花组织培养繁殖的最适培养基及最佳外植体。结果表明:诱导茎段、叶形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L6-BA+1.0mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导种子形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导茎段愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D;种子愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L2,4-D;诱导种子不定芽的最适培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA,分化率为80.0%;种子是诱导轮钟花不定芽的最佳外植体。     

香叶天竺葵组培快繁体系的研究

以香叶天竺葵无菌苗叶片为外植体,MS为基本培养基进行组培快繁研究,结果表明:愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;不定芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系长势良好.     

刺槐子叶的不定芽诱导及植株再生

以刺槐种子在无菌条件下播种生长7 d的子叶为外植体,研究不同植物生长调节剂和继代培养次数对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:生长调节剂种类和质量浓度对刺槐子叶的愈伤组织诱导及愈伤组织再分化有一定影响,刺槐子叶诱导愈伤组织的最佳培养基:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L,诱导率为98.9%,愈伤组织再生不定芽的最佳培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,再生率为74.4%。愈伤组织的不定芽诱导率随继代次数的增加呈下降趋势。对刺槐子叶进行了直接诱导不定芽的试验,诱导率最高达87.8%,其培养基为:MS+6-BA 5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L。     

大花葱愈伤组织诱导分化及不定芽增殖研究

为给今后建立大花葱组培种球繁殖技术体系提供技术积累,特对大花葱愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖的相关技术要点进行了研究。结果表明,以大花葱鳞球茎为外植体,用0.1%升汞消毒15 min,外植体成活率达62.5%;外植体在MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+白砂糖30 g/L培养基中培养10 d,然后转入MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+白砂糖30 g/L培养基中,愈伤诱导率为93.3%;在愈伤组织再分化形成不定芽环节中,以培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+白砂糖30 g/L的分化效果最佳,分化率为77.8%;对不定芽进行增殖培养,以培养基MS+6-BA3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+白砂糖30 g/L的增殖效果最好,增殖倍数达2.65倍。     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系研究

以防风为材料,研究不同外植体、激素组合、培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,茎段是防风组织培养较为理想的外植体材料。诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA,最高出愈率为96.7%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高诱导率为75%;诱导根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,生根率达65%;组培苗的移栽成活率达80%。     

大花萱草‘香宝’再生体系的建立

以萱草‘香宝’的花托为外植体,用正交试验法研究了不同激素及其不同浓度对愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、不定芽诱导和不定根诱导的影响.结果表明:6-BA是影响‘香宝’愈伤组织诱导的主要因素,各因素影响的主次关系为6-BA>2,4-D>NAA>KT,最适愈伤诱导的培养基为MS+6-BA 2mg/L+2,4-D 2mg/L+NAA0.3mg/L,愈伤诱导率为81.28%;6-BA是影响愈伤增殖的主要因素,各因素影响的主次关系为6-BA>NAA>KT>2,4-D,愈伤组织增殖的最佳配方为MS+6-BA 1 mg/L+KT 1 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+NAA0.05mg/L,愈伤增值倍数为5.271;GA是影响不定芽诱导的主要因素,各因素影响的主次关系为GA>6-BA>NAA,最适不定芽诱导的培养基为MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.1mg/L+GA 0.5mg/L,不定芽诱导率为78.21%;IAA是影响不定根诱导的主要因素,因素影响的主次关系为IAA>MS>蔗糖>NAA,最适不定根诱导的培养基为1/2MS+NAA 0.3mg/L+蔗糖20g/L,不定根诱导率为94.4%.     

桃遗传转化再生体系的建立与优化

以桃不同胚龄胚为外植体,建立桃遗传转化再生体系.结果表明:花后50 d的胚均能诱导出愈伤组织,并可分化出不定芽.胚愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA0.25 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L的效果最好,平均诱导率可达99.8%.将胚愈伤组织接种在培养基MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L上,愈伤组织转变为致密型,不定芽分化率为37.5%.将不定芽用100 mg/LIBA浸蘸其基部转移到不含激素的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率为82.0%.花后75d的成熟胚不定芽的直接诱导率达到96.1%.     

