高效液相色谱法分析霉菌干酪中游离氨基酸含量

近年来,国内外对干酪的研究工作在不断深入开展。霉菌干酪在干酪研究中具有非常重要地位。霉菌干酪在成熟过程中产生一定量氨基酸,它对干酪的风味产生重要影响。因此,对霉菌干酪中的游离氨基酸的组成和含量进行监测,以获得霉菌干酪过程中氨基酸变化模式具有非常重要的意义,目前国内尚未有对霉菌干酪中游离氨基酸进行检测的报道。目前柱前衍生反相高效液相色谱测定氨基酸技术取得很大进展[1-2]。邻苯二甲醛(OPA)衍生步骤简单、反应速度快,剩余试剂不干扰测定,因此在柱前衍生试剂中以OPA的应用最为广泛。本文采用HP1100系列高效液相色…     

AccQ-Tag-HPLC法测定烟叶生长过程中游离氨基酸的变化

[目的]在AccQ-Tag分析包的基础上建立一种适合烟草中游离氨基酸测定的方法。[方法]采用WATERS公司的AccQ-Tag试剂包作为构建方法的基本条件,通过优化烟草中游离氨基酸的前处理和色谱条件,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂与各氨基酸柱前定量衍生后,再用AccQ-TagTM柱梯度洗脱,建立了烟叶中游离氨基酸的AccQ-Tag-HPLC测试方法。[结果]用该方法测定烟叶杀青样品中的游离氨基酸,能够分离检测烟叶中的16种游离氨基酸,其回收率均在82.8%～105.3%,标准偏差均在2.5%以内,具有较好的重现性和回收率。烤烟杀青样中游离氨基酸以脯氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸和丙氨酸含量较高。[结论]AccQ-Tag-HPLC法是一种实用的烟草中游离氨基酸的分析方法,适于烟叶中游离氨基酸从旺长期到成熟期的不同时段含量变化的测试。     

反相高效液相色谱法在测定白肋烟烟叶游离氨基酸含量中的应用

应用反相高效液相色谱技术建立了白肋烟烟叶游离氨基酸的测定方法.试验前处理首先采用超声波萃取,而后用邻苯二甲醛/3-巯基丙酸作为衍生剂进行柱前衍生,衍生化后进行液相色谱分析.结果表明,该方法的回收率为95.3%~100.7%,RSD为2.32%~9.24%(n=6).利用该方法对湖北恩施中二级的白肋烟烟叶中的游离氨基酸进行了测定,有17种氨基酸被测出,其中天氡氨酸的含量最高,约占总量的65%,胱氨酸含量最低,约占总量的0.2%.     

柱前衍生HPLC测定阿胶中17种水解氨基酸含量

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)同时测定阿胶中17种水解氨基酸含量的方法。方法用6 mol/L盐酸溶液水解阿胶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂;用Hypersil BDS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果 17种氨基酸在60 min内均可得到很好的分离,回收率为97.4%～100.1%,RSD为1.6%～3.4%。结论建立的方法可靠,可用于阿胶中17种水解氨基酸的含量测定。     

糯玉米自交系中游离氨基酸的组成及含量分析

【目的】研究糯玉米自交系中游离氨基酸的组成及含量,对糯玉米种质资源的营养品质进行评价。【方法】采用邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定了60份糯玉米自交系籽粒的游离氨基酸组成及含量,并采用主成分分析法进行综合评价。【结果】从60份糯玉米自交系中共检测出16种氨基酸,最少的检测出14种氨基酸,其中JN57的氨基酸总量最高（25.165 mg/g）,JN21的氨基酸总量最低（6.403 mg/g）,平均为12.236 mg/g,含量高于平均值的有25份。人体必需氨基酸(EAA)含量在2.47～13.97 mg/g,占游离氨基酸总量的 29.43%～75.52%。对60份糯玉米自交系所含的16种氨基酸进行主成分分析及综合评价,得分值在前3位的依次为JN57、JN59和JN55。【结论】60份糯玉米自交系的游离氨基酸含量具有明显的遗传多样性,其中JN57、JN59及JN55的品质较优,JN21的品质最差。     

微孔草籽粕氨基酸含量的测定与评价

为综合开发利用微孔草资源,以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生试剂,采用柱前衍生反相高效液相色谱法对微孔草籽粕的17种氨基酸含量进行了测定。结果表明:微孔草籽粕中各种氨基酸含量丰富,总含量达99.392mg/g,7种必需氨基酸含量为40.086mg/g,亮氨酸含量高达18.995mg/g;氨基酸配比合理,E/T为40.33%,E/N为0.676%,非常接近FAO/WHO提出的理想模式。超临界CO2萃取微孔草籽粕在医学和营养学上均具有较高的研究与开发价值。     

高效液相色谱法测定酵母抽提物中谷氨酸的研究

采用高效液相色谱柱前衍生法测定酵母抽提物中谷氨酸的含量,以苯异硫氰酸作为柱前衍生试剂,在C18柱上,弱碱性条件以保留时间定性、外标法定量。结果表明,在0.2~1.0mg/mL线性范围内,线性相关系数为0.999816,相对标准偏差小于5%,回收率在95%~110%,样品检测结果良好。该方法还可以用于其他氨基酸的检测。     

柱前衍生RP-HPLC法测定狗尾草种子氨基酸含量

【目的】采用柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)法检测狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量,为阐明其应用价值提供支撑。【方法】制备狗尾草种子的水解氨基酸样品溶液和游离氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺进行柱前衍生,建立RP-HPLC法,检测方法的精密性、稳定性、重复性。利用RP-HPLC法,采用梯度洗脱方法,检测狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸含量。【结果】21种氨基酸的检测浓度线性范围为0.001 9~2.700 0μmol/mL,相关系数R2均≥0.999 0。21种游离氨基酸的平均加样回收率在87.50%~100.20%,相对标准偏差(RSD)在0.82%~2.46%;水解氨基酸的平均加样回收率在91.10%~100.21%,RSD在0.52%~2.08%。必需氨基酸和半必需氨基酸在狗尾草21种游离氨基酸和水解氨基酸中均含有,但水解后色氨酸、天冬酰胺、组胺酰胺遭到了破坏,含量较低。【结论】建立的氨基酸测定方法稳定、快速、精密度高、线性范围宽,适合狗尾草种子中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。狗尾草种子中含有丰富的游离和水解氨基酸。     

微波提取高效液相色谱法测定百合中氨基酸的研究

采用柱前衍生-反相高效液相色谱法对3种百合中13种游离氨基酸含量和组成进行了测定。通过正交试验分析,确定百合中游离氨基酸的最佳提取条件为:乙酸浓度为1%,物料比为1∶5,微波功率选择中低火,微波提取时间为2.0 min。结果表明,百合中以精氨酸的含量最高,占总游离氨基酸的40%~50%左右,湖南药用百合中精氨酸含量最高,为13.39 mg/g,湖南产地百合游离氨基酸含量高于兰州产地百合含量的40%左右。这可为湖南百合的药用价值研究提供一定的参考依据。     

AccQ·Tag柱前衍生反相高效液相色谱法测定果品中氨基酸含量

采用柱前衍生反相高效液相色谱法(AccQ·Tag法)同时测定16种氨基酸,氨基酸浓度在2.5-20 μmol/L时,其峰面积和氨基酸浓度的线性相关系数均在0.999以上,用此法测定了新疆地产4种特色果品中氨基酸的含量.