大幅度提高马齿苋组培效率的培养环境条件优化

为了提高马齿苋的组培效率,解决马齿苋出愈时间迟、愈伤组织诱导率不高、愈伤组织诱导需要使用2,4-D、不定芽增殖来源有限等问题,根据马齿苋的最适生长条件,将组织培养环境调整为温度(30±1)℃、全光照,并从无菌苗上直接取材进行外植体培养。结果表明:种子在高温、全光照条件下萌发快,且无菌苗长势好。取材于无菌苗上的根、茎和叶均可以在不添加2,4-D的MS培养基中脱分化形成愈伤组织,且茎在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中、叶在MS+NAA 1.5 mg/L+6-BA 0.5~1.5 mg/L培养基中的初始出愈时间均提前至4 d,且诱导率均达到100%,愈伤组织长势旺盛。带腋芽的茎段在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 5.0 mg/L培养基中可以直接分化出大量不定芽,增殖率达10.5。在最适光温环境下,马齿苋外植体出愈迅速,愈伤组织诱导率和不定芽增殖率大幅度提高。     

小盐芥下胚轴再生体系的建立

以小盐芥下胚轴为外植体,研究了不同激素与不同浓度组合对愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明,MS 6-BA 2,4-D组合能诱导出愈伤,诱导率为100%。MS 6-BA NAA组合既能诱导出愈伤又能分化不定芽,愈伤诱导率为100%,激素不同浓度不定芽分化率不同,最佳分化培养基为MS 2.5mg/L 6-BA 0.1mg/L NAA,不定芽分化率为43%。生根培养基为1/2MS,生根率为74%。     

H.11648麻离体培养与植株再生的研究

以H.11648麻组培苗叶片为外植体,研究了不同生长调节剂对诱导愈伤、不定芽的分化、增殖及生根的影响。结果表明:在MS+0.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.23%植物凝胶(pH值5.8)培养基上诱导出愈伤组织为佳;在MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中,愈伤组织不定芽分化率最高;将小苗移栽至基质配比为土壤∶椰糠=2∶1的育苗盆中,成活率达96%。     

轮叶党参叶片的组织培养研究

以轮叶党参叶片为外植体,研究了培养基及不同激素组合对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,叶片作为外植体可以比较容易地诱导出愈伤组织,最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+KT 0.5mg/L,最高出愈率为94.2%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,最高诱导率可达69.2%;根诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,生根率达85.9%,建立了较为完善的轮叶党参再生体系。     

剑麻的组织培养和快速繁殖

以剑麻的嫩芽为外植体,在N6 2,4-D2mg/L 6-BA2mg/L NAA0.5mg/L培养基上诱导出愈伤组织,再在MS 6-BA2mg/L NAA0.05mg/L培养基上诱导不定芽和增殖培养,不定芽在MS培养基上诱导生根形成完整植株,生根率达100%。将小苗移栽至基质配比为椰糠∶河沙等于1∶1的育苗盆中,成活率达100%。     

落新妇组培快繁技术研究

以落新妇种子作为外植体进行组培快繁,结果表明:以嫩叶形成愈伤组织诱导芽的方式,实现丛生芽的再生。适宜诱导分化的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,最适增殖的培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,形成的植株转接到1/2MS+NAA 0.5mg/L,生根率达90%以上。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

[目的]寻求代替ZT提高猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的最佳激素组合。[方法]以美味猕猴桃离体茎段为外植体,以MS为基本培养基,附加2,4-D0.5、1、2.0mg/L和NAA0.1、0.3、0.5mg/L与6-BA0.5mg/L分别组成诱导愈伤组织的6个激素组合,并以同样浓度的2,4-D和NAA与6-BA1.0mg/L分别组成分化芽的6个组合激素,研究不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响。[结果]6种不同浓度的激素组合对猕猴桃茎段愈伤组织均有一定的诱导作用,其中2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L的组合有利于愈伤组织诱导,诱导率达86.1%;绿色愈伤组织在MS培养基附加激素2,4-D+6-BA组合中芽的分化率很低,而在附加NAA+6-BA组合中芽的分化率较高,其中,NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L的组合有利于芽分化,芽分化率为75.2%。[结论]2,4-D与6-BA组合对猕猴桃绿色愈伤组织的芽分化有一定抑制作用。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。